不同戊型肝炎病毒IgG抗體檢測試劑盒臨床對比分析

魯清月，李春艷，李曉霞，張學東

(鄭州安圖生物工程股份有限公司，鄭州 450016)

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不同戊型肝炎病毒IgG抗體檢測試劑盒臨床對比分析

魯清月※，李春艷，李曉霞，張學東

(鄭州安圖生物工程股份有限公司，鄭州 450016)

摘要：目的比較磁微粒化學發光試劑與酶聯免疫吸咐測定試劑檢測戊型肝炎病毒IgG抗體的結果差異。方法選取企業樣本庫2010年1月至2012年5月住院和門診患者935例，分別用A廠家酶聯免疫吸咐測定試劑和鄭州安圖生物磁微粒化學發光試劑測定戊型肝炎病毒IgG抗體平行檢測，不符樣本用C廠家酶聯免疫吸咐測定試劑復測。結果鄭州安圖生物磁微粒化學發光試劑和戊型肝炎病毒IgG抗體A廠家酶聯免疫吸咐測定試劑陽性一致百分比為95.5%，陰性一致百分比為97.7%，總符合率為97.2%，差異無統計學意義(P>0.05)。結論磁微粒化學發光戊型肝炎病毒IgG抗體試劑與酶聯免疫吸咐測定試劑臨床性能相似，適于臨床推廣應用。

關鍵詞：戊型肝炎病毒；磁微粒化學發光；臨床考核

戊型肝炎病毒(hepatitis E virus，HEV)主要通過糞-口途徑傳播，HEV感染主要發生在一些衛生條件較差的發展中國家，在發達國家大部分病例為輸入性的[1]。戊型肝炎不同的基因型被認為只有一種血清型[2]。用原核細胞分別表達的HEV第二、三讀碼框架的3′端編碼多肽，證明具有抗原性，可用作組裝診斷試劑盒的抗原材料，將第二、三讀框的B細胞表位決定簇片段嵌合表達可得嵌合多肽，對第二、三讀框都有抗原反應，并且抗原性較分別表達的肽段強，當前國內外檢測戊型肝炎均用ELISA[3]。

HEV-IgG抗體作為既往感染和流行病學調查的指標,目前檢測抗體所用的試劑品種繁多，各試劑盒所使用的抗原片段不同，導致各種試劑的最低檢測濃度不同，對恢復期血清中的IgG抗體陽性檢出率有很大差異[4]。基于此，研究不同區域抗原的抗原性篩選出檢出率高、特異性強、有互補或增強作用的抗原及其組合對制備HEV診斷試劑具有重要意義[4]。本研究以鄭州安圖生物工程股份有限公司研發的戊型肝炎病毒磁微粒化學發光檢測試劑盒(HEV-IgG)為考核試劑盒，與市場占有率高，客戶易于接受的A廠家生產的酶聯免疫吸咐測定試劑盒作為參比試劑盒，對比磁微粒化學發光試劑盒與酶聯免疫吸咐測定試劑盒的陽性一致百分比、陰性一致百分比和總符合率。

1資料與方法

1.1一般資料選取企業樣本庫2010年1月至2012年5月住院和門診患者935例，其中男492例、女443例，年齡10～75歲，平均(47±11)歲。

1.2儀器和試劑考核試劑：戊型肝炎病毒抗體IgG試劑盒(磁微粒化學發光法)，鄭州安圖生物工程股份有限公司研發產品。磁微粒化學發光檢測儀(Lumo)、洗板機(iWO)和PHomo酶標儀，由安圖實驗儀器(鄭州)有限公司生產。參比試劑：A公司生產的戊型肝炎病毒抗體IgG試劑盒(酶聯免疫法)。第三方試劑：C公司生產的戊型肝炎病毒抗體IgG試劑盒(酶聯免疫法)。

1.3方法采靜脈血及時分離血清，置-20 ℃保存備測。嚴格按照試劑盒說明書操作和判定結果。采用雙盲法，抽取935份血清樣本用安圖生物研發試劑盒與A試劑盒對比進行平行測定。不符樣本用第三方C廠家試劑盒進行確認。以A試劑盒為權威參比試劑盒進行統計學分析。

1.4統計學方法應用SPSS 18.0統計軟件進行數據處理，計數資料比較采用配對χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2結果

2.1陰陽性結果統計分析考核試劑與參比試劑的陽性一致百分比為95.5%，陰性一致百分比為97.7%，總符合率為97.2%，差異無統計學意義(χ2=1.88，P>0.05)，見表1。

表1　對照試劑和考核試劑對比分析　(例)

2.2ROC曲線分析 ROC曲線下面積在0.9以上時診斷價值較高，本研究評估ROC曲線下面積為0.994，標準誤為0.003，漸進P為0.000，漸進95%CI0.987～1.000,核試劑具有較高的診斷價值，見圖1。

