(S)-富馬酸替諾福韋二吡呋酯的合成*

黃小光，朱少璇，余柱明，廖 維，陳 溪，劉 毅

(廣州白云山制藥股份有限公司廣州白云山制藥總廠，廣東廣州 510515)

富馬酸替諾福韋二吡呋酯(6)是美國Gilead sciences公司研制的核苷酸逆轉錄酶抑制劑，主要用于艾滋病和慢性乙肝治療［1－2］。6具有耐受性好、耐藥率低、停藥反彈率低和腎毒性小等優點，臨床應用效果較好［3］。

6的化學結構中含有一個R-構型的手性中心［4－5］。分子藥理學研究表明，含有手性因素的化學藥物異構體，在人體內的藥理活性、代謝過程和毒性存在顯著差異［6］。因此，為研究6的原料藥中S-構型雜質(S)-6的藥理性質，本文以腺嘌呤(1)為原料，與(S)-碳酸丙烯酯反應得(S)-1-(6-胺基-9H-嘌呤-9-基)丙基-2-醇(2);2 與對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯(DESMP)反應得(S)-二乙基 【{［1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙基-2-醇］氧}甲基】磷酸酯(3);3與三甲基溴硅烷反應得(S)-替諾福韋(4);4與氯甲基異丙基碳酸酯反應得(S)-替諾福韋二吡呋酯(5);5與富馬酸反應合成了(S)-富馬酸替諾福韋二吡呋酯［(S)-6，Scheme 1］，總收率10.0%，其結構經1H NMR 和ESI-MS確證。該反應路線原料廉價易得，過程簡單，便于工業化生產。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

Scheme 1

Bruker-AVANCE AV 400 MHz型核磁共振儀(CDCl3為溶劑，TMS為內標);Finnigan-LCQDeca XP LC-MS型質譜儀;Foss Heraeus-240 CHN Rapid型元素分析儀。

所用試劑均為分析純。

1.2 合成

(1)(S)-1-(6-胺基-9H-嘌呤-9-基)丙基-2-醇［(S)-2］的合成

在三口瓶中依次加入1 80.00 g(592 mmol)，DMF 380 mL，氫氧化鈉9.48 g(237 mmol)和(S)-碳酸丙烯酯78.60 g(770 mmol)，攪拌下于130℃反應18 h。降溫至40℃，加入混合溶液A［A=V(甲醇)∶V(異丙醇)=1 ∶1］480 mL，于12 ℃析晶1 h;過濾，濾餅于4℃用混合溶液A 80 mL洗滌，抽干后于45℃真空干燥4.5 h得白色固體(S)-2 87.70 g，收率 76.7%，+44.9°(c 1，甲醇);1H NMR δ:8.31(s，1H)，7.81(s，1H)，5.58(s，2H)，4.29 ～4.19(m，2H)，4.11(dd，J=13.8 Hz，7.2 Hz，1H)，2.95(s，1H)，1.28(d，J=6.4 Hz，3H);ESI-MS m/z:Calcd for C8H11N5O{［M+H］+}193.1，found 194.2。

(2)(S)-二乙基 【{［1-(6-氨基-9H-嘌呤-9-基)丙基-2-醇］氧}甲基】磷酸酯［(S)-3］的合成

在三口燒瓶中依次加入(S)-2 8.00 g(41 mmol)，N-甲基吡咯烷酮32 mL和叔丁醇鎂12.40 g(73 mmol)，攪拌下滴加對甲苯磺酰氧甲基膦酸二乙酯(DESMP)16 mL(62 mmol)，滴畢，于78℃反應5 h。降溫至20℃，滴加冰醋酸6.1 mL，滴畢，于0℃加入乙酸乙酯220 mL，攪拌0.5 h，靜置0.5 h;傾出上層清液，減壓濃縮得(S)-3的N-甲基吡咯烷酮溶液，直接投入下一步反應。

