高效液相色譜法測定復方水楊酸麝香草酚搽劑中樟腦和麝香草酚含量

王靜

（河南省濮陽市食品藥品檢驗所，河南 濮陽 457000）

高效液相色譜法測定復方水楊酸麝香草酚搽劑中樟腦和麝香草酚含量

王靜

（河南省濮陽市食品藥品檢驗所，河南 濮陽 457000）

目的 建立測定復方水楊酸麝香草酚搽劑中樟腦和麝香草酚含量的高效液相色譜法。方法 色譜柱為Thermo BDS C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇－水（60∶40）為流動相，流速為1.0 mL／min，檢測波長為276 nm。結果 樟腦、麝香草酚質量濃度分別在2.012～8.048 g／L和0.045 76～0.183 0 g／L范圍內與峰面積積分值線性關系良好，平均回收率分別為99.85%（RSD＝0.71%）和98.64%（RSD＝2.06%）。結論 該方法簡便可行，重復性好，可較好地控制該制劑的質量。

高效液相色譜法；復方水楊酸麝香草酚搽劑；樟腦；麝香草酚

復方水楊酸麝香草酚搽劑是由水楊酸、苯甲酸、麝香草酚、樟腦等組方的復方制劑，具有清熱除濕、殺蟲止癢和較強的抗真菌作用，用于腳癬、手癬、體癬、股癬、疊瓦癬等。其質量標準為醫院制劑室自擬，但其中無主藥樟腦和麝香草酚的含量測定項。目前，采用高效液相色譜（HPLC）法測定樟腦和麝香草酚的含量已有文獻報道［1－3］，但同時測定兩者含量的方法報道較少。為確保制劑質量，本研究中采用HPLC法同時測定樟腦和麝香草酚的含量，現報道如下。

1 儀器與試藥

安捷倫 120型高效液相色譜儀（美國安捷倫公司）；UVIKONxl型紫外分光光度計（德國）。樟腦、麝香草酚對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號分別為100125－201107，100397－201203）；復方水楊酸麝香草酚搽劑（濮陽市第二人民醫院制劑室）；甲醇為色譜純，水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件與系統適用性試驗

色譜柱：Thermo BDS C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流動相：甲醇－水（60∶40）；流速：1.0 mL／min；檢測波長：276 nm；柱溫：室溫；進樣量：20 μL。在上述色譜條件下，樟腦、麝香草酚的理論板數分別為5 560，8 154，兩峰的分離度大于1.5，色譜圖見圖1。

1.樟腦 2.麝香草酚A.混合對照品溶液 B.供試品溶液 C.陰性對照品溶液圖1 高效液相色譜圖

2.2 溶液制備

分別取對照品樟腦約125 mg，麝香草酚約3 mg，精密稱定，置25 mL容量瓶中，加甲醇適量，振搖使溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每1 mL約含樟腦5 mg和麝香草酚0.1 mg的對照品混合溶液。精密量取復方水楊酸麝香草酚搽劑5 mL，置100 mL容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每1 mL中約含樟腦5 mg和麝香草酚0.1 mg的供試品溶液。

2.3 方法學考察

陰性對照試驗：按復方水楊酸麝香草酚搽劑處方比例制備不含樟腦和麝香草酚的空白樣品，按擬訂方法進樣測定。結果表明，其他成分不影響樟腦和麝香草酚的含量測定（見圖1）。

線性關系考察：精密稱取樟腦對照品125.75 mg、麝香草酚對照品2.86 mg，置25 mL容量瓶中，加甲醇適量振搖使溶解，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為混合對照品溶液，分別精密吸取混合對照品溶液8，12，16，20，24，28，32 μL，依次注入高效液相色譜儀，記錄色圖譜，以峰面積積分值（Y）為縱坐標、對照品溶液質量濃度（X，g／L）為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程：樟腦為 Y＝224.69 X－17.97，（r＝0.999 9）；麝香草酚為 Y＝16 057.78 X＋3.454（r＝1.000 0）。結果表明，樟腦、麝香草酚質量濃度分別在2.012～8.048 g／L和0.045 76～0.183 0 g／L范圍內與峰面積積分值線性關系良好。

