復(fù)方醋酸棉酚片溶出度測定

劉增平，黃 潔

（1.陜西省延安市食品藥品檢驗(yàn)所，陜西 延安 716000； 2.陜西省西安市食品藥品檢驗(yàn)所，陜西 西安 710054）

醋酸棉酚可抑制子宮內(nèi)膜、卵巢、肌層的甾體激素受體，可減少出血量，使子宮肌層和內(nèi)膜變薄［1］。復(fù)方醋酸棉酚片的藥物成分為醋酸棉酚、氯化鉀、維生素B1、維生素B6。其中，棉酚與復(fù)方醋酸棉酚片藥理作用相同，可治療女性某些激素依賴性疾病，如功能性子宮出血、子宮肌瘤合并月經(jīng)過多、子宮內(nèi)膜異位癥，以及由此引起的痛經(jīng)、經(jīng)血多、經(jīng)期長、經(jīng)期乳房脹痛、腹痛等癥［2］。筆者對(duì)復(fù)方醋酸棉酚片的溶出度進(jìn)行了研究，篩選出了最佳溶出度試驗(yàn)方法。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

Evolution 300型紫外 -可見分光光度計(jì)（ThermoFisher公司）；RCZ-8M型溶出度測定儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）。醋酸棉酚對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)為111517）；磷酸鈉、聚山梨酯為分析純，水為蒸餾水。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶出介質(zhì)及溶出方法考察

溶出介質(zhì)及溶出方法確定：分別考察復(fù)方醋酸棉酚片在溶出介質(zhì)為磷酸鈉緩沖液（pH＝8.0）1 000 mL及0.3%聚山梨酯的磷酸鈉緩沖液（pH＝8.0）1 000 mL中的溶出度，確定溶出介質(zhì)；分別采用轉(zhuǎn)籃法（100 r／min）及槳法（75 r／min）試驗(yàn)，確定溶出方法。在上述2種介質(zhì)中分別于30，45，60 min取樣測定，結(jié)果見表1。故可確定，介質(zhì)選用0.3%聚山梨酯的磷酸鈉緩沖液（pH＝8.0）1 000 mL，采用槳法為測定條件。

表1 轉(zhuǎn)籃法和槳法不同介質(zhì)溶出度測定結(jié)果比較（n＝3）

轉(zhuǎn)速選擇：取本品，分別在 50，75，100 r／min轉(zhuǎn)速下進(jìn)行溶出度試驗(yàn)，結(jié)果見表2。可見，在轉(zhuǎn)速為75，100 r／min條件下，溶出度測定結(jié)果差異不大，均在標(biāo)示量的85%以上，而50 r／min測定結(jié)果偏低，故選擇轉(zhuǎn)速為75 r／min。

表2 槳法不同轉(zhuǎn)速溶出度測定結(jié)果（%）

2.2 溶出度測定方法驗(yàn)證

輔料干擾試驗(yàn)：按處方比例，取復(fù)方醋酸棉酚片輔料適量，用溶出介質(zhì)溶解制成空白輔料溶液。另取醋酸棉酚原料適量，用溶出介質(zhì)制成含400 μg／mL醋酸棉酚的溶液。精密量取上述2種溶液各5 mL，置100 mL容量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照溶液。取上述2種溶液，在390 nm波長處分別測定吸光度，結(jié)果見表3。可見，輔料對(duì)樣品溶出度測定影響為0.2%，說明輔料對(duì)本品用分光光度法測定溶出度無干擾。

表3 復(fù)方醋酸棉酚片溶出度測定輔料干擾試驗(yàn)結(jié)果

線性關(guān)系考察：取醋酸棉酚對(duì)照品5.10 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，用溶出介質(zhì)溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取 1，2，3，4，5 mL分別置 100 mL容量瓶中，加溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，在390 nm波長處測定吸光度。以質(zhì)量濃度（X，μg／mL）為橫坐標(biāo)、吸光度（Y）為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程 Y ＝0.021 6 X-0.005 4（r＝ 1）。結(jié)果表明，復(fù)方醋酸棉酚片質(zhì)量濃度在 5.10～25.50 μg／mL范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