(3)(S)-替諾福韋［(S)-4］的合成

于室溫在(S)-3的N-甲基吡咯烷酮溶液中滴加三甲基溴硅烷19.2 mL(145 mmol)，滴畢，于78℃反應15.5 h。減壓濃縮，依次加水32 mL和乙酸乙酯64 mL，分液，水相用乙酸乙酯(32 mL)洗滌，攪拌下于5℃滴加40%氫氧化鈉溶液4.7 mL(pH 2.8 ～3.2)，析晶 6 h。過濾，濾餅依次用 5℃冷水(10 mL)和5℃丙酮(10 mL)洗滌，于90℃真空干燥 15.5 h 得白色固體(S)-4 4.67 g，收率39.3%，－ 29.8°(c 1，0.1 mol·L－1NaOH);1H NMR δ:8.15(s，2H)，7.25(s，2H)，5.39(bs，2H)，4.28(dd，J=14.4 Hz，4.0 Hz，1H)，4.17(dd，J=14.4 Hz，5.6 Hz，1H)，3.97 ～ 3.86(m，1H)，3.59(qd，J=13.2 Hz，9.6 Hz，2H)，1.03(d，J=6.3 Hz，3H);ESI-MS m/z:Calcd for C9H14N5O4P{［M － H］－}287.1，found 286.2。

(4)(S)-替諾福韋二吡呋酯［(S)-5］的合成

在干燥的三口燒瓶中加入(S)-4 4.67 g(16 mmol)和N-甲基吡咯烷酮19 mL，攪拌10 min;于45℃滴加三乙胺9 mL(65 mmol)，滴畢，攪拌10 min;加入四正丁基溴化銨5.26 g(16 mmol)，攪拌5 min;緩慢滴加氯甲基異丙基碳酸酯11 mL(0.081 mmol)，滴畢，于53℃反應4 h。加入正庚烷28 mL，充分搖勻后靜置25 min。分液，有機相加入正庚烷28 mL，充分搖勻，靜置25 min;分液，依次加入乙酸乙酯47 mL和水24 mL，搖勻，分液;水相用乙酸乙酯28 mL萃取，合并有機相，依次用5℃冷水(3×28 mL)和飽和食鹽水(28 mL)洗滌，無水硫酸鈉干燥，減壓濃縮得淺黃色油狀粗品5 4.85 g，收率57.3%。5 不經純化，直接投入下一步反應。

(5)(S)-6的合成

在單口燒瓶中加入(S)-5 4.85 g(9.30 mmol)和異丙醇16 mL，攪拌至澄清;加入富馬酸1.36 g(11.70 mmol)，于 58 ℃ 反應 2 h。冷卻至25℃，攪拌15 min;攪拌下于0℃析晶2 h。過濾，濾餅用5℃異丙醇洗滌，于45℃真空干燥2 h得白色固體［(S)-6］3.40 g，收率57.6%，［α］20D+9.7°(c 1，甲醇);1H NMR δ:13.12(s，2H)，8.13(s，1H)，8.03(s，1H)，7.19(s，2H)，6.63(s，2H)，5.62 ～5.46(m，4H)，4.91 ～4.74(m，2H)，4.26(dd，J=14.4 Hz，4.0 Hz，1H)，4.17(dd，J=14.4 Hz，6.1 Hz，1H)，4.05 ～3.90(m，3H)，1.24(d，J=6.2 Hz，12H)，1.06(d，J=6.2 Hz，3H);ESI-MS m/z:Calcd for C19H30N5O10P·C4H4O4{［M+H］+}519.2，found 520.2。

［1］崔嵐，安富榮，王曉珉.核苷酸逆轉錄酶抑制劑替諾福韋 DF［J］.中國新藥雜志，2004，13(11):1054 －1058.

［2］張久聰，聶青和.治療慢性乙型肝炎新藥——替諾福韋酯［J］.世界華人消化雜志，2008，16(24):2679－2688.

［3］周洪林，王永怡，董時軍.替諾福韋DF治療治療慢性乙型肝炎和HIV感染的研究動態［J］.傳染病信息，2008，21(4):221 －224.

［4］吳燕，陳國華，胡楊，等.富馬酸泰諾福韋酯的合成［J］.中國醫藥工業雜志，2011，42(2):81 －83.

［5］Clercq E D.Highlights in the discovery of antiviral drugs:A personal retrospective［J］.Journal of Medicinal Chemistry，2010，53(4):1438 －1450.

［6］Clercq E D.The clinical potential of the acyclic(and cyclic)nucleoside phosphonates:The magic of the phosphonate bond［J］.Biochemical Pharmacology，2011，82:99－109.