2種輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響

陳傳秀，金 青

(青島科技大學化工學院，山東青島 266042)

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2種輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響

陳傳秀，金 青*

(青島科技大學化工學院，山東青島 266042)

[目的]研究淀粉、β-環糊精(β-CD)2種輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響。[方法]采用氣相色譜法，檢測淀粉、β-CD以及分別采用淀粉、β-CD制成的粉劑和顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的含量。[結果]混合物中蘋果蠹蛾性信息素的提取回收率為99.64%～100.02%；粉劑和顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的平均回收率為99.95%～100.00%。[結論] β-CD和淀粉均不影響蘋果蠹蛾性信息素的含量測定，相容性較好，可進一步進行劑型研究。

淀粉；β-CD；蘋果蠹蛾性信息素；含量測定；氣相色譜法

Starch；β-CD；Cydiapomonella(L.) sex pheromone；Content determination；Gas chromatography

蘋果蠹蛾[Cydiapomonella(L. )]是仁果類主要的害蟲之一，自19世紀50年代侵入新疆地區以來，給我國造成了嚴重的經濟損失[1]。蘋果蠹蛾對環境的適應能力強，以幼蟲蛀果危害，防治難度高[2]；同時化學農藥長期大量的使用也造成了蘋果蠹蛾抗藥性的增加，給防治工作帶來了困難[3]。

昆蟲性信息素[4]被國外稱為“第3代農藥”，具有高效、無毒、無污染、不傷害益蟲等優點，利用性信息素誘捕害蟲成為一種切實可行并且應用廣泛的害蟲管理技術。1971年，Roelofs等[5]首次鑒定出蘋果蠹蛾性信息素的主要成分為E8，E10-十二碳二烯醇，現在主要利用誘芯來監測和誘殺害蟲。由于目前蘋果蠹蛾性信息素的使用方式較為單一，筆者研究了淀粉和β-CD 2種常用緩釋材料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響，以期為利用該2種輔料制備緩釋制劑的研究奠定基礎。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要儀器。電子分析天平(上海精密科學儀器有限公司，FA1004N型)、氣相色譜儀(Agilent 6890N GC)、標準檢驗篩(24、100目，浙江省上虞市滬江儀器紗篩廠)、西林瓶(10 ml，安徽華欣藥用玻璃有限公司)、有機濾膜(0.25 μm，上海市新亞凈化器件廠)、溫濕度計(上海晨光文具股份有限公司)。

1.1.2 試劑。淀粉(藥用，天津市廣成化學試劑有限公司)、β-環糊精(藥用，天津博迪化工股份有限公司)、蘋果蠹蛾性信息素(原料藥，純度97%，E8，E10-十二碳二烯醇，上海遐瑞醫藥科技有限公司)、正己烷(色譜純，天津市津東天正化學試劑廠)、無水乙醇(分析純，山東萊陽經濟技術開發區精細化工廠)。

1.2 方法

1.2.1 蘋果蠹蛾性信息素分析方法的建立。

1.2.1.1 色譜條件與系統適應性試驗。色譜條件：毛細色譜柱(30.0 m×250.00 μm×0.25 μm)，普通氮氣為載氣，以氫氣為燃氣，空氣為助燃氣，流速為1 ml/min，初溫120 ℃，保留1 min，升溫速率為20 ℃/min，終溫300 ℃，保留 6 min，檢測器300 ℃，氣化室250 ℃，進樣量1 μl。

1.2.1.2 標準曲線的繪制。稱取E8，E10-十二碳二烯醇，用正己烷稀釋成濃度為80.5、161.0、241.5、323.0、402.5、563.5 μg/ml的標準溶液，置于10 ml容量瓶中，用Agilent 6890N氣相色譜儀測定不同濃度對應的峰面積。

1.2.2 輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定影響的研究。配制低、中、高(243.0、304.0、365.0 μg/ml)3個濃度的性信息素溶液，各取10 ml，分別與1.0 g輔料充分混勻，密閉。5 min后過濾，進樣1 μl測其峰面積，計算回收率，考察2種輔料對不同濃度蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響程度。

1.2.3 方法學考察。

1.2.3.1 精密度試驗。量取濃度為304.0 μg/ml的E8，E10-十二碳二烯醇對照品溶液1 μl進樣，測其峰面積值，重復6次，計算相對標準偏差(RSD)。

1.2.3.2 穩定性試驗。于0、1、4、8、12、24 h量取304.0 μg/ml E8，E10-十二碳二烯醇對照品溶液1 μl進樣，對其峰面積進行積分，計算RSD。

1.2.4 樣品的測定。

1.2.4.1 粉劑中信息素含量的測定。稱取適量蘋果蠹蛾性信息素溶解在1 ml正己烷中，與輔料混合均勻，按每份1 g(約含信息素10 mg)分裝在西林瓶中密封。制備3批。每次取3份樣品，分別倒入25 ml容量瓶中，用正己烷定容，超聲10 min后，0.25 μm濾膜過濾，進樣1 μl測其峰面積。

1.2.4.2 顆粒劑中信息素含量的測定。輔料過100目篩，稱取處方量蘋果蠹蛾性信息素溶解在適量無水乙醇中，緩慢加入處方量的淀粉中，邊加邊攪拌，攪拌均勻后加適量無水乙醇制軟材，過14目篩制濕顆粒。按每份1 g(約含信息素10 mg)分裝在西林瓶中密封。制備3批。每次取3份樣品，分別倒入25 ml容量瓶中，用正己烷定容，超聲10 min后，0.25 μm濾膜過濾，進樣1 μl測其峰面積。