加樣回收試驗(yàn)：按處方量稱取各輔料成分（約稱取50片用量的輔料），混勻備用。分別精密稱取醋酸棉酚對(duì)照品約18，24，30 mg各3份，分別置100 mL容量瓶中，稱取相當(dāng)量的輔料混合物置上述容量瓶中，用溶出介質(zhì)溶解并稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 mL，置100 mL容量瓶中，用溶出介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。每個(gè)質(zhì)量濃度平行配制3份。另精密稱取醋酸棉酚對(duì)照品約24 mg，同法配制，在390 nm波長處測定吸光度，計(jì)算回收率。結(jié)果見表4。

表4 復(fù)方醋酸棉酚片溶出度加樣回收試驗(yàn)結(jié)果（n＝9）

精密度試驗(yàn)：取加樣回收試驗(yàn)項(xiàng)下溶液，每個(gè)質(zhì)量濃度各1份，平行測定5次，計(jì)算精密度，結(jié)果見表5。結(jié)果的 RSD均小于1%（n＝5），表明儀器精密度良好。

表5 復(fù)方醋酸棉酚片溶出度精密度試驗(yàn)結(jié)果（n＝5）

穩(wěn)定性試驗(yàn)：取回收率試驗(yàn)項(xiàng)下的供試品溶液1份，分別放置 0，1，2，3，4，5 h 后測定吸光度。結(jié)果測得吸光度值分別為0.339，0.340，0.339，0.340，0.339，0.341，平均為 0.340，RSD 為0.10%（n＝6），表明供試品溶液在5 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.3 樣品溶出度均一性測定

按上述溶出度測定方法，分別于 10，20，30，45，60 min 時(shí)進(jìn)樣測定。結(jié)果3批樣品及被仿制品溶出度均一性良好，在45 min的溶出量均在標(biāo)示量的70%以上。考慮到本品的制劑工藝難度和大生產(chǎn)時(shí)的實(shí)際情況，將復(fù)方醋酸棉酚片溶出度的取樣時(shí)間定為45 min，限度為標(biāo)示量的70%。

2.4 樣品溶出度測定結(jié)果

取本品，以0.3%聚山梨酯的磷酸鈉緩沖液（pH＝8.0）1000 mL為溶出介質(zhì)，轉(zhuǎn)速為75 r／min，依法操作，于45 min時(shí)，取溶液，濾過，取續(xù)濾液作為供試品溶液。另取醋酸棉酚對(duì)照品20 mg，精密稱定，置100 mL容量瓶中，用上述介質(zhì)稀釋至刻度，精密量取10 mL，置100 mL容量瓶中，用上述介質(zhì)稀釋至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。取上述2種溶液，在390 nm波長處測定吸光度，計(jì)算每片的溶出量。結(jié)果見表6。可見，本品3批樣品及被仿制品的溶出度均大于70%，符合規(guī)定。

表6 復(fù)方醋酸棉酚片溶出度測定結(jié)果（%）

3 討論

分光光度法測定復(fù)方醋酸棉酚片的溶出度，回收率高、準(zhǔn)確性好、精密度高、溶液穩(wěn)定性良好，質(zhì)量濃度在測定范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。考慮到溶出度為限度檢查，且分光光度法操作簡便、檢測靈敏，故確定采用分光光度法測定本品的溶出度。

參考文獻(xiàn)：

［1］孟 琳.去氧孕烯炔雌醇治療功能失調(diào)性子宮出血的臨床觀察［J］.安徽醫(yī)藥，2007，11（4）：313.

［2］卞曉潔，丁 黎，勉強(qiáng)輝，等.復(fù)方醋酸棉酚片在女性健康志愿者體內(nèi)的生物等效性研究［J］.中國新藥雜志，2007，16（15）：1 221-1 225.