急性腦梗死血小板聚集及活化指標的變化及臨床意義

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急性腦梗死血小板聚集及活化指標的變化及臨床意義

但剛,江忠勇,劉媛,胡莉娜,熊杰

[摘要]目的觀察急性腦梗死(acute cerebral infarction,ACI)患者血小板聚集性及血小板活化指標P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa的變化,探討活化血小板在ACI發病中的作用。方法選取75例急性腦梗死患者作為ACI組,選取78例健康體檢者作為正常對照組。利用血小板聚集測試儀、流式細胞儀,檢測兩組對象血小板聚集率及血小板表面表達的P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa等活化指標含量。結果與正常對照組比較,ACI患者組的血小板聚集率明顯升高(P<0.05),血小板表面表達的P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa明顯升高(P<0.05)。結論ACI患者血小板活化水平明顯升高,聚集功能明顯增強,患者處于高凝狀態,是導致ACI發生的重要原因之一。

[關鍵詞]腦梗死；血小板聚集；P選擇素；GPⅡb/Ⅲa

急性腦梗死(acute cerebral infarction,ACI)主要是由于供應腦部血液的動脈出現粥樣硬化和血栓形成,導致血流減慢,使血小板極易與粥樣斑塊發生黏附。一旦腦部小動脈循環出現缺血、缺氧,將會進一步引起腦組織的軟化壞死,其中以ACI最為常見。據不完全統計,ACI發病率約50%~80%[1],致殘率極高。

在ACI的病理生理過程中,血小板活化起著非常重要的作用,而高血壓、糖尿病、肥胖、脂代謝異常、動脈粥樣硬化等也是腦血管病的重要危險因素,與血小板活化關系密切[2]。本研究應用血小板聚集儀檢測血小板聚集功能,流式細胞術檢測血小板活化指標(血小板P-選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa復合物),研究這些指標在ACI患者體內的含量變化,并與正常對照組比較,探討ACI患者血小板聚集及活化相關指標的變化及臨床意義。

1對象與方法

1.1研究對象收集我院神經內科2012年8月~2014年4月收治的急性腦梗死的住院患者病例資料,共75例。納入標準：ACI診斷均符合2002年中國腦血管病診斷與鑒別診斷防治指南的診斷標準[3]：通過CT或MRI證實為腦梗死,急性發病并在發病后36 h內入院治療。排除標準：腦血管畸形、房顫、自身免疫性疾病及惡性腫瘤患者；近期服用過抗血小板藥；近期有感染性疾病或外周血白細胞升高。75例中,男性42例,女33例,年齡37~88(65.8±12.1)歲。另選取同期來我院進行健康檢查的正常人78例為對照組,排除腦血液病、高血壓肝腎疾病、腫瘤等疾病患者,其中男41例,女37例,年齡30~79(66.8±19.2)歲。兩組性別、年齡差異無統計學意義。

1.2標本采集患者入院后溶栓治療前,抽取臥位外周靜脈血,血小板聚集功能檢測抽取靜脈血2.7 ml,109 mmol/L枸櫞酸鈉抗凝；血小板P-選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa檢測抽取靜脈血各2 ml,EDTA-K2抗凝。對照組體檢時采集標本,方法同上。

1.3檢測指標

1.3.1血小板聚集功能檢測采用美國Helena Laboratories公司生產的血小板聚集儀(型號：Agg RAM)進行檢測,所有檢測試劑均為該儀器配套試劑,誘導劑為腺苷二磷酸(ADP),ADP最終誘導濃度5 μmol/L。嚴格按照試劑操作步驟進行檢測。

1.3.2血小板活化指標-P選擇素、膜GPⅡb/Ⅲa檢測選用美國Beckman Coulter公司生產的Epics XL流式細胞儀,試劑為單克隆抗體:CD62P PE為藻紅蛋白標記的抗P選擇素的McAb,PAC-1FIT C為異硫氰酸熒光素標記的抗GPⅡb/Ⅲa(即纖維蛋白原受體,Fib-R)McAb,均購自美國BD公司。嚴格按照試劑操作步驟進行檢測。

