子宮內膜樣腺癌組織FHIT與Survivin蛋白表達及意義

張娜，項鋒鋼

（1 青島大學醫學院病理學教研室，山東 青島 266021； 2 中國人民解放軍第148醫院婦產科； 3 青島大學附屬醫院病理科）

子宮內膜癌是女性生殖系統常見的三大惡性腫瘤之一，占女性生殖系統惡性腫瘤的20%～30%，其中以起源于子宮內膜腺體的腺癌（子宮內膜樣腺癌）最常見。近年來子宮內膜癌的發病率呈上升趨勢，其發病機制目前仍不十分明了。研究原癌基因的激活、抑癌基因的失活是目前腫瘤研究的熱點。本實驗通過免疫組化SP法檢測子宮內膜樣腺癌及非典型性增生子宮內膜、單純性增生子宮內膜、正常子宮內膜組織中FHIT蛋白、Survivin蛋白的表達情況，探討它們與子宮內膜樣腺癌的臨床病理參數之間的關系。

1 材料與方法

1.1 材料及其來源

2008年1月—2011年10月，中國人民解放軍第148醫院手術后經病理確診的子宮內膜樣腺癌組織60例、不典型性增生子宮內膜20例、單純性增生子宮內膜20例，以及因宮頸病變及子宮脫垂等行子宮切除的正常子宮內膜20例。所選病例臨床資料均完整，病人術前均未接受化學藥物、放射治療或相關激素治療。子宮內膜樣腺癌病人60例，年齡29～71歲，平均55.8歲。病理分化程度：G1級20例，G2級21例，G3級19例。所有病例均行手術治療，其手術病理分期為Ⅰ期21例，Ⅱ期19例，Ⅲ期20例。其中淋巴結有轉移者19例。

1.2 試劑與方法

免疫組化染色采用SP法。兔抗人FHIT多克隆抗體購自北京中杉金橋生物技術有限公司，抗體工作濃度為1∶150。鼠抗人Survivin單克隆抗體（SD79）購自廣州深達生物制品技術有限公司，抗體工作濃度為1∶40，超敏SP廣譜免疫組化試劑盒、DAB酶底物顯色劑等均購自廣州深達生物制品技術有限公司。所有標本經40g／L中性甲醛固定，石蠟包埋，連續切片，厚度為4μm。按SP試劑盒說明書要求進行操作，在22℃室溫下孵育1h，采用pH值9.0的EDTA修復液進行高溫高壓修復后，采用SP法進行免疫組化染色。以已知陽性標本作為陽性對照，以正常羊血清代替一抗作為陰性對照。

1.3 結果判斷方法和標準

細胞漿或核內出現棕黃色顆粒即為FHIT蛋白、Survivin蛋白的陽性表達［1］。參照有關文獻采用半定量積分法判定結果。按照染色強度評分：0分（無色），1分（淺黃色），2分（棕黃色），3分（棕褐色）；按照陽性細胞數占百分比計分：以陽性細胞＜5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，51%～75%為3分，＞75%為4分；以兩者積分的乘積表達陽性等級：0～4分為陰性（－），5～8分為弱陽性（＋），9～12分為強陽性（）［1－2］。

1.4 統計學處理

采用SPSS 19.0軟件系統進行統計處理，以秩和檢驗對有序資料進行分析，相關指標應用Spearman等級相關分析。以P＜0.05為有統計學意義。

2 結 果

2.1 不同子宮內膜組織FHIT蛋白與Survivin蛋白表達

FHIT蛋白的陽性表達率在子宮內膜樣腺癌、不典型性增生子宮內膜、單純性增生子宮內膜、正常子宮內膜組織中分別為 51.7%、85.0%、90.0% 和100.0%，與上述其他3種類型子宮內膜組織相比，癌組織中的FHIT蛋白陽性表達率明顯降低，差異具有顯著性（Hc＝19.048，P＜0.001）。子宮內膜樣腺癌、不典型性增生子宮內膜、單純性增生子宮內膜、正常子宮內膜組織Survivin蛋白的陽性表達率分別為73.3%、70.0%、35.0%、15.0%，與上述其他3種類型子宮內膜組織相比，癌組織中的Survivin蛋白陽性表達率明顯升高，差異具有統計學意義（Hc＝28.241，P＜0.001）。見表1。

2.2 FHIT蛋白表達與子宮內膜樣腺癌病理參數的關系

本文研究結果顯示，FHIT蛋白陽性表達率隨著腫瘤分化程度的降低、臨床病理分期的進展、肌層侵犯深度的增加以及淋巴結轉移的出現而明顯降低（Hc＝18.435～24.443，P＜0.01），FHIT蛋白陽性表達率與病人的年齡、是否絕經及大體類型均無相關性（Hc＝0.494～1.878，P＞0.05）。見表2。

表1 不同類型子宮內膜組織中FHIT與Survivin蛋白的表達（例）

表2 FHIT蛋白表達與子宮內膜樣腺癌病理參數關系（例）

2.3 Survivin蛋白表達與子宮內膜樣腺癌病理參數關系

本研究結果顯示，子宮內膜樣腺癌組織中Survivin蛋白的陽性表達率隨著腫瘤分化程度的降低、臨床病理分期的增加、肌層浸潤深度的加深以及淋巴結的轉移而明顯增高（Hc＝11.114～41.560，P＜0.01），Survivin蛋白的陽性表達率與病人的年齡、是否絕經及大體類型均無相關性（Hc＝0.264～0.438，P＞0.05）。見表3。

