PSCA基因rs2294008多態(tài)性與胃癌的關(guān)系

鞠亞菲，刁玉荃，宋明全，姜相君

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬青島市市立醫(yī)院 山東 青島 266021 1 消化內(nèi)二科； 2 急診科)

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·腫瘤專題·

PSCA基因rs2294008多態(tài)性與胃癌的關(guān)系

鞠亞菲1，刁玉荃2，宋明全1，姜相君1

(青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬青島市市立醫(yī)院 山東 青島 266021 1 消化內(nèi)二科； 2 急診科)

目的 了解前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)基因rs2294008位點多態(tài)性與胃癌的關(guān)系。方法 收集196例漢族胃癌病人與246例無胃部疾病體檢者的外周血樣本，提取基因組DNA，采用DNA直接測序法進(jìn)行PSCA基因rs2294008位點分型。結(jié)果 胃癌組PSCA基因rs2294008位點3種基因型CC、CT、TT頻率分別為43.40%、47.40%和9.20%，對照組分別為53.70%、39.00%和7.30%。與CC型比較，攜帶CT和TT型基因型者胃癌發(fā)生的危險性增加，OR值分別為1.50(95%CI1.01～2.23)和1.55(95%CI0.77～3.15)。結(jié)論 漢族人群PSCA基因rs2294008位點為CT和TT基因型者胃癌發(fā)病風(fēng)險增加。

胃腫瘤；PSCA基因；多態(tài)性,單核苷酸

近年來，胃癌的發(fā)病率逐漸上升，其發(fā)病具有明顯的地域特征，東亞地區(qū)尤其是中國和日本的發(fā)病率一直較高，其中中國胃癌病人約占全球發(fā)病總數(shù)的42%[1]，山東地區(qū)為高發(fā)區(qū)[2]。我國胃癌的發(fā)病年齡還呈現(xiàn)年輕化趨勢，以往調(diào)查顯示發(fā)病以40～60歲年齡組居多，現(xiàn)在則以35～55歲年齡組為多，甚至19～35歲的低年齡組發(fā)病率也有明顯增加的趨勢[3]。單核苷酸多態(tài)性(SNP)是指在基因水平上由單個核苷酸的變異所引起的DNA序列多態(tài)性。前列腺干細(xì)胞抗原(PSCA)基因已被證實與胃癌及前列腺癌的發(fā)生發(fā)展有密切的關(guān)系，但對其基因多態(tài)性的研究還較少。本研究旨在了解PSCA基因rs2294008位點的多態(tài)性與骨癌的關(guān)系。

1 資料和方法

1.1一般資料

2012年3月—2013年5月，選擇青島市市立醫(yī)院住院的胃癌病人196例，男115例，女81例；年齡34.3～69.5歲，平均(57.6±12.3)歲。所有胃癌病人均無血緣關(guān)系，均為漢族人群，經(jīng)胃鏡或手術(shù)后病理組織學(xué)檢查證實為胃癌，且均未經(jīng)放化療。另從該院體檢中心收集健康體檢者246例作為對照組，男151例，女95例；年齡31.8～68.2歲，平均(56.4±12.1)歲；均無胃部疾病，其家族中無腫瘤病史者。兩組性別構(gòu)成及年齡差異無顯著性。所有研究對象均知情并同意。

1.2PSCA基因檢測方法

1.2.1基因組DNA提取 采集受檢者空腹靜脈血3 mL，采用人血及組織基因組DNA提取試劑盒(離心柱型，北京天根生物科技公司)提取血液基因組DNA，采用紫外線分光光度計測定DNA濃度后，置于-20 ℃冰箱內(nèi)保存。

1.2.2PCR反應(yīng) 由Invitrogen生物科技公司設(shè)計rs2294008位點的PCR引物。引物序列F:5′-A-AGTCACCTCCAGAGGCCCTCTC-3′,R:5′-CAA-GCCTGCCATCATCAACAG-3′,長度為182 bp。PCR反應(yīng)體系為30 μL， 其中含DNA模板100 μg/L，10×PCR緩沖液2.5 μL,50 mmol/L的MgCl20.8 μL，10 mmol/L的dNTP混合液0.5 μL，5 μmol/L正向、反向引物各1 μL，Platinum?Taq DNA聚合酶0.2 μL，加滅菌蒸餾水至30 μL。反應(yīng)在ABi9700 PCR儀中進(jìn)行，條件為：94 ℃預(yù)變性5 min,94 ℃變性30 s，58 ℃退火30 s，72 ℃延伸30 s，共35個循環(huán)，72 ℃后延伸5 min。取PCR產(chǎn)物2 μL進(jìn)行瓊脂糖凝膠電泳，以鑒定擴增產(chǎn)物是否合格。

