327株產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌的耐藥性分析*

游樹林，汪文明，劉利航，張體永，楊 夕(重慶市南川區人民醫院檢驗科 408400)

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·臨床研究·

327株產超廣譜β-內酰胺酶大腸埃希菌的耐藥性分析*

游樹林，汪文明，劉利航，張體永，楊 夕△(重慶市南川區人民醫院檢驗科 408400)

目的 探討產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)大腸埃希菌的耐藥性。方法 采用全自動微生物鑒定藥敏分析儀對2013年1月至2014年7月臨床送檢的標本進行分離鑒定及藥敏分析，耐藥性診斷依據CLSI(2013年)標準進行判斷。結果 609株大腸埃希菌檢出產ESBLs菌株327株，檢出率53.69%。產ESBLs大腸埃希菌對氨芐西啉、頭孢唑林耐藥率達100.0%、頭孢曲松為98.3%；對左氧氟沙星、環丙沙星、復方新諾明、氨曲南及氨芐西林/舒巴坦耐藥率較高，達62.4%～70.6%；對頭孢替坦、呋喃妥因及阿米卡星的耐藥率較低(0.9%～4.6%)；對哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南及亞胺培南的耐藥率為0。產ESBLs大腸埃希菌對大多數抗菌藥物的耐藥率明顯高于ESBLs陰性大腸埃希菌，差異有統計學意義(P<0.05)。結論 產ESBLs大腸埃希菌的耐藥性分析，可指導臨床合理應用抗菌藥物。

ESBLs； 大腸埃希菌； 耐藥性； 抗菌藥物

大腸埃希菌(E.coli)為常見的條件致病菌，是醫院感染的重要病原菌，也是革蘭陰性桿菌中產超廣譜β-內酰胺酶(ESBLs)的代表菌種[1]。隨著抗菌藥物的廣泛應用，尤其是β-內酰胺酶類抗菌藥物應用于臨床，產ESBLs株不斷增加。ESBLs大腸埃希菌往往同時對β-內酰胺類、β-內酰胺酶復方抑制劑、氨基糖苷類和喹諾酮類等藥物耐藥，呈現多重耐藥性，其患病率和病死率較高，有效治療的抗菌藥物較少，給臨床治療帶來困難[2-4]。本研究對產ESBLs的耐藥性進行分析，以指導臨床合理應用抗菌藥物，防止耐藥菌株產生，控制產ESBLs細菌的傳播和流行，報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 該院2013年1月至2014年7月門診和住院患者送檢的合格標本中分離出大腸埃希菌609株(排除同一患者相同部位重復分離菌株)，其中男328例，女281例，年齡0～87歲。

1.2 儀器與試劑 法國生物梅里埃VITEK2 Compact全自動微生物鑒定藥敏分析儀及配套試劑。

1.3 方法 嚴格按《全國臨床檢驗操作規程》[5]進行標本的質量控制、接種以及菌株的分離培養，采用法國生物梅里埃公司的VITEK2 Compact全自動微生物鑒定藥敏分析儀進行菌株鑒定和藥敏分析，耐藥性診斷和檢測結果均依據CLSI(2013年)標準進行判斷。質控菌株：大腸埃希菌(ATCC 25922)由重慶市臨床檢驗中心提供。

1.4 ESBLs的檢測 頭孢吡肟的最低抑菌濃度(MIC)值大于或等于32 μg/mL、頭孢他啶或頭孢噻肟的MIC值大于或等于4 μg/mL的菌株，進一步行頭孢吡肟/克拉維酸、頭孢他啶/克拉維酸及頭孢噻肟/克拉維酸的MIC值檢測。如果3種藥物加上克拉維酸后的MIC值小于其本身MIC值的3倍，判為ESBLs陽性。

1.5 統計學處理 采用SPSS 17.0軟件進行統計學分析，耐藥率比較使用χ2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 產ESBLs菌株的檢出率 609株E.coli中檢出327株產ESBLs菌株，檢出率53.69%。其中尿液標本檢出產ESBLs 175株，占53.52%，其次是痰液、血液標本，分別為50、35株(15.29%、10.70%)。見表1。

表1 327株產ESBLs菌株標本類型構成情況

2.2 327株產ESBLs大腸埃希菌分布范圍 呼吸內科、泌尿外科檢出率較高，陽性率分別為69.23%、62.75%。見表2。

表2 327株產ESBLs菌株的科室分布及陽性率

續表2 327株產ESBLs菌株的科室分布及陽性率

2.3 產ESBLs大腸埃希菌的耐藥性分析 產ESBLs大腸埃希菌對氨芐西林、頭孢唑林耐藥率達100.0%，頭孢曲松達98.3%；對左氧氟沙星、環丙沙星、復方新諾明、氨曲南及氨芐西林/舒巴坦耐藥率也較高，在62.4%～70.6%；對頭孢替坦、呋喃妥因及阿米卡星的耐藥率較低(0.9%～4.6%)；對哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南及亞胺培南的耐藥率為0。ESBLs陰性菌除氨芐西林、復方新諾明耐藥率(66.4%、47.1%)較高外，其余耐藥率均小于36.0%。產ESBLs大腸埃希菌對大多數抗菌藥物的耐藥率明顯高于ESBLs陰性大腸埃希菌，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 ESBLs陽性與ESBLs陰性大腸埃希菌的耐藥率[n(%)]

