氣相色譜法測定2－二乙氨基乙硫醇的含量

張金霞，郭強功，包潔華，張 萍，馬小莉

（寧夏泰瑞制藥股份有限公司，銀川750101）

氣相色譜法測定2－二乙氨基乙硫醇的含量

張金霞，郭強功，包潔華?，張 萍，馬小莉

（寧夏泰瑞制藥股份有限公司，銀川750101）

為建立2－二乙氨基乙硫醇含量檢測的氣相色譜法，采用氫火焰離子檢測器，分流進樣，分流比25∶1，設定程序升溫，用面積歸一化法進行計算。2－二乙氨基乙硫醇在濃度0.1～0.6 g／mL范圍內與峰面積具有良好的線性關系，線性方程為Y＝2.0×107X－3.1×105，相關系數R2為0.9981，精密度測試中重復性的RSD為0.03%，中間精密度的RSD為0.30%。本方法簡便、準確，重現性好，可用于2－二乙氨基乙硫醇的含量測定。

2－二乙氨基乙硫醇；毛細管柱；氣相色譜法；程序升溫

延胡索酸泰妙菌素是一種動物專用的新型半合成抗生素，是由傘菌科北鳳菌（Pleurotus mutilis）的培養液中提取的伯魯羅母林（pleuromuLin）的氫化延胡索酸鹽。臨床主要用于防治雞的慢性呼吸道病，用于豬的支原體肺炎（氣喘?。?、支原體關節炎、放線菌性胸膜肺炎、密螺旋體性痢疾、回腸炎、結腸炎、水腫病等。延胡索酸泰妙菌素是一種安全有效的新型獸藥，具有廣闊的應用前景。2－二乙氨基乙硫醇作為延胡索酸泰妙菌素生產的關鍵中間體在生產中有很大的需求量，但其含量的檢測方法在國家標準中利用2－二乙氨基乙硫醇在鹽酸溶液中被碘氧化成相應的二硫化物［1］，進行滴定分析，該方法檢測受操作、試劑等因素影響，重現性較差。其它檢測方法未見報道，本文旨在建立氣相色譜測定2－二乙氨基乙硫醇含量的方法。

1 儀器與試劑

島津GC－2014氣相色譜儀，日本島津；2－二乙氨基乙硫醇（保定加合精細化工有限公司）；微量進樣器、濾紙、燒杯等。

2 方法

2.1 色譜條件 毛細管色譜柱（型號：DB－624，規格：30 m×0.53 mm×30 μm）；氫火焰離子檢測器；載氣高純氮氣；分流進樣，分流比25∶1；進樣口溫度260℃；檢測器溫度：260℃；設置柱溫箱溫度為80℃保留4.00 min，以8.00℃／min的速度將溫度升高至160℃保留2.00 min，再以30.00℃／min的速度將溫度升高至250℃保留12.00 min。柱流量：20.00 mL／min；吹掃流量：3.0 mL／min；附加流量控制：30.00 mL／min。進樣量0.2 μL，按面積歸一化法進行計算。

2.2 系統適用性試驗 取供試品2－二乙氨基乙硫醇0.2 μL注入氣相色譜儀，連續進樣6次，記錄色譜圖。控制標準：連讀6次進樣所得圖譜中2－二乙氨基乙硫醇含量RSD≤10.0%，理論塔板數（N）≥2000，與相鄰的峰分離度（R）≥2.0，拖尾因子（T）≤2.0。

2.3 線性關系考察 參考文獻方法［3］，分別精密稱取2－二乙氨基乙硫醇10、20、30、40、50、60 g置于100 mL容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，制成濃度分別為0.1、0.2、0.3、0.4、0.5、0.6 g／mL的溶液，分別吸取上述溶液0.2 μL注入氣相色譜儀，記錄峰面積，以濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標繪制標準曲線。相關系數R2應大于0.99。

2.4 精密度

2.4.1 重復性 參考文獻方法［4］，取供試品2－二乙氨基乙硫醇0.2 μL注入氣相色譜儀，連續進樣6次，記錄色譜圖，然后計算6次測試的2－二乙氨基乙硫醇含量的相對標準偏差應不大于2.0%。

2.4.2 中間精密度 取供試品2－二乙氨基乙硫醇0.2 μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。由不同分析人員不同測定日期依法測定。不同人員不同分析日期2－二乙氨基乙硫醇含量結果的相對標準偏差應不大于2.0%。

2.5 檢測限與定量限

2.5.1 空白 不進樣品，僅記錄圖譜。

2.5.2 對照品溶液的制備 取2－二乙氨基乙硫醇和純化水按照1∶1比例混勻，作為對照品溶液。

2.5.3 供試品溶液的制備 將上述對照品溶液依次吸取2.0 mL、0.4 mL、80 μL、20 μL、10 μL、5 μL至10 mL容量瓶中，用純化水定容，分別標記為Y1、Y2、Y3、Y4、Y5、Y6。

2.5.4 檢測限與定量限測定 取供試品溶液0.2 μL注入氣相色譜儀，記錄空白、供試品溶液色譜圖。計算供試品溶液中2－二乙氨基乙硫醇信號響應值與空白溶液信號響應值的比值。以信噪比為10∶1時的供試品溶液濃度即為定量限；以信噪比為3∶1時的供試品溶液濃度即為檢測限［2］。

2.6 耐用性 調整檢測器、進樣口、色譜柱的溫度分別上下浮動5℃，穩定后取供試品2－二乙氨基乙硫醇注入氣相色譜儀，記錄色譜圖，計算2－二乙氨基乙硫醇含量。相對標準偏差應不大于2.0%。

