999精品在线视频,手机成人午夜在线视频,久久不卡国产精品无码,中日无码在线观看,成人av手机在线观看,日韩精品亚洲一区中文字幕,亚洲av无码人妻,四虎国产在线观看 ?

水稻紋枯病生防菌株篩選及防病促生研究

2015-03-15 05:32:30施潔君張麗娜江蘇省安豐生物源農藥工程中心有限公司江蘇太倉5400江蘇省太倉市農業委員會江蘇太倉5400南京農業大學植物保護病理學系江蘇南京0095
安徽農業科學 2015年33期

何 胥,王 光,施潔君,張麗娜 (.江蘇省安豐生物源農藥工程中心有限公司,江蘇太倉 5400;.江蘇省太倉市農業委員會,江蘇太倉 5400;.南京農業大學植物保護病理學系,江蘇南京 0095)

?

水稻紋枯病生防菌株篩選及防病促生研究

何 胥1,王 光1,施潔君2,張麗娜3(1.江蘇省安豐生物源農藥工程中心有限公司,江蘇太倉 215400;2.江蘇省太倉市農業委員會,江蘇太倉 215400;3.南京農業大學植物保護病理學系,江蘇南京 210095)

摘要通過溫室和大田試驗研究31株生防菌對水稻紋枯病的防治效果和對水稻秧苗的促生效果。溫室試驗結果表明,人工接種紋枯病病原菌20 d后,31株生防菌株中有7株對水稻紋枯病的溫室防治效果在50%以上,其中KJ33的防治效果最好,防效達到61.22%;有9株生防菌株對水稻秧苗生物量的增加量超過20%。選取在溫室條件下防病和促生效果較好的2LN3、KJ33和1LN6生防菌進行大田試驗,結果表明3次統計調查結果中,2LN3在第30天防效超過常規藥劑,且超過50%。生防菌株2LN3對水稻紋枯病表現出一定的防病促生效果,具有廣闊的應用前景。

關鍵詞水稻紋枯病;生防菌株;防效;促生

Screening of Biocontrol Strains of Rice Sheath Blight and Study on Plant-growth Promotion

HE Xu1, WANG Guang1, SHI Jie-jun2et al(1. Jiangsu Anfeng Biosource pesticide Engineering Center Co. Ltd., Taicang, Jiangsu 215400; 2. Taicang Agricultural Committee, Taicang, Jiangsu 215400)

AbstractThrough greenhouse and field tests, the control effect of the biocontrol strains against rice sheath blight and growth promoting effect on rice seedling were studied. The greenhouse experiment results showed that after artificial inoculation sheath blight pathogen 20d, the control effect of 7 strains against rice sheath blight in greenhouseis more than 50%, among which KJ33 has control effect, the control effect reached 61.22%; 9 strains of biocontrol strains of rice seedling biomass increased more than 20%. Selected prevention under greenhouse conditions and promoting better effect of 3 strains of biocontrol strains of field experiment and are 2LN3, KJ33 and 1LN6. The results showed that the 30 d and 2LN3 in the three statistical results are more than the conventional agents, and the effect of 30 d is more than 50%. Biocontrol strain 2LN3 against rice sheath blight disease showed a certain growth promoting effect, has a broad application prospect.

Key wordsRice sheath blight; Biocontrol strains; Biocontrol efficiency; Plant-growth promotion

水稻紋枯病是由立枯絲核菌(Rhizoctoniasolani)引起的一種土傳病害,是水稻的三大病害之一,分布在世界各個稻區[1],一般可造成10%~30%的產量損失,發生嚴重時可造成產量損失達50%以上。近年來,隨著矮稈品種和雜交水稻的大面積推廣及栽培措施的變革,水稻紋枯病發生面積逐年擴大,給水稻的高產和穩產帶來了極大的障礙[2]。目前,水稻紋枯病的防治在抗病育種方面尚未突破,至今未發現免疫或高抗品種,在實際生產過程中,主要依靠選用耐病品種以及抗生素和化學藥劑來防治,如常用藥劑井岡霉素、丙環唑、烯唑醇、惡毒靈、愛苗、滿穗、稻立峰等,抗生素和化學藥劑的長期反復使用易產生抗藥性,導致用藥量的不斷增加、生產成本的不斷提高,在污染環境的同時也存在農藥殘留問題,給農產品的出口帶來障礙,給人畜的生命帶來了威脅[3-4]。由于水稻紋枯病病原菌對寄主的寄生專化性不強,利用微生物防治的方法既經濟有效又無毒副作用。因此,采用微生物菌劑取代抗生素及化學藥劑成為防治該病害研究的新方向,尋找水稻紋枯病拮抗微生物具有著重要意義[5]。為此,筆者從前期初步篩選的菌株中選取31個菌株,通過溫室試驗和大田試驗評價了其防治效果及促生作用,旨在為水稻紋枯病的生物防治和生防菌制劑開發奠定基礎。

