坤復康膠囊對慢性盆腔炎大鼠VEGF、NO的影響

逯 莉 王相東

陜西國際商貿(mào)學院(咸陽 712046)

坤復康膠囊對慢性盆腔炎大鼠VEGF、NO的影響

逯 莉 王相東△

陜西國際商貿(mào)學院(咸陽 712046)

目的:探討坤復康膠囊治療慢性盆腔炎(盆腔炎性疾病后遺癥)的作用及其機理。方法:采用“混合細菌懸液法”造慢性盆腔炎大鼠模型,并隨機分為空白組,模型組,坤復康高劑量組、坤復康低劑量組、婦炎康組。采用免疫組化法測定VEGF；采用熒光分光度法測定NO含量。結果:模型組VEGF、NO含量明顯高于其他各組(P<0.05)；坤復康高劑量組VEGF含量和婦炎康組比較有明顯差異(P<0.05)；坤復康高、低劑量組NO含量和婦炎康組比較有明顯差異(P<0.05)。結論:坤復康膠囊治療慢性盆腔炎可以降低大鼠子宮組織VEGF、NO的含量，可以減輕盆腔組織粘連，消除慢性盆腔炎癥狀從而發(fā)揮治療作用。

盆腔炎性疾病后遺癥，曾被稱為“慢性盆腔炎”，近年來發(fā)病率有增高的趨勢[1]。西醫(yī)治療主要為對癥治療，患者耐受性差且易反復發(fā)作，傳統(tǒng)中藥治療受到青睞[2]。坤復康膠囊是陜西康惠制藥股份有限公司的產(chǎn)品，由赤芍、苦參、香附、豬苓、女貞子、劉寄奴、烏藥、萹蓄、萆薢等組成，具有活血止痛,清熱利濕等功效，主要用于慢性盆腔炎、盆腔淤血綜合癥、盆腔疼痛綜合癥等治療，在多年臨床運用中取得滿意療效。本研究從抗炎、解除炎性粘連等方面探討坤復康膠囊治療盆腔炎性疾病后遺癥的作用機制。

1 材 料 1.1實驗大鼠 SPF級雌性Wistar大鼠60只，重量(210±20)g，由西安交通大學實驗動物中心提供，批號:SCXK(陜)2012-005號。

1.2 受試藥品 坤復康膠囊(赤芍、香附、女貞子、劉寄奴、烏藥、苦參、女貞子、萹蓄、萆薢，陜西康惠制藥股份有限公司，國藥準字Z20025834)；婦炎康丸(5g /袋,由長春海外制藥集團有限公司生產(chǎn),國藥準字Z20025524)。

1.3 受試試劑 菌種配制：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、乙型溶血性鏈球菌配成混合細菌懸液，比例采用2∶1∶1，濃度為3×109/mL。NO試劑盒，VEGF免疫組化試劑盒。

2 方 法 2.1 造模方法 腹腔注射10%水和氯醛，待大鼠麻醉后，無菌條件下切開大鼠下腹正中1.0～1.3cm，暴露大鼠子宮并機械性破壞子宮內(nèi)膜組織，同時向子宮雙側(cè)注入0.2mL混合細菌懸液，縫合傷口。保留12只僅進行開腹和關腹手術，未注射細菌混懸液，作為空白組。

2.2 分組及給藥 將實驗動物隨機分為空白組、模型組、坤復康高劑量組、坤復康低劑量組、婦炎康組5組，每組12只。動物適應性喂養(yǎng)15d，正常組與模型組灌胃生理鹽水(20 mL/kg)，坤復康組1.330 g/kg、0.322 g/kg灌胃；婦炎康組5.2 g/kg灌胃。各組每1d1次灌胃,連續(xù)30d。

2.3 取材及指標測定 于給藥后第31天清晨用10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，抽取大鼠腹主動脈血約4mL，于4℃靜置離心后取血清，按照試劑盒說明，采用免疫組化法測定VEGF；剪取子宮1塊，剔除多余組織，精確稱量，采用熒光分光度法測定NO含量。

