變應性鼻炎患者組織及血液中的白介素-25表達和意義

變應性鼻炎患者組織及血液中的白介素-25表達和意義

徐麗1, 關兵1, 張俊中1, 王瑩2

(1. 江蘇省蘇北人民醫院 耳鼻咽喉頭頸外科, 江蘇 揚州, 225000, 2. 揚州大學醫學院, 江蘇 揚州, 225001)

關鍵詞:白細胞介素-25; 變應性鼻炎; 免疫組織化學

IL-25又稱IL-17E, 是IL-17家族成員之一，為一種廣泛前炎性因子，具有多種生物學特性，可刺激多種來源的細胞系表達IL-6及IL-8等前炎癥因子和粒細胞集落刺激因子等造血因子，同時也可促進Th2類細胞因子(IL-4、IL-5、IL-13)的產生，介導Th2免疫應答，并在嗜酸粒細胞趨化過程中起著重要作用[1]。變應性鼻炎是耳鼻喉科常見病，易反復發作，嚴重影響病人生活質量。根據文獻報道變應性鼻炎發病率高達12%～30%。實驗證實, IL-25與支氣管哮喘疾病有密切相關性，變應性鼻炎、支氣管哮喘由于解剖連續性，為同一氣道疾病，變應性鼻炎與支氣管哮喘在發病機制方面相似，有許多共同因子參與疾病發生并影響免疫應答和炎癥過程。

1資料與方法

1.1　一般資料

收集2012年1月—2013年2月江蘇省蘇北人民醫院耳鼻咽喉科住院行手術治療的變應性鼻炎合并鼻中隔偏曲及單純鼻中隔偏曲患者63例，年齡20～62歲，平均(30.6士10)歲，其中男32例，女31例。變應性鼻炎組患者分別按照變應性鼻炎(2009武夷山標準)診斷標準納入。單純鼻中隔偏曲矯正的病人為正常對照組。全部病人治療前3周均未用抗炎藥、抗組胺及皮質類固醇激素等治療，常規行內窺鏡檢查了解黏膜有無蒼白水腫、有無鼻息肉。患者簽署知情同意書，并通過倫理審核。其中變應性鼻炎組33例，正常對照組30例。

1.2　標本及取材

變應性鼻炎組：收集患者術前空腹靜脈血液標本,術中在鼻內窺鏡下鼻中隔偏曲矯正后取患者部分下鼻甲黏膜組織；正常對照組：收集患者術前空腹靜脈血液標本,術中鼻內窺鏡下取鼻中隔偏曲矯正術患者部分下鼻甲黏膜組織。標本常規制成石蠟塊保存。血標本，室溫凝固1 h，2 000 r/min 離心15 min, 收集血清，置-20 ℃冷凍保存。

1.3　組織及血清中IL-25的檢測表達及檢測

以S-P免疫組織化學法檢測標本組織中IL-25的表達。IL-25陽性表達呈棕褐色,在400倍光學顯微鏡下隨機選取5個視野計數陽性細胞，取平均值為該標本的IL-25陽性細胞數/HP。以ELISA法檢測血清中IL-25含量。IL-25定量酶聯檢測試劑盒(購于北京中杉金橋生物技術有限公司)，將酶標板放入酶標儀測光密度值，選擇450 nm光進行比色，采取數據。

2結果

免疫組化染色片上所有染色背景清晰，陽性表達呈棕褐色，在變應性鼻炎鼻黏膜下層浸潤的炎性細胞中表達顯著，間質中腺腔內和血管周圍炎細胞有不同程度表達，變應性鼻炎中上皮層少量表達。IL-25在對正常照組中表達的陽性細胞數少或幾乎不表達。變應性鼻炎患者組陽性細胞數為(15.94±9.03)/HP, 正常對照組陽性細胞數為(4.19±2.54)/HP。變應性鼻炎患者組血清IL-25含量為(227.71±139.37) pg/mL，正常對照組IL-25 含量為(98.68±52.06) pg/mL, 2組組織間IL-25陽性細胞表達數差異有統計學意義(P<0.01), 2組血清中IL-25含量表達數差異有統計學意義(P<0.01)。