2.4 子宮內膜樣腺癌組織FHIT蛋白與Survivin蛋白表達相關性

子宮內膜樣腺癌60例中，FHIT蛋白陽性表達31例，其中Survivin蛋白陽性表達18例，陰性表達13例；FHIT蛋白陰性表達29例，其中Survivin蛋白陰性表達3例，陽性表達26例；二者表達呈負相關（r＝－0.336，P＜0.01）。

表3 Survivin蛋白表達與子宮內膜樣腺癌病理參數關系

3 討 論

3.1 FHIT蛋白在子宮內膜樣腺癌組織表達及其臨床意義

FHIT是近期新發現的抑癌基因，它與多種惡性腫瘤的發生發展存在著密切的關系［3］。因其表現出許多腫瘤抑制基因的特點，故被歸為侯選抑癌基因［4］。ZANDI等［5］研究表明，FHIT 在子宮內膜癌組織中存在表達降低或缺失現象，與其發生、發展關系密切，FHIT蛋白的陽性表達率隨著由正常子宮內膜至不典型性增生子宮內膜，再到子宮內膜腺癌的演變過程呈逐漸下降趨勢。但也有學者得出與其不一致的結論，認為FHIT基因的異常與子宮內膜癌的組織學分級關系不大［6］。由此可見，FHIT蛋白表達與子宮內膜癌的相關病理參數之間尚未有確切關系，還有待進一步研究。

本文研究結果表明，與正常子宮內膜、單純性增生子宮內膜及不典型性增生子宮內膜相比較，子宮內膜樣腺癌組織中FHIT蛋白表達明顯下調，從而提示FHIT蛋白基因表達下調或缺失可能參與了子宮內膜樣腺癌的發生過程。另外本研究結果顯示，子宮內膜樣腺癌組織中FHIT蛋白的陽性表達率隨著腫瘤分化程度的降低、臨床病理分期的增加、肌層浸潤深度的加深以及淋巴結的轉移而明顯降低，提示FHIT蛋白表達下調或缺失與子宮內膜樣腺癌的發展及侵襲轉移有關。

3.2 Survivin蛋白在子宮內膜樣腺癌組織表達及其臨床意義

Survivin基因是AMBROSINI等于1997年在人類基因組的雜交篩選中分離并克隆出的，是目前發現的作用最強的凋亡抑制因子［7－8］。Survivin基因編碼的蛋白（Survivin蛋白）是目前發現的相對分子質量最小也是抗細胞凋亡作用最強的凋亡抑制蛋白（IAP），它與惡性腫瘤的發生、發展及預后均密切相關，是近年來研究的熱點［9］。

本研究結果顯示，Survivin蛋白在正常子宮內膜、單純性增生子宮內膜組織中均低表達，而在不典型性增生子宮內膜及子宮內膜樣腺癌組織中則存在高表達現象，提示Survivin在子宮內膜樣腺癌的發生中發揮一定作用，這與其他研究所得出的結論相一致［10］。Survivin蛋白在子宮內膜不典型性增生中的陽性表達率較高（70.0%），提示Survivin可能在子宮內膜樣腺癌發生過程中是一個早期事件。因此，可能對子宮內膜樣腺癌的早期診斷有一定的指導意義。另外，本研究結果顯示，子宮內膜樣腺癌組織中Survivin蛋白陽性表達率隨著腫瘤分化程度的降低、臨床病理分期的增加、肌層浸潤深度的加深以及淋巴結的轉移而增高，提示Survivin蛋白表達增加與子宮內膜樣腺癌發展及侵襲轉移有關。

3.3 子宮內膜樣腺癌組織中聯合檢測FHIT蛋白和Survivin蛋白的意義

本文的研究結果顯示，分化越差、分期越晚、肌層浸潤越深并伴有淋巴結轉移的癌組織中既會出現Survivin蛋白過表達，又存在FHIT蛋白表達降低，其二者表達呈顯著負相關。由此可知，癌基因的激活和抑癌基因的失活同時在子宮內膜樣腺癌的發生和發展過程中發揮作用。因此，聯合檢測癌基因（如Survivin蛋白）的激活和抑癌基因（如FHIT蛋白）的失活，可能對子宮內膜癌的早期診斷有一定的價值，并可能對正確評估病情及制定最佳治療方案具有積極的意義。

［1］劉玉琴，高英敏，王秀華.子宮內膜癌中fhit、survivin的表達及臨床意義［J］.現代婦產科進展，2004，13（6）：423－425.

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［4］PALUMBO E，TOSONI E，MATRICARDI L，et al.Genetic instability of the tumor suppressor gene FHIT in normal human cells［J］.Genes Chromosomes Cancer，2013，52（9）：832－844.

［5］ZANDI R，XU K，POULSEN H S，et al.The effect of Adenovirus－Mediated gene expression of FHIT in small cell lung cancer cells［J］.Cancer Invest，2011，29（10）：683－691.

［6］趙文科，牛兆山.子宮內膜腺癌組織中FHIT蛋白的表達及其意義［J］.青島大學醫學院學報，2007，43（3）：250－252.

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［10］王長林，吳彬，段承志，等.Survivin和bFGF在子宮內膜樣腺癌中的表達及其意義［J］.泰山醫學院學報，2010，31（12）：914－917.