注：“-”為無數據。

3 討 論

產ESBLs大腸埃希菌是引起醫院感染的常見致病菌之一。產ESBLs是絲氨酸蛋白酶的衍生物，存在于細菌中，是細菌染色體外的蛋白質，能水解抗菌藥物中的β-內酰胺環而使抗菌藥物失活，尤其是廣譜的頭孢菌素、青霉素及單環菌素等。其在細菌之間進行傳播，易造成院內交叉感染，從而致使產ESBLs細菌在醫院內感染的爆發流行。本研究結果表明，609株E.coli中檢出327株產ESBLs菌株，陽性率53.69%，低于2011年度西南地區的71.2%[6]，這與本組采集樣本逐漸規范，嚴格控制院內感染有關。同時又高于文獻報道的35.40%、45.90%、47.90%[7-9]，說明該院產ESBLs菌株感染比較嚴重，應引起臨床高度重視。327株產ESBLs菌株中，尿液、痰液標本檢出率較高，分別為53.52%、15.29%，這與該院尿液、痰液標本送檢密切相關，提示泌尿系統和呼吸系統為大腸埃希菌感染的高發部位，應加強感染控制。本研究顯示ESBLs在呼吸內科、泌尿外科檢出率較高，分別為69.23%、62.75%，這與呼吸內科、泌尿外科患者大多為老年患者，且伴慢性炎性、住院時間長和反復使用抗菌藥物以及插管導尿侵入性操作等治療有關，使得免疫力低下的患者更易感染大腸埃希菌。

ESBLs基因型有TEM、SHV、OXA及CTX-M型等，大多由廣譜酶TEM-1/TEM-2及SHV-1的活性區經過1～4個關鍵氨基酸突變衍生而來，可水解青霉素類和第1、2代頭孢菌素。隨著第3代頭孢菌素的臨床應用，TEM-1和SHV-1酶加快了突變的速度，形成各種ESBLs，介導細菌對青霉素類和第1～3代頭孢菌素及單環酰胺類耐藥，CTX-M型酶能水解頭孢噻肟、頭孢曲松等，不同類型的ESBLs對第3代頭孢菌素有不同的活性[10-11]。本研究結果顯示產ESBLs大腸埃希菌對頭孢曲松、頭孢唑林耐藥率高達98.0%以上，頭孢他啶達37.0%，第4代頭孢吡肟也出現一定程度耐藥(27.6%)。本組結果表明，臨床常用的頭孢菌素類抗菌藥物因ESBLs而產生了較為普遍的耐藥性，其應根據藥敏試驗結果及時調整藥物，并注意療程、劑量、給藥方式，不隨意使用廣譜抗菌藥物[12]。

ESBLs由質粒介導，攜帶編碼ESBLs株的質粒的菌株往往同時攜帶AmpC酶、氨基糖苷類、喹諾酮類抗菌藥物等耐藥基因，呈現多重耐藥性[13-14]。本研究結果顯示，產ESBLs大腸埃希菌對氨芐西林、頭孢唑林、頭孢曲松的耐藥率高達98.0%以上；對左氧氟沙星、環丙沙星、復方新諾明、氨曲南及氨芐西林/舒巴坦耐藥率也較高(62.4%～70.6%)，說明產ESBLs菌株存在廣泛、多重耐藥現象。同時產ESBLs對頭孢替坦、呋喃妥因及阿米卡星的耐藥率較低(0.9%～4.6%)；對哌拉西林/他唑巴坦、厄他培南及亞胺培南的耐藥率為0。故該菌感染時，臨床用藥可考慮首選，但應根據藥敏試驗的結果用藥。ESBLs陰性菌除氨芐西林、復方新諾明耐藥率(66.4%、47.1%)較高外，其余均小于36.0%。本研究結果顯示產ESBLs大腸埃希菌對大多數抗菌藥物的耐藥率明顯高于ESBLs陰性大腸埃希菌，差異有統計學意義(P<0.05)。

綜上所述，產ESBLs大腸埃希菌對多種抗菌藥物耐藥。臨床應重視細菌耐藥性的監測，嚴格按照藥敏試驗結果篩選抗菌藥物，做到謹慎和合理使用抗菌藥物，避免細菌產生耐藥性。同時，應加強醫護人員手衛生規范，特別注意洗手，避免工作人員傳播引起患者交叉感染；其次，應增強消毒隔離意識，嚴格執行各種消毒隔離措施，避免大腸埃希菌耐藥菌株的傳播及暴發。

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重慶市衛計委科研項目(2013-2-240)。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.11.038

A

1672-9455(2015)11-1589-03

2014-12-22

2015-02-20)

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