豬圓環(huán)病毒病疫苗的應(yīng)用

李少麗 李艷麗/杭州薦量獸用生物制品有限公司 李新華/中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所

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豬圓環(huán)病毒病疫苗的應(yīng)用

李少麗 李艷麗/杭州薦量獸用生物制品有限公司 李新華/中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院家禽研究所

一、豬圓環(huán)病毒病的概況

豬圓環(huán)病毒病是最近幾年才被發(fā)現(xiàn)的一種以仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜合征和皮炎腎病綜合征為主要臨床特征的一種新的豬病，由豬圓環(huán)病毒（Porcine circovirus，PCV）引起。1991年加拿大首先報(bào)道了該病。1997年，Clark首次證實(shí)了PMWS的主要致病原是PCV2病毒。2000年，郎洪武等通過(guò)對(duì)多個(gè)省份采集血清樣本的檢測(cè)，證實(shí)了PCV2在我國(guó)的存在。

PCV2屬于圓環(huán)病毒科，圓環(huán)病毒屬，無(wú)囊膜，由單股、共價(jià)閉合的環(huán)狀DNA組成，病毒粒子直徑約17 nm，呈二十面體對(duì)稱，是目前發(fā)現(xiàn)的最小的一種脊椎動(dòng)物病毒。該病毒可分為兩種血清型，即PCV1 和PCV2。其中PCV1對(duì)豬無(wú)致病性，廣泛存在于豬體內(nèi)和豬源傳代細(xì)胞系中，PCV2可在豬群內(nèi)引發(fā)多種傳染病，如斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）、豬皮炎腎病綜合征（PDNS）等。PCV2不僅可造成仔豬生長(zhǎng)緩慢，還會(huì)侵害豬的免疫系統(tǒng)，導(dǎo)致豬群免疫抑制，直接引起其他傳染病免疫的失敗，并引發(fā)其他病原的繼發(fā)感染。PCV1基因組全長(zhǎng)1 759 bp，PCV2為1 767 bp或1 768 bp，共包括ORF1和ORF2在內(nèi)的11個(gè)ORF。目前已證實(shí)，PCV2的ORF1編碼與病毒復(fù)制有關(guān)的蛋白（Rep蛋白），ORF2編碼病毒衣殼蛋白（Cap蛋白），Cap蛋白為病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白，是刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫應(yīng)答的主要抗原，成為該病在流行病學(xué)診斷和疫苗研究中的熱點(diǎn)。

二、國(guó)內(nèi)外PCV2疫苗的開(kāi)發(fā)和應(yīng)用情況

2001年前后，一些規(guī)模化豬場(chǎng)嘗試用PCV2典型發(fā)病豬的病變組織制作PCV2組織苗以預(yù)防該病，效果很好。但因考慮到組織滅活苗的生物安全性，實(shí)際應(yīng)用的豬場(chǎng)并不多。在商品化疫苗出現(xiàn)之前，PCV2曾對(duì)我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)造成了很大損失。目前我國(guó)養(yǎng)豬場(chǎng)PCV2的血清陽(yáng)性率高達(dá)90%，針對(duì)該病的國(guó)內(nèi)外商品化疫苗主要為全病毒滅活疫苗、嵌合病毒疫苗。

1.全病毒滅活疫苗。

我國(guó)自2009年以來(lái)，已有多個(gè)PCV2疫苗產(chǎn)品上市，農(nóng)業(yè)部批準(zhǔn)上市的疫苗均為不同毒株和劑型的全病毒滅活疫苗。如浙江大學(xué)周繼勇教授與薦量生物、諾倍威等共同開(kāi)發(fā)的ZJ/C株、水包油（O/W）型豬圓環(huán)病毒2型滅活疫苗，該毒株在PK-15細(xì)胞上生長(zhǎng)良好，滅活前半成品病毒含量可高達(dá)107.5TCID50/ml。其余均為油包水（W/O）型疫苗，如福州大北農(nóng)與成都天邦開(kāi)發(fā)的DBNSX07株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量105.5TCID50/ml以上；武漢中博、科前生物、永順等開(kāi)發(fā)的WH株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量在107.0TCID50/ml以上；江蘇南農(nóng)高科與洛陽(yáng)普萊柯等開(kāi)發(fā)的SH株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量在106.0TCID50/ml以上；哈維科與上海海利等開(kāi)發(fā)的LG株滅活疫苗，滅活前半成品病毒含量在105.5TCID50/ml以上。進(jìn)口的全病毒滅活疫苗主要是法國(guó)梅里亞動(dòng)物保健公司研發(fā)的PCV2礦物油佐劑疫苗，推薦用于母豬的免疫，仔豬獲得的母源抗體可以在5周內(nèi)有效抵抗PCV2的侵襲。其免疫方式為間隔3～4周免疫2次，但必須在分娩前2周完成，并且在下次懷孕期再次免疫。