1材料與方法

1.1材料

1.1.1供試菌。供試生防菌:31株生防菌,由江蘇省安豐生物源農藥工程中心有限公司篩選。供試病原菌:水稻紋枯病病原菌HNW-21,由南京農業大學植保學院植物病理學系提供。

1.1.2供試作物。水稻紋枯病感病品種“南粳46”。

1.1.3培養基。LB配方:氯化鈉10 g/L, 胰蛋白胨10 g/L, 酵母浸粉5 g/L,調節pH為7.2,若配固體,則再加入瓊脂粉15 g/L。PDA配方:馬鈴薯200 g,加水煮沸30 min,濾去薯塊,濾液加蔗糖20 g,瓊脂20 g,定容至1 000 ml,自然pH。

1.2方法

1.2.1生防菌劑、病原菌制備和植物材料培育。

1.2.1.1生防菌劑的制備。將供試菌株在LB平板上劃線,28 ℃生化培養箱中培養14~16 h,待長出單菌落后,挑取單菌落接入含有5 ml LB培養液的試管中,置于28 ℃、200 r/min的搖床中培養,制成種子液;以1%的接種量將種子液接種于裝有500 ml LB培養液的三角瓶中,置于28 ℃、200 r/min的搖床中培養48 h,待菌液濃度達到1×109cfu/ml時稀釋待用。

1.2.1.2水稻紋枯病病原菌的制備。將供試病原菌接種于PDA平板上,置于生化培養箱中培養72 h左右,待有成熟菌核后取出供接種用[6]。

1.2.1.3植物材料培育。將稻種用2%次氯酸鈉溶液對種子進行消毒15 min,清水沖洗3~4次后浸泡置于30 ℃恒溫箱中48 h后拿出,然后用清水沖洗后將吸足水的種子置于35~38 ℃的室內用紗布覆蓋進行高溫保濕催芽至破胸[7],破胸后置陰涼處攤晾煉芽4~8 h,待種子內濕外干不粘連即可進行播種育苗。溫室促生試驗采用直播方法,將種子播種于已裝有滅菌基質的營養缽中,每缽種5粒,置于28~30 ℃、16/8 h光周期、相對濕度70%以上的溫室中進行培育;溫室防效試驗采用育苗移栽方法,先將種子播種于裝有滅菌基質的育秧盤中,播后置于30~35 ℃、濕度為85%以上的室內進行暗化出苗,出苗后置于28~30 ℃、16/8 h光周期、相對濕度70%以上的溫室中進行培育,在秧齡15 d時移栽。將水稻幼苗移栽至已裝有滅菌基質的盆缽中,每缽3株,置于28 ℃、相對濕度90%以上、16/8 h光周期的溫室中進行培養。

1.2.2溫室防效和促生試驗。

1.2.2.1生防菌劑防治水稻紋枯病的溫室試驗。按照“1.2.1.3”方法培育水稻苗,待移栽定植后第3天進行灌根處理、30 d后進行葉面噴霧。灌根處理菌液濃度為1×108cfu/ml,每缽苗用量為25 ml,緩慢澆灌于水稻根部。噴霧處理菌液濃度為5×107cfu/ml,按照0.01%的終濃度加入表面活性劑吐溫20,均勻噴霧于水稻葉片。噴霧標準是:每片葉子上有霧狀液滴分布,以不掉下為準。對照(CK)采用清水處理。生防菌葉面噴霧處理15 d后進行紋枯病病原菌挑戰接種處理,在水稻每2張葉片的葉鞘處放置水稻紋枯病菌核,其上方覆蓋脫脂棉,并用封口膜捆綁固定,同時定期用滅菌水對植株以及整間溫室噴霧,以維持室內濕度。接種病原菌20 d后調查病害嚴重度并計算生防效果。水稻紋枯病分級標準:0級,無病癥;1級,基部葉片、葉鞘發病;2級,倒三葉以下各葉鞘或葉片發病;3級,倒二葉以下各葉鞘或葉片發病;4級,劍葉葉鞘或葉片發病[8-9]。

病害嚴重度=∑(各級病株數×級值)/(調查總株數×最高級值)×100%

防治效果=(對照組病害嚴重度-處理組病害嚴重度)/對照組病害嚴重度×100%

1.2.2.2生防菌劑對水稻苗溫室促生試驗。按照“1.2.1.3”方法培育水稻苗,7 d后進行灌根處理,灌根處理菌液濃度為1×108cfu/ml,每缽苗用量為25 ml,緩慢澆灌于水稻根部。對照采用清水處理。處理30 d后將稻苗小心拔出,用水槍沖凈泥土,測定其株高、莖基寬、根長、鮮重和干重,計算生物量增加。