2結果

與正常對照組比較,ACI組血小板聚集率明顯升高(P<0.05),血小板P選擇素和血小板膜GPⅡb/Ⅲa也明顯升高(P<0.05)。見表1。

表1　兩組血小板聚集率、P選擇素和GPⅡb/Ⅲa表達變化的比較

注：與正常對照組比較,①P<0.05

3討論

血小板聚集功能是血小板的重要生理特性,是指血小板與血小板之間的黏附及聚集。血小板相互作用聚集成團,是參與止血和血栓形成的重要過程[4]。血小板聚集后能夠增強血栓的形成,而血栓又通過磷酸化進一步激活血小板,被激活的血小板強烈促進局部血栓的形成[5]。本組資料顯示,ACI患者血小板聚集功能與正常對照組比較,明顯增強(P<0.05),提示血小板聚集功能增強是ACI患者發病的重要因素之一。

通常情況下,P選擇素表達水平較低,甚至會不表達[6]。P選擇素在多個病理生理過程中都發揮著重要的作用,如血栓形成、動脈粥樣硬化等。有研究表明,在血栓前狀態存在血小板活化,P選擇素可增高。P選擇素水平增高,不僅反映血小板活化、內皮功能受損,而且也反映了活動性炎性反應,同時也是斑塊不穩定的敏感指標[7]。本研究結果顯示,腦梗死患者血小板P選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa也明顯升高,表明它們與腦梗死的發生有內在聯系。血小板P選擇素和膜GPⅡb/Ⅲa復合物是血小板活化的重要指標,當血小板活化之后,就會導致血小板膜糖蛋白Ⅱb/Ⅲa復合物產生變化,有利于GPⅡb/Ⅲa與纖維蛋白原之間更好地結合[8]。因此，通過檢測GPⅡb/Ⅲa的表達量,可以更加精準、及時地發現血小板是否活化。

活化血小板表達的膜糖蛋白參與血小板的黏附,在促進血栓形成、腦梗死啟動中起著重要作用[9]。本研究結果提示,血小板聚集功能和血小板P選擇素和GPⅡb/Ⅲa復合物可作為血小板活化的敏感指標,在腦梗死的預防和診斷中占重要地位,可作為ACI輔助診斷及療效判定的參考指標。

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Changes and clinical significance of platelet aggregation and activation markers in patients with acute cerebral infarction

Dan Gang,Jiang Zhongyong,Liu Yuan,Hu Lina,Xiong JieDepartment of Laboratory,Clinical Trial and Medical Research and Service Center,General Hospital of Chengdu Military Command,Chengdu,Sichuan,610083,China

[Abstract]ObjectiveTo observe the changes of platelet aggregation and platelet activation markers P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa in patients with acute cerebral infarction(ACI)and study the role of platelet activation in the pathogenesis of ACI.MethodsPatients with ACI were selected to constitute an ACI group(n=75)and healthy subjects were selected to constitute a control group(n=78).Aggregation tester and flow cytometry were used to check the platelet aggregation and contents of activation markers expressed on platelet surface,including P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa.ResultsCompared with the control group,the platelet aggregation of the patients in the ACI group increased significantly(P<0.05),and P selectin and membrane GPⅡb/Ⅲa expressed on platelet surface increased significantly(P<0.05).ConclusionIt is one of the important reasons to cause the incidence of ACI that the level of platelet activation in patients with ACI becomes significantly higher,the aggregation function is enhanced obviously,or the patients are in hypercoagulable state.

[Key words]cerebral infarction;platelet aggregation;P selectin;GPⅡb/ⅢA

(收稿日期:2014-10-29)

文章編號1004-0188(2015)02-0124-03

doi:10.3969/j.issn.1004-0188.2015.02.004

中圖分類號R 743.32

文獻標識碼A

通訊作者:熊杰,E-mail：byx410@sina.com

基金項目:四川省衛計委科研課題(140007)；國家高技術研究發展計劃(863計劃)(2011AA02A111)
作者單位:610083 成都,成都軍區總醫院臨床實驗醫學研究與保障中心檢驗科