3 結 果 3.1 血清VEGF含量測定結果情況 見表1。

表1 血清VEGF含量測定表

注： 和模型組比較△P<0.05；和婦炎康組比較▲P<0.05

模型組和其他各組比較有明顯差異(P<0.05)；模型組和坤復康高劑量組與婦炎康組比較有顯著差異(P<0.05)。

3.2 子宮組織NO含量測定結果情況 見表2。

表2 子宮組織NO含量表

注：和模型組比較△P<0.05；和婦炎康組比較▲P<0.05

模型組和其他各組比較有明顯差異(P<0.05)；模型組和坤復康高、低劑量組與婦炎康組比較有顯著差異(P<0.05)。

4 討 論 盆腔炎性疾病后遺癥(慢性盆腔炎)，屬中醫(yī)“帶下病”、“月經(jīng)不調(diào)”等疾病的范疇，臨床癥狀主要為下腹、腰骶部位疼痛、盆腔包塊等。大鼠子宮內(nèi)膜炎的模型基本可以反映人體的盆腔炎癥狀態(tài)[3]。目前中藥治療慢性盆腔炎作用機理的研究主要集中在對機體免疫功能的影響及對細胞因子的影響方面[4]。本實驗從抗炎解除炎性粘連的角度探討坤復康膠囊治療慢性盆腔炎的機制，采用免疫組化法測定VEGF，采用熒光分光度法測定NO含量。血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)可在體內(nèi)誘導血管新生，而血管生成又參與許多病理過程[5]。慢性盆腔炎病癥中，由于炎癥損傷，組織局部會產(chǎn)生增生，粘連，增生組織中血管生成是其主要過程。另外NO的局部大量產(chǎn)生也是造成炎癥損傷的重要物質(zhì)基礎。故而炎性介質(zhì)NO造成慢性盆腔炎組織結構損傷，在損傷修復過程中VEGF誘使內(nèi)皮細胞的遷移、浸潤,形成新生血管，從而造成組織粘連。這是一個鏈鎖反應，是造成慢性盆腔炎的基本機制之一。本實驗結果表明，坤復康膠囊能降低組織NO水平，減輕組織結構損傷，且根據(jù)統(tǒng)計學檢驗，坤復康膠囊高、低劑量組均和對照組比較有顯著性差異；坤復康膠囊還可以降低組織中VEGF的含量，減輕組織粘連發(fā)生的幾率，坤復康膠囊高劑量組和對照組比較有顯著性差異。以上結果提示，坤復康膠囊消除炎癥、解除炎性增生的基本機制之一可能和它減少組織NO、VEGF水平有關。

[1] 劉 靜，高 慧.慢性盆腔炎的中醫(yī)藥治療進展[J].承德醫(yī)學院學報，2011，28(1)：48-50.

[2] 藺明華．中西醫(yī)結合治療慢性盆腔炎療效觀察[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結合雜志，2012，21(20)：2222-2223．

[3] 謝 萍，馮 儉，楊張婧，等，清濕止痛湯對慢性盆腔炎大鼠血清 IL-2 和MDA 水平影響的實驗研究[J].河南中醫(yī)，2011,31(6)：607-608.

[4] 段丹梅．婦科千金片對慢性盆腔炎模型大鼠TNF-α、IL-2、IL-6 表達的影響[J]．中醫(yī)學報，2014，29(10):1467-1468．

[5] 易耀明.桂枝茯苓膠囊對慢性盆腔炎大鼠VEGF與炎癥因子表達影響研究[J].實用臨床醫(yī)藥雜志，2014,18(23)：108-109.

(收稿2015-04-11；修回2015-05-06)

Effects of Kunfukang capsule on VEGF and NO of chronic pelvic inflammatory disease in rats

Shaanxi Institute of international Trade (Xianyang 712046)

Lu Li Wang Xiangdong

Objective:To investigate the Kunfukang capsule in the treatment of chronic pelvic inflammatory disease (sequelae of pelvicinflammatory disease) effect and its mechanism.Methods:By “mixed bacterial suspension” made in rats model of chronic pelvic inflammatory disease,and were randomly divided into blank group,model group,Kunfukang high dose group,Kunfukang low dose group,Fuyankang group.The VEGF was detected by immunohistochemical staining; NO content was determined by fluorescence spectrophotometry.Results :VEGF in model group,the content of NO were significantly higher than those in other groups (P< 0.05); Kunfukang high dose group,VEGF content and Fuyankang group compared with significant difference (P< 0.05); Kunfukang high,low dose group and NO content in Fuyankang group were significantly different (P< 0.05).Conclusion :Kunfukang Capsule in the treatment of chronic pelvic inflammatory disease can reduce the content of rat uterine tissue VEGF and NO,can reduce the adhesion of pelvic tissue,eliminate chronic pelvic inflammatory symptoms and thus play a role in the treatment.

Pelvic inflammatory disease/traditional Chinese medicine therapy @Kunfukang Capsule Nitric oxide Animal experimentation Rats

△ 陜西中醫(yī)藥大學 (咸陽 712046)

盆腔炎性疾病/中醫(yī)藥療法 @坤復康膠囊 一氧化氮 動物實驗 大鼠

R711.33

A

10.3969/j.issn.1000-7369.2015.08.079