生物量增加=(處理組植株干重-對照植株干重)/對照植株鮮重×100%

1.2.3生防菌劑防治水稻紋枯病的大田試驗。2012年6月在江蘇省太倉市璜涇現代農業園進行大田防效試驗。種植方式為機械栽插,種植密度為28.5萬穴/hm2。試驗設5個處理,3次重復,共15個小區,每小區面積為42 m2,采用隨機區組排列,四周及小區之間均設有田埂和保護行。在8月底進行第1次生防菌處理,之后每隔10 d噴施一次,整個水稻生育期共防治3次。生防菌劑處理噴施用量為30 L/hm2;常規對照為井岡霉素·臘芽桿菌,噴施量為900 g/hm2;空白對照為清水對照(CK)。每次用藥前一天進行病害嚴重度調查,每小區固定5點,每點取相連5穴。噴施方法為采用靜電噴霧器均勻粗噴至稻叢基部。生防菌劑噴施時按照0.01%的終濃度加入吐溫20。試驗全部采用標準的田間常規管理模式,并且不再使用其他殺菌劑。水稻紋枯病分級標準及病害嚴重度計算方法同“1.2.2.1”。

防治效果=[(對照組病害嚴重度-對照組基數病害嚴重度)-(處理組病害嚴重度-各處理基數病害嚴重度)]/(對照組病害嚴重度-對照組基數病害嚴重度)×100%[8-9]

1.2.4數據統計。所有數據采用Excel和DPS7.05版軟件進行方差分析,并用LSD法比較各處理間的差異顯著性。

2結果與分析

2.1生防菌株對水稻紋枯病的溫室防效溫室條件下,接種病原菌20 d 后,31株細菌中有7株對水稻紋枯病的防治效果在50%以上(表1),其中KJ33的防治效果最好,防效達到61.22%,2LN3的防治效果為61.01%,1LN6的防治效果為60.20%,1LH9、2YL22、3DL5和1LN4的防治效果在50%~60%。7個生防菌處理和對照相比,病害嚴重度均存在顯著性差異。

表1 31株潛在生防菌對水稻紋枯病的溫室防治效果 %

注:數值為平均值±標準誤;同列數據后不同字母表示不同處理間在0.05水平差異顯著。

2.2生防菌株對水稻苗的溫室促生作用溫室條件下,生防菌處理30 d后,多個處理的水稻苗在株高、莖基寬、根長、鮮重和干重等指標上與對照之間具有顯著性差異(表2)。其中有9個菌株對水稻秧苗生物量的增長超過20%,分別是2LN3、3DL5、1LH9、KJ33、1LN4、1LN6、1YL2、1DL17和1DL16。

2.3生防菌株對水稻紋枯病的大田防效挑選在溫室條件下防效和促生效果較好的3個菌株進行大田試驗,分別是2LN3、KJ33和1LN6。在生防菌劑初次噴霧后第10、20和30天,所有生防菌處理的病害嚴重度均低于清水對照(表3)。在第20天2LN3的防效達到46.33%;在第30天2LN3的防效達到50.02%。3次統計調查結果中,只有2LN3的防效超過50%,且在第30天防效超過常規藥劑。

表2 31株潛在生防菌對水稻苗的溫室促生效果

注:數值為平均值±標準誤;同列數據后不同字母表示不同處理間在0.05水平差異顯著。

表3 3株潛在生防菌對水稻紋枯病的大田防治效果 %

注:數值為平均值±標準誤;同列數據后不同字母表示不同處理間在0.05水平差異顯著。

3討論

水稻作為我國重要的糧食作物,其高產、穩產是當前種植面臨的重大挑戰之一。水稻紋枯病作為水稻的三大病害之一,給水稻產量造成了巨大影響。目前,水稻紋枯病的防治主要以抗生素和化學藥劑為主,其次是采用生物方法。生物防治方法主要有微生物類、植物提取液類、稻鴨共養模式等[2],在防治水稻紋枯病方面都取得了一定成果。該研究通過溫室試驗和大田試驗對水稻紋枯病生防菌株進行篩選,得到了對水稻具較好防病促生效果的菌株2LN3。

該研究發現溫室防治效果和大田防治效果不一致,例如:1LN6在溫室試驗中防效達60%以上,但在大田試驗中3次調查結果防效均低于20%。陳志誼等[5,10]認為生防菌在田間的防效受多種因素的制約,其中生物障礙可能是最主要的因子,認為在生態系統中,各種因素對病原菌的侵入有利,其拮抗菌就難以在植株上定植,導致防效較差。同時該研究也表明,拮抗菌的促生作用可能提高水稻自身對紋枯病的免疫能力和對外界的抗逆能力,從而在對紋枯病的防效上也起到一定的作用。

在后續試驗中應對不同年份、種植方式水稻進行大田試

驗,同時加強田間管理、規范田間農事操作,爭取得到更加科學的試驗結果,為生防菌劑在大田條件下推廣應用奠定基礎。

參考文獻

[1] 陳敏,康曉慧.芽孢桿菌Drt-11防治水稻紋枯病研究[J].西南農業學報,2006,19(1):53-57.

