HPLC法測定纈沙坦膠囊的溶出度

蔡 群，孔令洋，張翠平，劉 芳

（1.濟寧市第一人民醫院，山東濟寧272002；2.濟寧市食品藥品檢驗檢測中心，山東濟寧272000；3.棗莊礦業集團中心醫院，山東棗莊277800）

HPLC法測定纈沙坦膠囊的溶出度

蔡 群1，孔令洋2，張翠平3，劉 芳3

（1.濟寧市第一人民醫院，山東濟寧272002；2.濟寧市食品藥品檢驗檢測中心，山東濟寧272000；3.棗莊礦業集團中心醫院，山東棗莊277800）

目的建立高效液相色譜法測定纈沙坦膠囊的溶出度。方法采用Thermo Hypersil Gold C18色譜柱，以乙腈－水－冰醋酸（500∶500∶1）為流動相，檢測波長為250 nm；以磷酸鹽緩沖液為溶出介質，采用高效液相色譜法測定纈沙坦膠囊的溶出度。結果纈沙坦濃度在3.27～81.67μg·mL－1范圍內線性良好（r＝0．998 9，n＝5），回收率99.8%，RSD＝0.14%。結論所用方法專屬性強、結果準確、穩定性好，適于纈沙坦膠囊的測定。

溶出度；纈沙坦膠囊；高效液相色譜法

纈沙坦為非肽類口服有效的血管緊張肽受體拮抗藥，臨床用于治療高血壓，可有效降低輕、中度高血壓患者的血壓，且不良反應發生率低［1］。目前已廣泛應用于高血壓、充血性心力衰竭以及與高血壓相關的各種并發癥的治療［2，3］。原標準收載的溶出度測定方法為紫外法測定，其缺點是專一性不強，靈敏度和準確度不高。測定的結果明顯偏高，很可能是輔料及膠囊殼引起的干擾。而用高效液相色譜（HPLC）法可以很好地避免這種現象。采用HPLC法，而無須再進行膠囊殼的空白試驗［4］。

1 儀器和試劑

島津LC－20A高效液相色譜儀；SPD－20A型紫外檢測器；天津天大天發D－800LS型溶出度測定儀；Thermo Hypersil Gold C18色譜柱；UV2550島津紫外分光光度計；Sartorius BT25S電子天平；KQ－ 500VDE型雙拼數控超聲波清洗器（昆山市超聲設備公司）；Millipore Elix 10純水機；乙腈（色譜純），冰醋酸（分析純）；纈沙坦對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：100651－200902，含量：98.9%）；纈沙坦膠囊3批次（80 mg，湖南千金湘江藥業股份有限公司）。

2 方法

2.1 色譜條件 照《中國藥典》2010年版（二部）纈沙坦含量測定項下的色譜方法［4］：以乙腈－水－冰醋酸（500∶500∶1）為流動相，色譜柱為Thermo Hypersil Gold C18，流速：1 mL·min－1，柱溫：30℃，檢測波長為250 nm。

2.2 溶出方法［5］按照《中國藥典》2010年版（二部）附錄溶出度測定法［6］（藍法），以磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鉀6.80 g與氫氧化鈉0.90 g，加水溶解成1 000 mL，調節pH值至6.8）1 000 mL為溶出介質，轉速為100 rpm，溫度設定37℃，取樣品6片，依法操作，經30 min取樣。

2.3 線性關系考察 精密稱取纈沙坦對照品0.081 67 g，置100 mL容量瓶中，加溶出介質溶解并稀釋至刻度，搖勻，取續濾液5 mL，置50 mL容量瓶中，加溶出介質溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為儲備液。取2、5、10、20 mL置50 mL容量瓶中，加溶出介質稀釋至刻度，搖勻。于上述4份溶液和儲備液中分別取20μL進樣測定。以纈沙坦的峰面積為縱坐標，濃度為橫坐標，進行線性回歸，得回歸方程A＝148.721C－137.656，r＝0.998 9（n＝5）。結果表明，纈沙坦濃度在3.27～81.67μg·mL－1范圍內線性關系良好。

2.4 輔料干擾試驗 按樣品處方比例，取除纈沙坦外的其余原輔料，按供試品的制備工藝及供試品溶液的制備方法制備陰性對照品溶液，并進行測定。結果顯示在纈沙坦對照品峰附近未有峰出現，表明輔料對測定無干擾。

2.5 精密度試驗 取“2.3”項下儲備液，加溶出介質溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含16μg的對照品溶液。重復進樣5次，RSD＝0.22%。