2 結果與分析

2.1 蘋果蠹蛾性信息素含量測定的標準線性關系

以E8，E10-十二碳二烯醇的濃度(C)對峰面積平均值(A)回歸，得標準曲線方程：A=0.794C-14.194，R2=0.999 7，即蘋果蠹蛾性信息素在濃度為80.5～563.5 μg/ml范圍內線性關系良好。

2.2 輔料對蘋果蠹蛾性信息素含量測定的影響

由表1可知，2種緩釋材料中蘋果蠹蛾性信息素的回收率在99.64%～100.02%，因此，淀粉和β-CD對蘋果蠹蛾性信息素含量的測定幾乎無影響。

表1 回收率試驗結果 %

2.3 方法學考察

2.3.1 精密度。試驗結果測得的含量分別為理論值的100.13%、99.66%、98.79%、99.99%、99.97%、100.04%，RSD為0.50%，表明該方法精密度良好。

2.3.2 穩定性。測得含量分別為理論值的98.92%、99.91%、101.00%、99.67%、99.88%、99.14%，RSD為0.74%，表明E8，E10-十二碳二烯醇供試液在24 h內無顯著變化，穩定性良好。

2.4 樣品的測定

2.4.1 粉劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉粉劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為100.10%、99.93%、99.83%，平均回收率為99.95%，RSD為0.140%；3批β-CD粉劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為99.97%、99.92%、100.06%，平均回收率為99.98%，RSD為0.071%。

2.4.2 顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。3批淀粉顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為100.06%、100.03%、99.92%，平均回收率為100.00%，RSD為0.074%；3批β-CD顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素的回收率分別為99.89%、99.99%、100.01%，平均回收率為99.96%，RSD為0.064%。

3 結論與討論

該研究采用氣相色譜法分析測定淀粉、β-CD 2種輔料制成的粉劑、顆粒劑中蘋果蠹蛾性信息素含量。結果表明，

β-CD和淀粉均不影響蘋果蠹蛾性信息素的含量測定，相容性較好，可進一步研究開發其劑型。

氣相色譜法是藥物含量測定和質量檢查、中藥揮發油分析、體內藥物分析、溶劑殘留分析中不可或缺的手段。徐妍等[6]以十二醇為內標物，采用氣相色譜程序升溫法，對不同粒徑的梨小食心蟲性信息素微囊粒劑的釋放特性進行了定期測定；柳丹俠等[7]利用微量氣相色譜建立了一種簡單的提取分離及制備性信息素的方法，該方法適用于毫微克水平的微量分析。張力等[8]借助于氣相色譜法，用殘留測定法、靜態測定法和蒸汽捕集法3種方法測得了棉紅鈴蟲性信息素夾層塑囊劑中性信息素的釋放率。

淀粉[9]是天然的高分子多糖，性質穩定，價廉易得。β-CD[10]為環狀低聚糖化合物，可與具有適當大小和形狀及疏水性的分子通過非共價鍵的相互作用形成穩定的包合物。二者作為緩釋材料可生物降解，避免了二次污染，有利于推廣綠色農業。

性信息素緩釋劑型的研究在國內外得到了廣泛關注，并取得了一定的進展[11-12]，但工業化生產是國內蘋果蠹蛾性信息素緩釋劑型未得到廣泛應用的重要限制因素之一。根據該試驗結果，可進行下一步的緩釋制劑研究，為田間應用奠定基礎。

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[3] 王薛婷，樸美花.我國檢疫性害蟲——蘋果蠹蛾研究進展[J].農林科研，2012(27)：42-43.

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[6] 徐妍，吳國林，胡奕俊，等. 氣相色譜法測定梨小食心蟲性信息素微囊粒劑的釋放特性[J].農藥，2010，49(2)：111-113.

[7] 柳丹俠，文鏡.用于昆蟲外激素研究的微量氣相色譜分析制備方法[J].北京聯合大學學報，2001，15(3)：49-53.

[8] 張力，陳元光，戴小杰.昆蟲性信息素釋放率的測定方法[J].昆蟲知識，1990(3)：169-171.

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陳傳秀(1990- )，女，山東棗莊人，碩士研究生，研究方向：藥物新劑型及新技術。*通訊作者，副教授，碩士生導師，從事藥物新劑型及新技術研究。

2015-11-13

S 482.3+8；TQ 453.8

A

0517-6611(2015)35-203-02

Effects of Two Kinds of Excipients on Determination ofCydiapomonella(L.) Sex PheromoneCHEN Chuan-xiu, JIN Qing*(College of Chemical Engineering, Qingdao University of Science and Technology, Qingdao, Shandong 266042)Abstract [Objective] The aim was to investigate effects of two kinds of excipients on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone. [Method] We used gas chromatography to analyze the content ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture, powders and granules. [Result] The contents ofCydiapomonella(L.) sex pheromone in mixture ranged from 99.64% to 100.02%, and ranged from 99.95% to 100.00% in powders and granules. [Conclusion] Starch and β-CD have no effect on the determination ofCydiapomonella(L.) sex pheromone, and have good compatibility withCydiapomonella(L.) sex pheromone, so their formulation can be carried out.