子癇前期患者HLA-G水平在胎盤組織、血清中表達的臨床價值分析

河北省邯鄲市第二醫院(邯鄲056001)

李 萍 柴靜波 姬白嫣

子癇前期患者HLA-G水平在胎盤組織、血清中表達的臨床價值分析

河北省邯鄲市第二醫院(邯鄲056001)

李 萍 柴靜波 姬白嫣

目的：探討子癇前期患者胎盤組織及血清中人類白細胞抗原G(HLA-G)的表達及其臨床意義。方法：選取子癇前期產婦102例，正常妊娠婦女60例作為對照(正常妊娠組)，采用實時熒光定量PCR(real-time PCR)和酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測各組胎盤組織HLA-G mRNA及血清中可溶性人類白細胞抗原G(sHLA-G)水平。結果：正常妊娠組胎盤HLA-G mRNA相對表達量明顯高于輕度子癇前期組和重度子癇前期組(P<0.05)；正常妊娠組血清sHLA-G 濃度明顯高于輕度子癇前期組和重度子癇前期組(P<0.05)；輕度子癇前期組和重度子癇前期組胎盤HLA-G mRNA相對表達量、血清sHLA-G 濃度比較差異無統計學意義(P>0.05)；子癇前期患者血清sHLA-G 濃度與胎盤HLA-G mRNA表達呈正相關(P<0.05)。結論：子癇前期患者胎盤組織HLA-G mRNA表達以及血清sHLA-G 濃度明顯減少，且血清sHLA-G 濃度與胎盤組織HLA-G mRNA表達水平有相關性，可能與子癇前期的發生和病理生理過程有關。

子癇前期為妊娠期高血壓疾病的較為嚴重的一種類型，主要通過損傷孕婦的心血管系統、泌尿系統以及微血管內皮，從而導致嚴重的臨床癥狀[1]。部分學者認為絨毛膜外滋養細胞的侵襲性下降可能顯著參與到了子癇前期的發生發展過程[1, 2]，而人類白細胞抗原G作為HLA-I類分子，通過誘導母體與胎兒的免疫耐受參與到了妊娠期高血壓疾病的發生發展過程[3]。本研究探討在我院住院分娩的102例子癇前期產婦相關胎盤組織、血清中HLA-G表達水平的差異，來揭示HLA-G在子癇前期發生發展中的作用，報道如下。

資料與方法

1 一般資料 選取2013年2月至2015年3月在我院住院分娩的子癇前期產婦，納入標準：①診斷符合謝幸、茍文麗主編的第8版《婦產科學》中的標準；②均為單胎初產；③產婦及家屬知情同意，并簽署同意書。本次研究共納入子癇前期患者102例，其中輕度子癇前期組63例，重度子癇前期組39例，同時選取正常妊娠婦女60例作為對照(正常妊娠組)，年齡為21～32歲，平均年齡27.01±5.18歲，孕次(次)為1～3，平均次數為1.48±0.52。3組孕婦一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

2 方 法

2.1 標本采集：采集孕婦肘部靜脈血，室溫放置30min，待血液凝固后4攝氏度3000r/min離心10 min，分離出血清，-70攝氏度保存，3d內測定相關HLA-G值；胎盤組織排出后5min內采集近臍帶根部的胎盤組織1.5×1.5×1.5cm大小組織，生理鹽水漂洗3次，每次5min，立即放入液氮中。

2.2 酶聯免疫吸附法:(ELISA)采用江蘇吳生生物科技有限公司生產的ELISA試劑盒測定HLA-G，選用MULTISKANMK3酶標儀測定450nm吸收光度值(thermo公司)。

2.3 實時熒光定量PCR(real-time PCR):采用南京凱基生物科技有限公司生產的RNA提取試劑盒提取組織RNA(研磨法)，采用takara試劑(南京凱基生物科技有限公司)盒逆轉錄為cDNA(引物體系2ul)，采用takaraSYBN熒光定量PCR試劑盒(SYBN master mix QPCR 南京凱基生物科技有限公司)擴增mRNA。

結 果

1 各組胎盤組織HLA-G mRNA表達情況 正常妊娠組胎盤HLA-G mRNA相對表達量為0.69±0.14，明顯高于輕度子癇前期組和重度子癇前期組，差異有統計學意義(P<0.05)，輕度子癇前期組和重度子癇前期組胎盤HLA-G mRNA相對表達量比較差異無統計學意義(P>0.05)