2.6 穩定性試驗 取“2.5”項下的對照品溶液，分別在1、2、4、6、8 h進行測定，RSD＝0.6%，結果表明，纈沙坦溶液穩定性良好。

2.7 重復性試驗 取同一批樣品6份，加溶出介質溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含16μg的溶液，分別進樣測定，記錄色譜圖計算，結果RSD＝0.4%，表明該方法重復性良好。

2.8 回收率試驗 分別稱取相當于樣品標量的80%、100%、120%的纈沙坦對照品適量，按處方比例與相應輔料混合均勻，加溶出介質溶解并定量稀釋制成每1 mL中約含16μg的溶液，濾過，取續濾液；另取纈沙坦對照品適量，加溶出介質適量制成約16μg·mL－1的對照品溶液。外標法測定，計算回收率，見表1。試驗結果表明，本方法的回收率較好，平均回收率為99.8%（RSD＝0.14%）。

2.9 供試品溶出度測定 紫外分光光度法：取過濾后的溶出液2.00 mL，置50 mL容量瓶中，加溶出介質溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，在250 nm的波長處測定吸光度；另取纈沙坦對照品適量，加溶出介質定量稀釋成每1 mL中約含纈沙坦16μg的溶液，同法測定，計算每粒膠囊的溶出量。高效液相色譜法：供試品溶液制備方法同紫外分光度法，照含量測定法進行測定，色譜圖見圖1。

表1 回收率試驗測定結果

圖1 供試品溶液色譜圖

3 結果和討論

3.1 結果 溶出度測定方法比較見表2。

表2 溶出度測定方法比較

3.2 討論 原標準收載的溶出度測定方法簡便易行，缺點是專一性不強，靈敏度和準確度不高。如上表2所示，紫外法測定的結果較高，很可能是輔料及膠囊殼引起的干擾，考慮到用高效液相色譜法測得膠囊的含量為96.2%，說明用HPLC法更能真實地反映其溶出效果。而且由于膠囊殼的成分比例的不同，紫外吸收強度也各不相同，故紫外法測定時常有干擾。常取6粒空白膠囊殼，與樣品的處理方法進行紫外測定，以排除干擾（《中國藥典》2010年版）。存在工作量大，且由于干擾不一等問題，會給結果帶來誤差。而采用HPLC法，則無須再進行膠囊殼的空白試驗［7，8］。

［1］ 劉紅梅，劉艷，程彥文，等.國產和進口纈沙坦膠囊的人體生物利用度［J］.中國醫院藥學雜志，2001，21（12）：724－726.

［2］ 金小平，潘潔，王蓓.高效液相色譜法測定纈沙坦分散片的體外溶出度［J］.醫藥導報，2006，25（5）：473－474.

［3］ 劉金英，鐘桂香，林少琴，等.纈沙坦膠囊體外溶出度比較［J］.現代中西醫結合雜志，2009，18（9）：2334－2335.

［4］ 中國藥品生物制品檢定所.中國藥品檢驗標準操作規范（2010年版）［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：1137.

［5］ 姚靜，安寧，吳建敏，等.纈沙坦膠囊溶出度方法的考察［J］.中國藥品標準，2010，11（2）：138－139.

［6］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典2010年版（二部）［S］.北京：中國醫藥科技出版社，2010：1137，附錄85.

［7］ 孔令洋，孫巧巧，薛雯，HPLC法測定頭孢羥氨芐膠囊的溶出度［J］.藥學研究，2013，32（9）：515－516.

［8］ 蔡群，孔令洋，孫巧巧.HPLC法測定依諾沙星膠囊的溶出度［J］.藥學研究，2014，33（2）：96－97.

Determ ination of the dissolution of Valsartan Capsules by HPLC

CAIQun1，KONG Ling-yang2，ZHANG Cui-ping3，LIU Fang3
（1．Jining First People′s Hospital，Jining 272002，China；2．Jining Center for Food and Drug Control，Jining 272000，China；3．Zaozhuang Mining Group Center Hospital，Zaozhuang 277800，China）

ObjectiveTo establish a method for the determination of dissolution of Valsartan Capsules by HPLC.MethodsA Thermo Hypersil Gold C18Column was used with themobile phase of acetonitrile－water－acetic acid（500∶500∶1）.The determination wavelength was 250 nm.The dissolution of Valsartan Capsules was determined by HPLC with phosphate buffer solution as dissolutionmedium.ResultsThe linear range of valsartan was 3.27～81.67μg·mL－1（r＝0.998 9，n＝5）.The average recovery was 99.8%and the RSD was 0.14%.ConclusionThemethod was specific，accurate and stable，and can be used for the dissolution determination of Valsartan Capsules.

Dissolution；Valsartan Capsules；HPLC

R927.11

A

2095－5375（2015）08－0449－003

蔡群，女，研究方向：醫學檢驗，E－mail：283287176＠qq.com