精密度試驗：取同一對照品溶液，重復進樣5次，記錄色譜峰面積。結果樟腦、麝香草酚的峰面積平均值分別為1 041.16和1 641.40，RSD分別為0.28%和0.59%（n＝5），表明儀器精密度良好。

穩定性試驗：取同一供試品溶液，放置于室溫，分別于0，2，4，8，12，24 h時進樣測定。結果樟腦的平均含量為99.24%，RSD為0.61%（n＝6）；麝香草酚的平均含量為 99.15%，RSD為0.99%（n＝6），表明供試品溶液在24 h內穩定。

重復性試驗：取同一批樣品，按擬訂方法重復取樣測定5次，記錄色譜峰面積，以外標法計算。結果樟腦、麝香草酚平均含量分別為99.69%和99.81%，RSD分別為0.85%和1.08%（n＝5），表明該方法重復性良好。

加樣回收試驗：按樣品處方比例，分別精密稱取樟腦、麝香草酚對照品適量，置適宜容量瓶中，并按處方比例加入其他成分及輔料，制成2種成分濃度均為標示濃度80%，100%，120%的各2份樣品，按擬訂方法進樣測定含量，計算回收率。結果見表1。

表1 樟腦和麝香草酚加樣回收試驗結果（n＝6）

2.4 樣品含量測定

分別精密吸取對照品混合溶液和供試品溶液各20 μL，注入高效液相色譜儀，記錄樟腦、麝香草酚的色譜峰面積，以外標法計算含量。結果見表2。

表2 樣品含量測定結果（標示量%，n＝3）

3 討論

在200～400 nm波長范圍內對樟腦、麝香草酚對照品溶液分別進行紫外光譜掃描，結果樟腦、麝香草酚的最大吸收波長分別為286 nm，276 nm。由于樣品中麝香草酚的含量較少，為提高麝香草酚的檢測靈敏度，故選用麝香草酚的最大吸收波長276 nm作為測定波長，以避免含量較低且吸收較弱的麝香草酚峰面積過小，同時也能使樟腦的含量得到準確測定。

考察了不同比例的甲醇－水－磷酸、乙腈－水、甲醇－水－冰醋酸等流動相系統對峰形、分離度、保留時間等的影響，結果以甲醇－水（60∶40）為流動相時最佳。在此條件下，樟腦、麝香草酚均得到很好地分離，保留時間適中，拖尾因子及對稱因子均符合要求。

［1］何益鋒，劉義釗.HPLC法測定復方麝香草酚滴耳液中兩種組份的含量［J］.齊魯藥事，2007，26（9）：599－600.

［2］余小平，舒金富，黃 華.高效液相色譜法同時測定樟腦苯酚溶液中兩組分的含量［J］.藥物分析雜志，2006，26（8）：1 161－1 164.

［3］黃家衛，盛振華，張 蓓，等.HPLC法測定銀黃噴霧劑中麝香草酚及香荊芥酚的含量［J］.中華中醫藥雜志，2011，26（11）：2 693－2 694.

Determination of Camphor and Thymolum Contents in Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment by HPLC

Wang Jing
（Puyang Municipal Institute for Food and Drug Control，Puyang，Henan，China 457000）

ObjectiveTo establish a high performance liquid chromatography（HPLC）method for the determination of camphor and thymolum contents in Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment.MethodsThe Thermo BDS C18column（250 mm×4.6 mm，5 μm）was used with methanol－water（60∶40）as the mobile phase.The flow rate was 1.0 mL／min and the detection wavelength was 276 nm.ResultsThere was a good linear relationship when the mass concentrations of camphor and thymolum were within the range of 2.012－8.048 g／L and 0.045 76－0.183 0 g／L respectively.The average recovery rate was 99.85%（RSD＝0.71%）and 98.64%（RSD＝2.06%）respectively.ConclusionThe method is simple and feasible with good reproducibility，which can be used for the quality contorl of Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment.

HPLC；Compound Salicylic Acid and Thymol Liniment；camphor；thymolum

R284.1；R286.0

A

1006－4931（2015）02－0044－02

2014－06－20）