無癥狀高尿酸血癥對大鼠血壓及尿蛋白β2－微球的影響*

王愛玲， 于海榮， 孫 閣， 李葵花＊＊

(1.河北省承德市中心醫(yī)院， 河北 承德 067000 2.承德醫(yī)學(xué)院， 河北 承德 067000)

隨著人民生活水平的提高和飲食結(jié)構(gòu)的改善，特別是富含蛋白質(zhì)和嘌呤食物攝入的增加，高尿酸血癥(Hyperuricemia，HUA)的發(fā)病率逐年上升，日益受到研究者的關(guān)注。長期以來，無癥狀高尿酸血癥病人無不適感，認(rèn)為高尿酸血癥對人體沒有傷害;迄今為止，在臨床指南中它都不是降尿酸治療的指征。有證據(jù)表明高尿酸血癥與高血壓及腎臟病變密切相關(guān)［1，4］，但無癥狀高尿酸血癥是否引起高血壓及腎臟病變少見報(bào)道。本研究觀察無癥狀高尿酸血癥對大鼠的血壓及腎臟的影響，為臨床無癥狀高尿酸血癥提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料

1.1 主要儀器與試劑:BP－6:無創(chuàng)傷血壓測量系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司);BL－420生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)(成都泰盟科技有限公司);全自動(dòng)生化分析儀(日立7180);FT－630G放免儀(北京核儀器廠)。氧嗪酸鉀(上海金穗生物科技有限公司，批號JS14824);羧甲基纖維素鈉(北京冰達(dá)生物有限公司);聚丙烯吡咯烷酮(北京化學(xué)試劑公司);尿酸試劑盒(北京北化康泰臨床試劑有限公司);尿β2－MG放射免疫分析藥盒(北京原子高科股份有限公司)。

1.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:健康雄性SD大鼠(20只)，體重(200±10)g(購于北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心)，分籠市售顆粒飼料飼養(yǎng)，自由飲水。

2 方法

2.1 高尿酸血癥模型的建立:動(dòng)物隨機(jī)分成兩組，每組10 只，高尿酸血癥組以250mg·kg－1·d－1氧嗪酸鉀腹腔注射造模［1，2］，對照組腹腔注射相同劑量0.8%羧甲基纖維素鈉乳劑，連續(xù)給藥8周。在大鼠在模型建立的第0、2、4、6、8周末，腹腔注射2h后經(jīng)內(nèi)眥采集不抗凝血0.5mL，自然凝血后提取血清，采用尿酸酶法測量血尿酸水平。

2.2 大鼠動(dòng)脈血壓測量:給藥后第0、2、4、6、8 周末采用BP－6無創(chuàng)血壓測量系統(tǒng)檢測大鼠尾動(dòng)脈收縮壓，比較兩組間差別。

2.3 大鼠給藥6周后24h尿ALB和 β2－MG含量測定:給藥8周后，將每只大鼠分別置于代謝籠中禁食不禁水，收集24h尿液，用全自動(dòng)生化分析儀進(jìn)行尿蛋白(albumin，ALB)定量，放射免疫法測定尿β2微球蛋白(β2－microglobulin，β2－MG)。

3 結(jié) 果

3.1 血尿酸水平的變化:對照組尿酸水平在實(shí)驗(yàn)期間雖有小的波動(dòng)，但整體保持在一個(gè)比較穩(wěn)定的水平。與對照組比較，高尿酸血癥組大鼠從給藥的第二周開始尿酸水平顯著升高(P＜0.01)，隨給藥的延長，血清尿酸水平維持在較高的水平上，但增加變化不明顯。在造模給藥的期間中血尿酸水平比較穩(wěn)定地保持在正常水平的2～3左右，見表1。

表1 血清尿酸隨時(shí)間的變化(±s，n=10)

表1 血清尿酸隨時(shí)間的變化(±s，n=10)

與對照組比*P＜0.01

組別血清尿酸(μmoL/L)0周 2周 4周 6周 8周對照組 61.46±12.96 59.58±21.67 54.13±11.21 53.51±9.77 57.15±15.08高尿酸血癥組 62.24±13.31 116.75±38.97* 131.75±41.29* 117.39±31.31* 118.20±23.17*

3.2 血壓變化:正常對照組大鼠的尾動(dòng)脈收縮壓在0～8周時(shí)無明顯變化，高尿酸血癥組大鼠血液隨給藥時(shí)間的延長逐漸升高，在給藥第6周期血壓升高有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束的第8周血壓非常顯著地升高(P＜0.01)。結(jié)果見表2。

表2 大鼠尾動(dòng)脈收縮壓隨時(shí)間的變化(±s，n=10)

表2 大鼠尾動(dòng)脈收縮壓隨時(shí)間的變化(±s，n=10)