[2] 劉薇,楊超,鄒劍鋒,等.水稻紋枯病生物防治研究進展[J].廣西農業科學,2009,40(5):512-516.

[3] 任小平,謝關林,趙麗涵.水稻紋枯病拮抗細菌的篩選與利用[J].植物保護學報,2005,32(4):337-342.

[4] 黃河,鄢凱舟,林元山,等.水稻紋枯病拮抗細菌的篩選·鑒定及其活性成分的發酵制備[J].安徽農業科學,2014,42(25):8584-8586.

[5] 陳志誼,許志剛,高泰東,等.水稻紋枯病拮抗細菌的評價與利用[J].中國水稻科學,2000,14(2):95-102.

[6] 孔丹丹,闕亞偉,閆霞,等.水稻紋枯病菌(Rhizoctoniasolani)原生質體制備與再生技術及優化[J].浙江大學學報,2013,39(3):274-280.

[7] 于林惠.機插水稻育秧技術[J].農機科技推廣,2006(2):37-41.

[8] 蔡超,闞李斌,姜海平,等.不同殺菌劑防治水稻紋枯病田間藥效試驗[J].上海農業科技,2011(2):124.

[9] 陳思宏,馬學文,倪運東,等.不同藥劑防治水稻紋枯病田間藥效試驗[J].現代農業科技,2013(3):133-134.

[10] MEW T W,COLLYN B,PAMPLONA P,et al.Applying rice seed-associated antagonistic bacteria to manage rice sheath blight in developing countries[J].Plant disease,2004,88(5):557-564.

收稿日期2015-10-28

作者簡介何胥(1987-),男,江蘇宜興人,助理農藝師,從事作物栽培研究。

基金項目江蘇省太倉市科技支撐計劃項目(TN1201)。

中圖分類號S 435.111.4+2

文獻標識碼A

文章編號0517-6611(2015)33-218-03

主站蜘蛛池模板: 四虎成人精品| 91视频首页| 亚洲AV永久无码精品古装片| 国产视频a| 久草热视频在线| 99精品一区二区免费视频| 国产午夜在线观看视频| 亚洲中文字幕无码mv| 91在线视频福利| 国产福利免费视频| 国内精品久久久久鸭| 亚洲v日韩v欧美在线观看| 国产成人凹凸视频在线| 青青青国产视频| 久久夜夜视频| 99re66精品视频在线观看| 亚洲欧洲日韩久久狠狠爱| 欧美性精品| 国产女主播一区| www.国产福利| 久久伊伊香蕉综合精品| 日韩精品无码免费专网站| 国产另类视频| 99在线视频精品| 五月天香蕉视频国产亚| 永久免费精品视频| 免费人成黄页在线观看国产| 首页亚洲国产丝袜长腿综合| 日韩午夜福利在线观看| 老司国产精品视频91| 亚洲一级色| 日韩色图区| аⅴ资源中文在线天堂| 国产成人久视频免费| 欧美无遮挡国产欧美另类| 欧美一级高清片久久99| 国产色婷婷| 国产亚洲精品自在线| 国产一区二区三区精品久久呦| 五月婷婷伊人网| 亚洲成年人网| 欧美一区精品| 真人免费一级毛片一区二区| 国产精品熟女亚洲AV麻豆| 青青草原国产av福利网站| 无码精品国产dvd在线观看9久| 亚洲无卡视频| 亚洲国产精品国自产拍A| 国产精品自在线天天看片| 91成人试看福利体验区| AV在线天堂进入| 国产又黄又硬又粗| 成人午夜精品一级毛片| a级毛片免费网站| 日本午夜三级| 日韩成人在线一区二区| 欧美日韩国产成人高清视频| 区国产精品搜索视频| 国产成年无码AⅤ片在线| 日韩精品无码免费专网站| 亚洲人在线| 国产迷奸在线看| 韩日午夜在线资源一区二区| 亚洲免费人成影院| 亚洲人成网站在线播放2019| 日本午夜视频在线观看| 国产在线观看91精品| 久久www视频| 国产在线小视频| jizz在线观看| 国产精品播放| 久久黄色免费电影| 色亚洲激情综合精品无码视频 | 婷婷六月天激情| 高潮毛片免费观看| 国产乱子伦精品视频| 伊人久久婷婷| 91色在线观看| 欧美第九页| 无码专区国产精品一区| 无码中文字幕加勒比高清| 午夜丁香婷婷|