3 結果與分析

3.1 系統適用性試驗 按2.2項下測定的理論塔板、分離度、拖尾因子均在控制范圍內，供試品連續6次測定含量的RSD值為0.26%（表1）。

表1 系統適用性試驗數據統計

3.2 線性關系考察 按照2.3繪制標準曲線（圖1），線性回歸方程為Y＝2.0×107X－3.1×105，相關系數R2＝0.9981，即在0.1～0.6 g／mL范圍內的線性關系良好。

圖1 線性曲線

3.3 精密度

3.3.1 重復性 連續6次測試的2－二乙氨基乙硫醇含量的相對標準偏差為0.30%，不大于2.0%。結果如表2，方法精密度良好。

3.3.2 中間精密度 由不同分析人員不同分析時間測定的2－二乙氨基乙硫醇含量的相對標準偏差為0.29%，結果如表3。

表2 重復性測試結果

表3 中間精密度測試結果

3.4 檢測限與定量限 依據2.5.1～2.5.4測定結果信噪比為3∶1時2－二乙氨基乙硫醇供試品溶液的濃度為0.05%，即為檢測限；信噪比為10∶1時2－二乙氨基乙硫醇供試品溶液的濃度為0.1%，即為定量限（圖2）。

圖2 氣相色譜圖

3.5 耐用性考察 調整色譜條件中的柱溫，分別設置為75、80、85℃；調整檢測器的溫度分別設置為255、260、265℃；進樣口溫度分別設置為255、260、265℃。計算不同溫度條件下的相對標準偏差均不大于2.0%，結果見表4。

表4 耐用性考察結果

調整條件 溫度設置／℃ 1 2 3 平均值／% RSD／%檢測器溫度255 97.24 97.39 97.13 97.3 260 97.73 97.70 97.76 97.7 265 97.41 98.00 97.01 97.5 0.21

4 討論與小結

硫醇因具有極不愉快的惡臭而著稱，空氣中含有極微量的乙硫醇就可以嗅出其氣味［5］。本文用氣相色譜法測定2－二乙氨基乙硫醇含量，能有效避免供試品對檢測環境的影響。試驗中采用程序升溫［6］有效的減少了供試品的拖尾和擴展，起始溫度80℃保留4.00 min，以8.00℃／min的速度將溫度升高至160℃保留2.00 min，再以30.00℃／min的速度將溫度升高至250℃保留12.00 min，這種多階線性升溫，同時分流進樣減少各雜質峰和主峰的拖尾及其相互間的重疊。采用分流進樣，當樣品注入分流進樣口以后，僅有極少部分樣品進入毛細管柱，其余絕大部分樣品隨載氣由分流氣體出口逸出放空。分析時分流比為25∶1（參照文獻［7］分流比范圍為10∶1～100∶1），可避免毛細管柱的超載，保持高柱效。

目前為止，采用氣相法測定2－二乙氨基乙硫醇含量未見相關文獻報道。本文采用毛細管程序升溫氣相色譜法測定2－二乙氨基乙硫醇含量分離效果良好；定量準確，檢測限為0.05%；線性考察回歸方程為為Y＝2.0×107X－3.1×105，相關系數R2＝0.9981，即在0.1～0.6 g／mL范圍內的線性關系良好；重復性和中間精密度均不大于2.0%；耐用性考察結果均符合要求。得到了滿意的分析結果，可用于2－二乙氨基乙硫醇的含量測定。

［1］GJB 1747－93.2－二乙氨基乙硫醇規范［S］.

［2］中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典二○一○年版（一部）［S］.

［3］藥品GMP指南／國家食品藥品監督管理局藥品認證管理中心.質量控制實驗室與物料系統［M］.北京：中國醫藥科技出版社，2011，8.

［4］韓 立，班付國，周紅霞，等.高效液相色譜法測定穿心蓮注射液的含量［J］.中國獸藥雜志，2014，48（5）：43－46.

［5］王春玉，段新峰，陳 娜.二乙氨基乙硫醇的合成［J］.河北化工，2009，32（9）：48－49，67.

［6］劉 珍.化驗員讀本：下冊［M］.北京：化學工業出版社，2010.

［7］夏玉宇.化驗員實用手冊：第二版［M］.北京：化學工業出版社，2010.

（編 輯：陳 希）

Gas Chromatography for Determining the Content of 2－diethylaminoethanethiol

ZHANG Jin－xia，GUO Qiang－gong，BAO Jie－hua?，ZHANG ping，MA Xiao－li
（WuHan Chopper Biological Co.，Ltd.，Wuhan430070，China）

Establish a method for determining the content of 2－diethylaminoethanethiol by gas chromatography.Hydrogen flame ion detector，shunt sample，diversion ratio was 25∶1，set temperature programmed，calculated by area normalization method.The Linesr range of 2－diethylaminoethanethiol was 0.1～0.6 g／mL，the concentration has a good linear relationship within the scope，the equation wasY＝2.0×107X－3.1×105，the correlation coefficientR2＝0.9981，precision test repeatabilityRSDwas 0.03%，intermediate precisionRSDwas 0.30%.This method is simple，accurate，with good reproducibility，it can be used for 2－diethylaminoethanethiol content determination.

2－diethylaminoethanethiol；capillary column；gas chromatography；temperature programmed

2014－10－24

A

1002－1280（2015）01－0037－04

S859.796

張金霞，從事抗生素生產原料檢驗工作。

包潔華。E－mail：qcbjh＠tairuiworld.com