劉 芳,吳三林,龔明福,張吉林,伏秦超,陳 莎
(樂山師范學院生命科學學院,四川 樂山 614000)
鳳仙花屬(Impatiers)植物全球大約有900多種,主要分布在亞熱帶與熱帶山區,在我國約有220多種,其地理分布具有極其明顯的地域性和特有性。四川峨眉山分布有12個特有種[1],華麗鳳仙花(Impatiens faberi Hook.f.)為其中之一,生于海拔1 350~2 100m林下,花紫紅色,花期長。目前國內外對于鳳仙花的研究主要是集中在兩個方面:一是化學成分,研究表明鳳仙花含有大量黃酮類、萘醌類、香豆素類、甾醇類等成分[2];二是藥理藥效,認為鳳仙花有較好的抗過敏、抗真菌、抗細菌等作用[3~9]。為了驗證峨眉山特有種華麗鳳仙花是否具有相類似的藥理藥效,我們以華麗鳳仙花的莖、葉、花瓣為試材,采用3種不同溶劑浸提,研究浸提液對于細菌的抑制作用,以期為華麗鳳仙花的開發提供參考。
華麗鳳仙花植株采自峨眉山海拔1 720~1 920 m處,分別取其莖、葉、花,置于冰盒中帶回實驗室。大腸埃希氏菌(Escherichia coli)、金黃色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus Rosenbach)、枯草芽孢桿菌黑色變種(Bacillus subtilis var.Niger)由樂山師范學院微生物實驗室提供。培養基為牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基,其主要成分為牛肉膏10 g、氧化鈉5 g、蛋白胨10 g、瓊脂20 g、pH 7.0~7.2、蒸餾水1 000mL,高壓滅菌20min。
1.2.1 提取液制備 分別取華麗鳳仙花的莖、葉、花瓣樣品各80 g,研磨后分別加入200mL的水、75%乙醇和75%丙酮,浸提,重復2次后合并所得濾液。在60℃條件下旋轉蒸干,用80mL無菌水分別配成1 g/mL溶液[8]。
1.2.2 菌懸液的制備 將3個菌種在斜面培養基進行活化,將已經活化的菌種在無菌條件下分別接種于50mL細菌培養液中,在恒溫37℃的條件下搖瓶培養24 h?!?br>