泛發性濕疹患者外周血淋巴細胞亞群的研究

韓 瑩 程 欣

泛發性濕疹患者外周血淋巴細胞亞群的研究

韓 瑩 程 欣

目的 探討泛發性濕疹患者的免疫功能變化。方法 應用流式細胞儀分析檢測200例泛發性濕疹患者(泛發性濕疹組)外周血中的淋巴細胞亞群, 并與200例正常人(正常組)進行比較。結果 與正常組相比泛發性濕疹組的CD3+T細胞降低, CD3+CD4+T細胞降低, CD3+CD8+T細胞升高, CD3-CD16+56+NK細胞降低, CD4+/CD8+降低, 差異有統計學意義(P＜0.05)。結論 免疫功能的紊亂是泛發性濕疹患者發病的一個重要機制, 在泛發性濕疹的發生、發展過程中可能起到重要的作用。

泛發性濕疹；淋巴細胞亞群；流式細胞分析法

泛發性濕疹是一種泛發或散發于全身多個部位的炎癥性、瘙癢性皮膚病, 具有皮膚多形性、瘙癢劇烈、滲出傾向、反復發作、難以治愈的臨床特點。泛發性濕疹病因不明, 一般認為是多種內外因素作用所致的遲發型變態反應。為了進一步探討泛發性濕疹發病與機體免疫功能的關系, 作者對200例泛發性濕疹患者的淋巴細胞亞群的狀態進行觀察, 分析結果如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 200例泛發性濕疹患者(泛發性濕疹組)均系2013年8月～ 2014年8月本院皮膚科確診病例, 其中男108例, 女92例, 年齡18～70歲, 平均年齡(47.82±21.00)歲。所有患者均無其他免疫系統及心血管系統疾病。檢測前1個月內未接受過任何免疫治療。正常組200例均為本院健康體檢者, 其中男105例, 女95例, 年齡22～70歲, 平均年齡(46.48±15.00)歲。兩組性別和年齡比較差異無統計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 主要試劑與儀器 美國Becton-Dickinson(BD)公司生產的Simultest IMK Lymphocytes Kit檢測試劑盒, 其組成Isotype Control(MouseIgG1/IgG2a)；CD3-FITC/CD19-PE；CD3-FITC/ CD4-PE；CD3-FITC/CD8-PE；CD3-FITC/CD16+CD56-PE；FACS Lysing Solution紅細胞裂解液。流式細胞儀由美國Becton-Dickinson(BD)公司生產, 型號為FACSCalibur型。

1.3 方法 流式細胞分析法：抽取靜脈血2 ml, 用20 IU/ml EDTA-K2抗凝, 取流式上樣管加熒光抗體20 μl與0.1 ml抗凝血混勻, 室溫避光反應20 min, 加10%溶血素混勻, 室溫避光反應10 min, 待管內液體透亮, 然后1500 r/min離心5 min, 棄上清, 后加入1 ml磷酸鹽緩沖液(PBS)混勻, 1500 r/min離心5 min, 棄上清, 然后加入0.5 ml PBS混勻, 制成單細胞懸液標本, 通過流式細胞儀對待測細胞進行檢測分析。

1.4 統計學方法 采用SPSS15.0統計學軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差( -x±s)表示, 采用t檢驗；計數資料采用χ2檢驗。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

泛發性濕疹組與正常組外周血淋巴細胞亞群檢測結果中, CD3+T細胞降低, CD3+CD4+T細胞降低, CD3+CD8+T細胞升高, CD3-CD16+56+NK細胞降低, CD4+/CD8+降低, 差異有統計學意義(P＜0.05), CD3-CD19+比較差異無統計學意義(P＞0.05)。見表1。

表1 兩組淋巴細胞亞群檢測結果比較( x-±s)

3 討論

濕疹的病因和發病機制復雜, 有研究表明免疫功能異常是其發病的重要環節［1,2］。本研究中顯示泛發性濕疹組與正常組相比較, CD3+CD4+T細胞降低, CD3-CD16+56+NK細胞降低, 說明泛發性濕疹患者T細胞、NK細胞功能發生紊亂, 與文獻相符［3］, 但本研究還顯示了CD3+CD8+T細胞升高, 可能因為CD3+CD8+抑制了細胞毒性T細胞殺傷功能,使機體處于免疫抑制狀態, 進而使機體逃避免疫監視, 因此CD3+CD8+升高可能是導致濕疹泛發的一個重要因素。CD4+/ CD8+比值體現T淋巴細胞各亞群之間相互制約, 相互協助,處于動態平衡, CD4+/CD8+比值降低進一步反映T淋巴細胞的功能紊亂狀態。

綜上所述, 在泛發性濕疹的發生、發展的過程中細胞免疫起到了重要的作用, 認為其細胞免疫功能、免疫調節可能受到一定影響, 致人體免疫失調, 可能是泛發性濕疹反復發作的一個重要的內因。

［1］ 周淑英, 劉玉峰, 夏汝山, 等.皮炎濕疹患者外周血單個核細胞分泌Th1/Th2細胞因子和水平檢測及意義.第四軍醫大學學報, 2001, 22(24):2266-2268.

［2］ 顧恒.特應性皮炎的免疫療法.國外醫學皮膚性病學分冊, 1999, 25(3):135-138.

［3］ 后桂榮, 曾抗, 周再高.濕疹患者T淋巴細胞亞群及自然殺傷細胞的檢測及意義.臨床皮膚科雜志, 2003, 32(9):522.

Research of lymphocyte subpopulation in peripheral blood of generalized eczema patients

HAN Ying，CHENG Xin.
Department of Dermatology， Shenyang City the Seventh People’s Hospital， Shenyang 110003， China

Objective To investigate changes of immunologic function in generalized eczema patients.Methods Lymphocyte subpopulation in peripheral blood of 200 generalized eczema patients (generalized eczema group) were detected by flow cytometry method, and they were compared with those in 200 normal people (normal group).Results Compared with the normal group, the generalized eczema group had decreased CD3+T cells, CD3+CD4+T cells, CD3-CD16+56+NK cells, CD4+/CD8+T cells, and increased CD3+CD8+T cells.The difference had statistical significance (P＜0.05).Conclusion Immune function disorder is one of the main mechanism of generalized eczema patients, and it acts with important effect in occurrence and progress of generalized eczema.

Generalized eczema; Lymphocyte subpopulation; Flow cytometry method

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.21.022

2015-01-28］

110003 沈陽市第七人民醫院皮膚科

程欣