與對照組比*P＜0.05，＊＊P＜0.01

組別收縮壓(mmHg)0周 2周 4周 6周 8周對照組 116.3±6.9 117.0±6.4 115.4±8.8 117.1±5.5 116.0±7.1高尿酸血癥組 115.2±6.3 119.9±6.7 124.5±9.8 138.5±11.4* 142.7±13.8＊＊

3.3 給藥8周后24hALB及尿β2－MG變化:與對照相比，高尿酸血癥組給藥8周后大鼠的ALB和β2－MG均顯著升高(P＜0.01)，結(jié)果見表3。

表3 ALB和 β2－MG的變化(±s，n=10)

表3 ALB和 β2－MG的變化(±s，n=10)

與對照組比*P＜0.01

組別 ALB(g/L) β2－MG(mg/L)對照組 0.089±0.034 0.103±0.067高尿酸血癥組 0.357±0.092* 0.307±0.151*

4 討 論

尿酸是嘌呤分解代謝的終產(chǎn)物，在一系列酶的參與下經(jīng)過復(fù)雜的過程產(chǎn)生。體內(nèi)尿酸異常是人體疾病的反映，通常指體內(nèi)血尿酸值增高，稱高尿酸血癥。一般認(rèn)為采用尿酸酶法測定血清中尿酸值，男性＞416μmoL/L(7mg/dL)，女性＞357μmoL/L(6mg/dL)，具有診斷價(jià)值，并把無痛風(fēng)癥狀發(fā)作的高尿酸血癥稱為無癥狀高尿酸血癥［3］。本實(shí)驗(yàn)中對大鼠腹腔注射250mg·kg－1·d－1的氧嗪酸鉀，抑制了尿酸酶，減少了尿酸在大鼠體內(nèi)的分解，尿酸水平逐漸上升，在第4周時(shí)達(dá)到最高水平，之后大鼠適應(yīng)性自保護(hù)，體內(nèi)尿酸酶分解尿酸的能力增強(qiáng)，血尿酸水平有所下降但仍保持在正常水平的2～3倍，關(guān)節(jié)及腎內(nèi)無尿酸鹽結(jié)晶，為無癥狀高尿酸血癥的尿酸水平［4］。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，當(dāng)大鼠處于高血尿酸水平下，大鼠的血壓也隨之升高。高尿酸血癥所致的高血壓與尿酸鹽的結(jié)晶無關(guān)，其機(jī)制可能為尿酸誘導(dǎo)的腎素－血管緊張素－醛固酮系統(tǒng)的激活［4］。醛固酮增多會(huì)引起腎遠(yuǎn)曲小管和集合管重吸收鈉、水增多，血容量增加;血管緊張素分泌的增多，收縮血管導(dǎo)致血管張力及外周阻力升高，持續(xù)增高引起血管硬化，形成高血壓。腎臟既是血壓的重要調(diào)節(jié)器官，也是高血壓損傷的靶器官之一。ALB和β2－MG含量的增高是反應(yīng)高血壓早期腎損害的重要指標(biāo)。ALB是反映腎小球功能的主要指標(biāo)，正常情況下腎小球?yàn)V過膜存在電荷選擇性屏障，絕大部分ALB不能通過濾過膜，當(dāng)尿ALB含量升高時(shí)，就標(biāo)志著腎小球?yàn)V過膜電荷選擇性屏障損傷。β2－MG是低分子蛋白，主要有人體淋巴細(xì)胞產(chǎn)生，由腎小球自由濾過，絕大部分在近端小管被重吸收，故尿中含量極微，尿β2－MG是測定腎小球?yàn)V過率和近端腎小管重吸收功能的敏感指標(biāo)。模型組在給藥8周后尿ALB、β2－MG明顯升高，說明腎小球?yàn)V過和腎小管重吸收功能已有損傷。因此無癥狀高尿酸血癥應(yīng)引起臨床重視，但其所致的高血壓和腎臟損傷是尿酸的直接作用還是間接相互作用，有待于進(jìn)一步研究。

［1］ Yamada H，Kotaki H，F(xiàn)uritsu H，et al.Mechanism of the uricosuric action of the anti－inflammatory drug E3040 used to treat inflammatory bowel disease I:study using a rat model of hyperuricemia［J］.Biopharm Drug Dispos，1999，20:77～83.

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［3］ 無癥狀高尿酸血癥合并心血管疾病診治建議中國專家共識(shí)［J］.中國全科醫(yī)學(xué)，2010，13(11):1145 ～1149.

［4］ Mazzali M，Hughes J，Kim YG，et al.Elevated uric acid increases blood pressure in the rat by a novel crystal－independent mechanism［J］.Hypertension，2001，38(5):1101 ～1106.