面制食品中十二烷基苯磺酸鈉的測(cè)定

摘要 目的：建立測(cè)定面制食品中十二烷基苯磺酸鈉的方法。方法：采用高效液相色譜聯(lián)合熒光檢測(cè)器測(cè)定面制食品中線性十二烷基苯磺酸鈉的含量，色譜柱：Synergi polar-RP （250mm×4.6mm，4μm）；流動(dòng)相：甲醇+乙酸銨溶液=75+25（v/v）；流速：1.0ml·min-1；柱溫：室溫；進(jìn)樣量：10μL；Gain（增益）：1；激發(fā)波長(zhǎng)：EX=230nm；發(fā)射波長(zhǎng)：EM=290nm。結(jié)果：線性十二烷基苯磺酸鈉在濃度為0.2～10.0μg/mL范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，r=1.0000；平均回收率為94.3%（n=9），RSD=1.2%。結(jié)論：所建立高效液相色譜-熒光檢測(cè)器法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可用于檢測(cè)各種面制食品中的十二烷基苯磺酸鈉含量。

關(guān)鍵詞：面制食品；十二烷基苯磺酸鈉；高效液相色譜-熒光檢測(cè)器

中圖分類號(hào)： R155 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-098X（2015）04（a）-0000-00

非法添加洗衣粉之所以能讓濕面團(tuán)發(fā)泡，是其主要成分陰離子表面活性劑-十二烷基苯磺酸鈉在起作用。表面活性劑有很強(qiáng)的起泡能力，經(jīng)常被用作發(fā)泡劑。而市場(chǎng)上洗衣粉中的陰離子型表面活性劑均以十二烷基苯磺酸鈉為主。

我國(guó)目前還沒(méi)有檢測(cè)食品或食品添加劑中十二烷基苯磺酸鈉的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，更沒(méi)有專門(mén)檢測(cè)面制食品中十二烷基苯磺酸鈉的標(biāo)準(zhǔn)。甘肅省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)中心檢測(cè)是參照國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《水質(zhì)陰離子表面活性劑的測(cè)定 亞甲藍(lán)分光光度法》和新出臺(tái)的甘肅省地方標(biāo)準(zhǔn)《面制品中十二烷基苯磺酸鈉含量測(cè)定方法 亞甲藍(lán)分光光度法》進(jìn)行的測(cè)定。但有文獻(xiàn)顯示，用該方法測(cè)定十二烷基苯磺酸鈉，當(dāng)存在糖精鈉、香蘭素時(shí)會(huì)干擾測(cè)定結(jié)果，產(chǎn)生假陽(yáng)性。而很多面制食品中多含有食品添加劑糖精鈉和香蘭素成分。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用亞甲藍(lán)分光光度法對(duì)十二烷基苯磺酸鈉和糖精鈉進(jìn)行前處理獲得的亞甲藍(lán)衍生液，都顯示光吸收陽(yáng)性，不易區(qū)分開(kāi)來(lái)。導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確，容易引起誤判。

十二烷基苯磺酸鈉具有肝毒性，過(guò)量攝入十二烷基苯磺酸鈉對(duì)人體皮膚、肝臟有損害作用，一旦進(jìn)入體內(nèi)，肝臟線粒體會(huì)受到影響，血清中鈣離子濃度下降，機(jī)體出現(xiàn)酸中毒，嚴(yán)重?fù)p害人民群眾身體健康。

十二烷基苯磺酸鈉含有一個(gè)芳香環(huán)，具有共軛雙鍵，當(dāng)吸收紫外光后，非定域π電子受到激發(fā)，由基態(tài)躍遷到第一電子激發(fā)態(tài)，當(dāng)受激發(fā)電子很快返回基態(tài)時(shí)發(fā)出熒光，故可采用高靈敏度、高選擇性的熒光檢測(cè)器測(cè)定，同時(shí)，由于HPLC選用具有高效分離能力的色譜柱，使方法的選擇性更好。

1、收集典型樣品

為確保線性十二烷基笨磺酸鈉測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)的廣泛使用性，大量收集了具有代表性的面制食品：饅頭、花卷、蛋糕、面包、油條、麻花等種類的樣品。

2、試樣制備

2.1 試料制備

取試樣適量（油炸類、烤制類除去外皮），切成薄片，置電熱恒溫干燥箱中，80℃烘干，研細(xì)備用。

2.2 供試液的制備

視十二烷基笨磺酸鈉含量而定，稱取試料細(xì)粉0.1～1.0g（準(zhǔn)確至0.001g），置100mL容量瓶中，加50%乙醇溶液（v/v）適量，再加乙酸鋅溶液（1mol/L）1.0mL和亞鐵氰化鉀溶液（10.6%）1.0mL，超聲處理（功率250W，頻率33kHz）10min，取出，置恒溫水浴振蕩器中，于50℃恒溫震蕩45min，取出，放冷。加50%乙醇溶液（v/v）定容至刻度，混勻。