2 各組血清sHLA-G 濃度情況 正常妊娠組血清sHLA-G 濃度為50.13±5.39ng/ml，明顯高于輕度子癇前期組和重度子癇前期組的29.01±9.20ng/ml和27.18±8.49ng/ml，差異有統計學意義(P<0.05)；而輕度子癇前期組和重度子癇前期組血清sHLA-G 濃度比較差異無統計學意義(P>0.05)

3 子癇前期患者血清sHLA-G 濃度與胎盤HLA-G mRNA表達關系 子癇前期患者血清sHLA-G 濃度與胎盤HLA-G mRNA表達呈正相關(r=0.924，P<0.05)

討 論

近年來越來越多的基礎理論研究特別是病理妊娠理論的發展證實，絨毛膜外滋養細胞作為具有顯著侵襲性的細胞亞群，顯著參與到了妊娠期高血壓疾病的發生發展過程中[3, 4]。一般認為，母體成功而健康的妊娠過程依賴于母體與胎兒免疫系統相互耐受，而部分學者認為絨毛膜外滋養細胞顯著誘導了母體與胎兒間的免疫耐受過程[5]。部分絨毛膜內細胞以及絨毛膜外滋養細胞通過參與侵襲蛻膜組織以及淺肌層，從而引起肌層纖維組織呈現疏松改變、促進弓狀血管擴張，引起螺旋動脈血管內皮以及肌層的重塑性改變，從而顯著改善妊娠特別是妊娠中晚期孕婦因血流灌注增加導致的血流動力學異常。而人類白細胞抗原HLA-I類分子HLA-G主要表達于絨毛膜外滋養細胞中，部分學者認為其通過參與侵襲蛻膜組織以及子宮淺肌層，來參與到妊娠中晚期血流動力學的改善中。

本研究發現，正常妊娠組胎盤HLA-G mRNA相對表達量明顯高于輕度子癇前期組和重度子癇前期組，而不同程度的子癇前期患者胎盤中HLA-G mRNA的表達并無差異。子癇前期患者胎盤中HLA-G mRNA顯著下降，胎盤中血管數量以及平均血管直徑均顯著減小，同時合體滋養細胞結節增多，胎盤間質出現顯著的纖維化變性生長纖維素性壞死，絨毛膜小動脈特別是螺旋動脈以及弓狀血管密度顯著降低。另外，對于正常孕婦以及子癇前期患者血清sHLA-G 濃度進行研究后發現，正常妊娠組血清sHLA-G 濃度為50.13±5.39ng/ml，明顯高于輕度子癇前期組和重度子癇前期組，進一步提示了sHLA-G以及胎盤組織中HLA-G可能顯著參與到了子癇前期的發生發展過程中。另外，本研究發現子癇前期患者血清sHLA-G 濃度與胎盤HLA-G mRNA表達呈正相關，表明胎盤組織中HLA-G的表達與循環血中sHLA-G的含量具有較好的一致性變化趨勢，進一步提示了胎盤組織可能通過外分泌sHLA-G來刺激高表達CD56的自然殺傷細胞(NK)膜表面的KIR2DL4抑制性受體，進而參與到妊娠期胎盤組織特別是相應血管的生理性改變。

總之，子癇前期患者胎盤組織HLA-G mRNA表達以及血清sHLA-G 濃度明顯減少，且血清sHLA-G 濃度與胎盤組織HLA-G mRNA表達水平有相關性，提示HLA-G可能與子癇前期的發生和病理生理過程有關。

[1] 馬艷娟，劉 陶，王 慧，等. HLA-G在子癇前期患者血清及胎盤中的表達及意義[J]. 實用婦產科雜志,2014,23(06):452-456.

[2] 謝瑩鶯，耿排力，呂同德，等. 高原地區子癇前期患者胎盤及血清HLA-G表達水平及臨床意義[J]. 青海醫學院學報,2012,25(01):35-38.

[3] 彭 潔，唐 卉. 子癇前期患者血清和胎盤組織中IL-24、HLA-G蛋白的表達及意義[J]. 中國婦幼保健,2014,45(33):5478-5480.

[4] 王雅萍，徐友娣，嚴檬潔. 可溶性人類白細胞抗原G與重度子癇前期的相關性研究[J]. 臨床與病理雜志,2014,15(05):498-501.

[5] 顧雪敏，古 航，陳 雄. 蛻膜組織中樹突狀細胞DEC-205及HLA-G的表達與子癇前期的關系研究[J]. 中國現代醫學雜志,2013,17(10):36-41.

(收稿：2015-08-06)

子癇 @人類白細胞抗原 胎盤

R714.2

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.12.036