3討論

IL-25是Lee等[2]首先報道命名為IL-17E,為IL-17家族的新成員,同時是Fort等[3]發現報道的由Th2細胞產生的細胞因子，其結構與IL-17 存在相似的細胞因子, 在NCBI表達序列標簽(EST)數據庫中進行了BLAST搜索, 找到一段與IL-17有顯著同源性的EST序列, 通過反向遺傳學的方法，克隆了IL-25 的基因。人的IL-25基因全長為3987 bp, 染色體位于14q11.2，其中有2個外顯子和1個內含子。成熟的IL-25是一種分泌性糖蛋白，為同源二聚體。

IL-25是極其重要前炎性因子，與多種臨床疾病發生發展有著密切相關性，目前研究發現IL-25具有多種生物學功能，尤其可以多方面調節黏膜免疫，促進Th2細胞分化，促進免疫應答反應,還能夠影響Thl7細胞的分化并調節自身免疫性疾病的發生發展[4]。最近國外學者研究確定有兩種細胞因子IL-25和胸腺基質淋巴細胞生成素(TSLP)能夠啟動Th2型過敏反應，IL-25不僅是Th2反應增強劑，更為Th2反應引發劑[5]。

國內外多個學者研究發現IL-25這個細胞因子主要是影響IL-4、IL-5與IL-13等Th2類細胞因子的表達和活化信號通路，參與免疫疾病的發生發展。國外學者Fort等[3]實驗中發現，被IL-25處理組小鼠除了IL-13、IL-5、IL-4表達增加外，同時發現其血EOS增多，血清IgE水平增高。肺組織的組織切片發現上皮細胞增生肥大、EOS及單核細胞浸潤、黏液產生過多。Tamachi等[6]在其研究中證實經變應原吸入而致敏的小鼠肺組織中發現lL-25mRNA的表達。用slL-25R中和IL-25后減少了EOS及CD4+T細胞向氣道內募集。Ballantyne等[7]制備了IL-25單克隆抗體,中和封閉IL-25，有效抑制了哮喘模型小鼠的氣管高反應性(AHR)。這些實驗證實了IL-25與支氣管哮喘疾病有密切相關性，支氣管哮喘具有嗜酸性粒細胞和CD4+T細胞氣道浸潤、黏液分泌增多、氣道重塑及高反應性等特征，是由Th2細胞及其細胞因子IL-13、IL-5和IL-4誘導的一種免疫炎癥，是呼吸系統的常見病和多發病。變應性鼻炎、支氣管哮喘由于解剖連續性，為同一氣道疾病，變應性鼻炎與支氣管哮喘在發病機制方面相似，有許多共同因子參與疾病發生并影響免疫應答和炎癥過程[8-10]。

本研究中發現, IL-25在變應性鼻炎鼻黏膜下層浸潤的炎性細胞中表達顯著，間質中腺腔內和血管周圍炎細胞有不同程度表達，上皮層見少量表達，IL-25在正常下鼻甲對照組表達的陽性細胞數少或幾乎不表達。變應性鼻炎組血清中IL-25含量明顯高于正常對照組的血清含量(P<0.05)。近年來對變應性鼻炎發病機制研究有了一系列進展，認為其發病機制為變態反應, 與免疫功能紊亂有關。最新研究表明Th1/Th2/Th17的失衡是免疫學發病機制中的一個重要環節。變應性鼻炎是由Th2細胞及其細胞因子IL-4、IL-5和IL-13誘導的一種免疫炎癥，作為一種免疫變態反應疾病，許多細胞因子參與其發病過程，因此對這些細胞因子的研究已成為研究該疾病的重要方向，本實驗進一步證實了IL-25參與變應性鼻炎發病過程。IL-25在變應性鼻炎的發生與進展中起重要作用。

參考文獻

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[6]Tamachi T, Maezawa Y, Ikeda K, et al. Interleukin 25 in allergic airway inflammation[J]. Int Arch Allergy Immunol, 2006, 140(Suppl 1): 59.

[7]Ballantyne S J, Barlow J L, Jolin H E, et al. Blocking IL-25 prevents airway hyperresponsiveness in allergic asthma[J]. J Allerger Clin Immunol, 2007, 120(6): 1324.

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[10]張羅, 王成碩, 王向東. 過敏性鼻炎診治進展[J]. 中國實用內科雜志, 2012, 32(2): 86.

通信作者:張俊中

收稿日期:2015-05-23

中圖分類號:R 765.21

文獻標志碼:A

文章編號:1672-2353(2015)21-202-02DOI: 10.7619/jcmp.201521079