3 儀器分析條件

通過(guò)大量查詢文獻(xiàn)確定了激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)；經(jīng)過(guò)對(duì)流動(dòng)相、色譜柱、等各種液相色譜條件的試驗(yàn)，得到以下最佳液相色譜條件：

a）色譜柱：Synergi polar-RP（極性端基封尾的醚連接苯基相鍵合硅膠為填充劑），250×4.6mm，4μm；

b） 流動(dòng)相：甲醇+乙酸銨溶液（100mmol/L，冰乙酸調(diào)節(jié)pH至3.4）=75+25（v/v） ；

c） 流速：1.0mL/min；

d） 柱溫：室溫；

e） 進(jìn)樣量：10μL；

f） gain（增益）：1；

g） 激發(fā)波長(zhǎng)：EX=230nm； 發(fā)射波長(zhǎng)：EM=290nm。

5 線性范圍

取濃度為0.2μg/mL、0.5μg/mL、1.0μg/mL、5.0μg/mL、10.0μg/mL分別進(jìn)行HPLC測(cè)定，以峰面積為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線線性方程：

6 方法檢出限（LOD）

根據(jù)GB/T 5009.1-2003（附錄A中A.2.1 ）計(jì)算：

最低檢出限為0.5mg/kg。

方法檢出限

7 方法的定量限（LQD）

根據(jù)檢出限算出方法的定量限（S/N=10），根據(jù)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)和實(shí)驗(yàn)室間驗(yàn)證結(jié)果，方法的定量限為：0.2μg/mL。

8 方法的準(zhǔn)確度和精密度

8.1 準(zhǔn)確度

按照上述方法，選擇已知含量的自制試料，分別加入三個(gè)水平的線性十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（定量限、標(biāo)準(zhǔn)曲線中間濃度及標(biāo)準(zhǔn)曲線上限。），按照已確定的供試液處理方法及液相色譜條件，對(duì)該方法的準(zhǔn)確度進(jìn)行考察，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得平均回收率為94.3%，RSD為1.2%，結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性好，可準(zhǔn)確定量試樣中的十二烷基苯磺酸鈉。

8.2 精密度

按照上述檢驗(yàn)方法，取線性十二烷基苯磺酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液（15.0μg/mL）重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，其相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.2%。

9 討論

9.1 同時(shí)串聯(lián)高效液相色譜-熒光檢測(cè)器和二極管陣列檢測(cè)器進(jìn)行樣品分析結(jié)果表明，熒光檢測(cè)器具有更高的靈敏度，在0.2～10.0μg/mL濃度范圍內(nèi)，二極管陣列檢測(cè)器在該濃度范圍內(nèi)無(wú)峰值檢出。

9.2 SDBS易溶于熱醇和水，試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)SDBS在熱乙醇中溶解速率明顯高于在熱甲醇和水中，故選擇提取液為乙醇：水=1：1。

9.3 以不同比例的甲醇-乙酸銨溶液、乙腈-乙酸銨溶液作為流動(dòng)相做了實(shí)驗(yàn)比較，結(jié)果表明，采用甲醇-乙酸銨溶液（75：25）作為流動(dòng)相對(duì)樣品分離效果好，峰形對(duì)稱，保留時(shí)間適宜，雜質(zhì)峰達(dá)到基線分離，陰性無(wú)干擾，因此，本文采用甲醇-乙酸銨溶液（75：25）作為流動(dòng)相；因十二烷基笨磺酸鈉分子中含有芳香環(huán)，對(duì)比C18色譜柱和苯基柱，苯基柱分離效果更好、柱效更高。

9.4 跟據(jù)面制食品制作的實(shí)際過(guò)程，自己制作各種面制食品，發(fā)現(xiàn)檢出線性十二烷基苯磺酸鈉的樣品并非都為人為添加，實(shí)際制作過(guò)程中的各種器皿經(jīng)過(guò)洗滌產(chǎn)品洗凈后，在未經(jīng)大量水的反復(fù)沖洗情況下，均可能由于洗滌產(chǎn)品的殘留而引入線性十二烷基苯磺酸鈉。

10、參考文獻(xiàn)

[1] 肖曉華.反相液相色譜法分離直鏈烷基苯磺酸鈉同系物和異構(gòu)體. 色譜，2004， 1： 61-64.

[2] DB62/T 1762-2009. 面制品中十二烷基苯磺酸鈉含量測(cè)定方法 亞甲藍(lán)分光光度法.

[3] 朱公建等. 面制食品中十二烷基苯磺酸鈉的測(cè)定.衛(wèi)生職業(yè)教育，2010，07：91-92.

[4] 賈松濤等. SPE-HPLC同時(shí)測(cè)定饅頭中的4種直鏈烷基苯磺酸鈉. 光譜實(shí)驗(yàn)室， 2011，28（5）：2411-2415.

[5] CJ/T 51-2004. 城市污水水質(zhì)檢驗(yàn)方法標(biāo)準(zhǔn)