圖1　受試者工作特征曲線評估考核試劑盒與參比試劑盒的

2.3不符樣本用第三家試劑檢測結果用第三方試劑C對不符樣本進行復測，復測結果顯示，9份安圖試劑檢測結果為陰性，A試劑檢測結果陽性樣本，C試劑檢測結果均為陰性，C試劑檢測結果全部與安圖試劑檢測結果一致；17份安圖試劑檢測結果陽性，A試劑檢測結果陰性樣本，C試劑檢出9份，C試劑檢測結果與安圖試劑檢測結果一致，其余8份C試劑檢測結果為陰性，與A試劑檢測結果一致。

3討論

由于HEV-IgG無確證檢測方法，一種新的體外診斷試劑盒可以通過與權威廠家試劑盒對比檢測臨床標本，比較分析結果，鑒定該試劑盒的優劣[5]。本研究表明，HEV-IgG安圖生物磁微粒化學發光試劑與A廠家酶聯免疫吸咐測定試劑臨床結果用ROC曲線作圖比較，曲線下面積為0.994，符合率好。在本診斷試驗的評價研究中，ROC曲線是以每一個檢測結果作為可能的診斷界值(cut-off point)，計算得到相應的真陽性和假陽性，以假陽性率(即1-特異度)為橫坐標、以真陽性率(即靈敏度)為縱坐標繪制而成的曲線，ROC曲線可從直觀上表明診斷試驗的準確度[6]。因其考慮了所有可能的診斷界值的影響，因而能更客觀全面地評價診斷試驗的準確性[7]。

作為定性試劑盒安圖生物的HEV-IgG試劑盒，安圖臨床研究試劑盒和對比A試劑盒的陽性一致百分比為95.5%，陰性一致百分比為97.7%，總符合率為97.2%，差異無統計學意義(P>0.05)。根據第三方試劑C對26不符樣本的檢測結果可知考核試劑安圖試劑臨床性能優越，與參比A試劑相比，有較高的臨床一致性。

目前，主要商品化的試劑盒所用活性材料分兩種：一種是以HEV的ORF2構象免疫優勢表位為基礎表達的重組抗原(E2-IgG)，另一種是ORF2片段為模板序列合成的多肽與 ORF3重組蛋白的混合抗原(Gene labs試劑盒) 和合成肽為抗原。ORF2編碼病毒主要結構蛋白，組成病毒衣殼[8]，在HEV-Ⅳ和Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中存在差異[9]。根據臨床符合率和相關性，推斷參比酶聯免疫吸咐測定試劑盒A與安圖磁微粒化學發光試劑盒檢測HEV-IgG用的包被抗原結構相似。

綜上所述，安圖HEV-IgG磁微粒化學發光法考核試劑盒，通過與市場占有率高、客戶評價度高的A廠家酶聯免疫吸咐測定試劑盒進行雙盲法臨床平行測定后，進行方差檢驗和ROC曲線分析，顯示出較高符合率，臨床性能的差異無統計學意義。又因為磁微粒化學發光法作為目前免疫學檢驗發展的主流方法，具有靈敏度高、特異度強和適于全自動操作等優點，所以磁微粒化學發光法檢測HEV-IgG適宜作為臨床診斷的輔助手段推廣使用。

參考文獻

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1343.

Comparative Analysis on the Performance of Different Detection Kits in Detecting Hepatitis E Virus IgG AntibodiesLUQing-yue,LIChun-yan,LIXiao-xia,ZHANGXue-dong.

(AutobioDiagnosticsCo.,Ltd,Zhengzhou450016,China)

Abstract:ObjectiveTo assess the difference between magnetic particles chemiluminescence reagents and enzyme immunoassay reagent in detecting hepatitis E virus IgG(HEV-IgG) antibodies.MethodsA total of 935 serum samples of inpatients and outpatients provided by 153 hospitals from Jan.2010 to May 2012 were selected,samples met the detection criteria were detected by HEV-IgG enzyme immunoassay kit produced by manufacturer A and magnetic particles chemical luminescence detection kit produced by Antobio in parallel,samples not met the detection criteria were detected by HEV-IgG enzyme immunoassay kit produced by manufacturer C.ResultsThe concordance of positive rates between magnetic particles chemical luminescence detection kit produced by Antobio and HEV-IgG enzyme immunoassay kit produced by manufacturer A was 95.5%, coincidence of negative rates was 97.7%,and total coincidence rate was 97.2%,there was no statistically significant difference between the two kits(P>0.05).ConclusionMagnetic particles chemical luminescence detection kit produced by Antobio has similar performance as common HEV-IgG enzyme immunoassay kit.Therefore,it is suitable to be promoted in clinical application.

Key words:Hepatitis E virus; Magnetic particles chemiluminescence; Clinical assessment

doi：10.3969/j.issn.1006-2084.2015.03.063

中圖分類號：R373

文獻標識碼：A

文章編號：1006-2084(2015)03-0544-02

收稿日期：2013-10-23修回日期：2014-08-03編輯：相丹峰