1.2.3DNA測序分析基因型 應(yīng)用DNA測序儀(型號為ABI PRISMTM 3700)進(jìn)行測序。

1.3統(tǒng)計學(xué)處理

應(yīng)用SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，首先對樣本進(jìn)行Hardy-Weinberg遺傳平衡檢驗，統(tǒng)計攜帶CC、CT及TT基因型個體的人數(shù)，計算OR及95%CI。以P<0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

PSCA基因rs2294008位點基因測序結(jié)果見圖1～3。胃癌組病人PSCA基因rs2294008位點3種基因型CC、CT、TT頻率分別為43.40%、47.40%和9.20%，對照組分別為53.70%、39.00%和7.30%。與CC型比較，攜帶CT和TT型基因型者胃癌發(fā)生的危險性增加，OR值分別為1.50(95%CI1.01～2.23)和1.55(95%CI0.77～3.15)。

3 討 論

REITE等[4]在建造人-鼠前列腺癌模型時發(fā)現(xiàn)了PSCA基因，這是一個與前列腺癌相關(guān)的腫瘤抗原，位于染色體8q24．2位置上，編碼含有123個氨基酸的蛋白質(zhì)分子，其羧基末端為糖基磷脂酰肌醇(GPI)錨定序列[5]。目前對于PSCA基因的研究多集中在前列腺癌方面，并取得了相當(dāng)大的進(jìn)展，但對于PSCA基因rs2294008位點多態(tài)性與胃癌之間關(guān)系的研究還較少。日本學(xué)者研究結(jié)果顯示，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染PSCA基因cDNA的胃癌細(xì)胞株HSC57的菌落形成明顯少于不表達(dá)PSCA的細(xì)胞株[6]。在正常胃黏膜中PSCA mRNA呈高表達(dá)，主要表達(dá)于胃腺體峽部，而胃癌組織中則檢測不到PSCA mRNA的表達(dá)[7]。提示PSCA可能具有抑制胃癌細(xì)胞增殖的作用。SAEKI等[8]的研究結(jié)果則顯示，PSCA基因rs2294008與韓國人的彌漫型胃癌顯著相關(guān)，與腸型胃癌的相關(guān)性較弱。PSCA表達(dá)于胃上皮細(xì)胞的分化過程中，具有抑制胃癌細(xì)胞增殖的作用，但在胃癌細(xì)胞中表達(dá)沉默。此外，陳方根等[5]對廣東地區(qū)漢族人群研究結(jié)果顯示，PSCA基因rs2294008 T/C多態(tài)性與胃癌的發(fā)生有關(guān)，T等位基因可增加腸型、低分化、非賁門胃癌的發(fā)病風(fēng)險。LI等[9]對湖南人群的調(diào)查也得出了同樣的結(jié)論。另外，趙久達(dá)等[10]對青海地區(qū)藏族人群的調(diào)查結(jié)果顯示，PSCA基因的rs2294008位點與胃癌發(fā)病相關(guān)，CT和TT基因型能增加藏族人群的胃癌易感性。

圖1 CC基因型

圖2 CT基因型

圖3 TT基因型

本文研究分析了PSCA基因rs2294008位點多態(tài)性與胃癌發(fā)病的關(guān)系，研究結(jié)果顯示，PSCA基因rs2294008位點CT和TT基因型顯著增加胃癌發(fā)病風(fēng)險。今后尚需更大樣本的多中心研究驗證上述結(jié)果。

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(本文編輯 黃建鄉(xiāng))

RELATIONSHIP BETWEEN RS2294008 POLYMORPHISM OF PSCA GENE AND GASTRIC CANCER

JUYafei,DIAOYuquan,SONGMingquan,JIANGXiangjun

(Qingdao University Medical College, Qingdao 266021, China)

ObjectiveTo investigate the relationship between rs2294008 polymorphism of PSCA gene and gastric cancer.MethodsSamples of peripheral blood were collected from 196 Han people with gastric cancer and 246 without gastric diseases, the genome DNA was extracted and rs2294008 genotypes were determined by DNA direct sequencing.ResultsIn gastric cancer group, the frequencies of CC, CT and TT in rs2294008 were 43.40%,47.40% and 9.20%, respectively, and that in the healthy people were 53.70%,39.00% and 7.30%. Compared with CC genotype, the risk of getting gastric cancer in those carrying CT and TT genotypes increased, theORwas 1.50, 95%CI1.01-2.23 and 1.55, 95%CI0.77-3.15, respectively.ConclusionIn Han people with PSCA gene rs2294008 locus of CT and TT genotypes are at increased risk of getting gastric cancer.

stomach neoplasms; PSCA gene; polymorphism, single nucleotide

2014-02-29;

2014-12-10

青島市公共領(lǐng)域科技支撐計劃(2012-1-3-1-(10)-nsh)

鞠亞菲(1987-)，女，碩士研究生。

姜相君(1964-)，女，博士，主任醫(yī)師，碩士生導(dǎo)師。

R735.2

A

1008-0341(2015)02-0127-03