2.PCV1-PCV2嵌合病毒疫苗。

美國(guó)富道公司研制的PCV2嵌合病毒滅活苗，是將PCV2的ORF2片段置換不致病的PCV1的ORF2片段，獲得PCV1-PCV2嵌合病毒，使其具有與PCV2類似的免疫原性。主要為4周齡以上豬使用，一次肌肉免疫注射。

3.PCV2亞單位疫苗。

勃林格殷格翰動(dòng)物保健公司的PCV2疫苗（CircoFlex）和英特威/先靈葆雅動(dòng)物保健公司的PCV2疫苗（Circumvent））均是用昆蟲(chóng)桿狀病毒表達(dá)PCV2的ORF2基因，大量獲得具有免疫原性的PCV2核衣殼蛋白，再加入佐劑制成PCV2亞單位疫苗。勃林格疫苗的免疫方式是對(duì)3周齡仔豬給予一次免疫肌肉注射。大量田間試驗(yàn)表明，該疫苗可為仔豬提供良好的保護(hù)。先靈葆雅疫苗的免疫方式為3周齡以上豬，間隔3周給予2次肌肉注射。

4.PCV2疫苗應(yīng)用情況。

進(jìn)口疫苗價(jià)格昂貴，如勃林格的PCV2亞單位疫苗是獲得我國(guó)農(nóng)業(yè)部批文的唯一一家外資企業(yè)，其市場(chǎng)標(biāo)價(jià)為28元/頭份（國(guó)內(nèi)疫苗約10元/頭份），雖可對(duì)仔豬提供良好的免疫保護(hù)效果，但由于價(jià)格太高，導(dǎo)致一些養(yǎng)殖場(chǎng)“用不起”，國(guó)內(nèi)養(yǎng)殖場(chǎng)一般對(duì)種公豬、種母豬、后備母豬等才使用進(jìn)口疫苗，而對(duì)于生產(chǎn)用肉豬不免疫或只免疫國(guó)產(chǎn)疫苗。

針對(duì)PCV2滅活苗存在著病毒滅活不徹底，疫苗副反應(yīng)大，免疫持續(xù)期短而需二次免疫，以及進(jìn)口疫苗價(jià)格昂貴等特點(diǎn)，目前國(guó)內(nèi)有些疫苗生產(chǎn)廠家已經(jīng)開(kāi)始致力于基因工程疫苗的開(kāi)發(fā)，如2014年斯澳生物的豬圓環(huán)病毒基因工程疫苗已獲農(nóng)業(yè)部臨床試驗(yàn)批文，青島易邦的豬圓環(huán)病毒2型基因工程亞單位疫苗“易圓凈”也已經(jīng)發(fā)布上市；這些都標(biāo)志著豬圓環(huán)病毒基因工程苗已進(jìn)入國(guó)產(chǎn)化階段，并將逐步取代價(jià)格昂貴的進(jìn)口疫苗，成為百姓“用得起”的疫苗產(chǎn)品。

三、展望

豬圓環(huán)病毒病是全球公認(rèn)的危害養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病，該病可造成T、B淋巴細(xì)胞在外周血中含量降低，并可誘導(dǎo)CD4、CD8等細(xì)胞凋亡，造成免疫抑制，不僅造成該類疫苗的免疫失敗，而且容易繼發(fā)或并發(fā)副豬嗜血桿菌、豬附紅細(xì)胞體、豬藍(lán)耳病、偽狂犬等病原，業(yè)內(nèi)稱之為豬的“艾滋病”。由于豬PCV2疫苗的免疫普及率僅在20%～30%左右，按我國(guó)每年生豬出欄量6億頭，50%免疫比例，10元/頭份計(jì)算，未來(lái)我國(guó)圓環(huán)疫苗的市場(chǎng)銷售額將高達(dá)30億元左右。PCV2疫苗已成為繼豬瘟、口蹄疫、藍(lán)耳病、偽狂犬等疫苗之后的首個(gè)使用量最大的疫苗品種，有很大的發(fā)展前景。因此研制開(kāi)發(fā)高效、安全、廉價(jià)的PCV2疫苗成為防控該病的必然趨勢(shì)。

參考文獻(xiàn)（略）