肝硬化自發性細菌性腹膜炎患者前炎癥細胞因子的改變

陳玉軍 黃佩杰

肝硬化自發性細菌性腹膜炎患者前炎癥細胞因子的改變

陳玉軍 黃佩杰

目的 探討肝硬化自發性細菌性腹膜炎(SBP)患者和肝硬化伴無菌性腹水(SA)患者體內前炎癥細胞因子腫瘤壞死因子-α(TNF-α) 、白細胞介素-6(IL-6)的水平及改變的臨床意義。方法 采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測 188例肝炎肝硬化腹水患者［其中肝硬化伴有自發性細菌性腹膜炎(SBP組)78例, 肝硬化伴有無菌性腹水(SA組)110例］腹水、血液標本中TNF-α、IL-6水平, 同時應用鱟試劑三肽顯色基質偶氮法檢測標本內毒素(LPS)水平。同期20例健康體檢者作為健康對照組,并對三組LPS、TNF-α、IL-6水平進行比較。結果 SBP組、SA組血漿LPS、TNF-α、IL-6濃度均顯著高于健康對照組(P＜0.001)； SBP組腹水LPS、TNF-α、IL-6濃度均顯著高于SA組(P＜0.001)；肝硬化腹水患者血漿內毒素與TNF-α、IL-6水平呈正相關(P＜0.05)。結論 肝炎肝硬化腹水患者存在內毒素血癥, 肝炎肝硬化腹水患者TNF-α、IL-6水平升高與體內內毒素水平升高有關。

肝硬化；腹水；內毒素；腫瘤壞死因子-α；白細胞介素-6

細胞因子(cytokine, CK)水平對肝硬化患者病情預后起非常重要的作用［1-3］。本研究對肝硬化伴有SBP患者和肝硬化伴SA患者TNF-α、IL-6及與LPS的關系進行了試驗性探討,現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 188例肝炎肝硬化腹水患者, 均為2012年1月～2013年5月本院住院患者, 男104例, 女84例, 平均年齡(50.6±2.5)歲。其中肝硬化伴有自發性細菌性腹膜炎(spontaneous bacterial peritonitis , SBP)78例(SBP組), 肝硬化伴有無菌性腹水(sterile ascitic fluid , SA)110例(SA組)。其中肝硬化診斷標準按《2000年西安傳染病與寄生蟲病會議修訂的診斷標準》［4］。其中肝硬化伴自發性細菌性腹膜炎、肝硬化伴無菌性腹水診斷標準按2000年歐洲肝病年會共識文件制定的標準［5］。選取同期20例健康體檢者作為健康對照組。三組一般資料比較, 差異無統計學意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 生物化學數據的測定 標本的收集及檢測操作步驟嚴格按試劑盒說明進行。所有入選者于入院當日及1周后2次保留血漿標本, -85℃冷藏保存待測。所用檢測法及試劑為：TNF-α、IL-6測定采用雙抗體夾心ELISA, 試劑盒為雙抗體夾心酶聯免疫吸附法試劑盒(美國R&D公司) 。LPS測定采用鱟試劑三肽顯色基質偶氮法, 試劑盒為顯色基質偶氮法鱟試劑盒(上海市醫學化驗所)。

1.3 統計學方法 采用SPSS18.0統計學軟件進行統計分析。計量資料以均數±標準差( x-±s)表示, 兩組間比較采用t檢驗, 多組間比較采用方差分析；計數資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗；相關性采用Pearson相關分析。P＜0.05表示差異具有統計學意義。

2 結果

SBP組、SA組血漿中TNF-α、IL-6、LPS濃度均顯著高于健康對照組(P＜0.001)；且SBP組顯著高于SA組(P＜0.001)； SBP組腹水LPS、TNF-α、IL-6濃度均顯著高于SA組(P＜0.001)。肝硬化腹水患者血漿LPS與TNF-α、IL-6水平呈正相關(P＜0.05)。見表1。

表1 三組血漿、腹水中LPS、TNF-α、IL-6水平的變化( x-±s)

3 討論

細胞因子參與機體免疫反應進程, 明顯影響疾病的轉歸。TNF-α、IL-6作為非常重要的前炎癥細胞因子, 在推動疾病發生發展中起重要作用, 具體機制可能與其可觸發細胞因子網絡的級聯反應, 并與其他炎癥介質：如氧自由基、白三烯(LTs)、一氧化氮(NO)、血小板激活因子(PAF)等共同作用有關［6］。

本研究結果表明, 肝炎肝硬化腹水患者中：SBP患者血漿和腹水中TNF-α、IL-6水平最高, 高于SA患者；SA患者又高于健康人。與此前大多數文獻報道符合［7-9］。

Tiggelman等［10］體外實驗研究證明：血漿內毒素升高可導致血漿TNF-α、IL-6升高。Claudio等［2］研究證明：TNF-α、IL-6在肝硬化腹水嚴重并發癥形成過程中起主要作用。Bradham等［9］研究表明：TNF-α、IL-6在慢性肝病患者中顯著升高, TNF-α、IL-6升高可導致感染性休克等重癥并發癥, 顯著影響患者的預后。肝硬化腹水患者血漿及腹水中TNF-α、IL-6水平顯著升高的原因, 目前研究認為與內毒素血癥激活免疫細胞和肝臟功能下降對CK清除能力下降有關。監測肝炎肝硬化患者血漿和腹水TNF-α、IL-6水平, 有助于早期發現高危肝硬化腹水患者, 改善患者治療及預后。

本研究結果顯示患者血漿及腹水內毒素水平與血漿及腹水TNF-α、IL-6水平呈正相關, 與以上研究相符。盡可能地早期防治肝硬化腹水患者內毒素血癥可能明顯影響肝硬化腹水患者轉歸。

［1］ Lichtman SM.Bacterial translocation in humans.J Pediatr Gastroenterl Nutr, 2001, 33(1):1-10.

［2］ Claudio RR, Fatima G, Fernando D, et al.Expression of proinflammatory cytkines and their inhibitors during the course of spontaneous bacterial peritonitis.Dig Dis Sci, 2001, 46(8):1668-1676.

［3］ 趙龍鳳, 李紅, 韓德五.腸源性內毒素血癥與肝臟.世界華人消化雜志, 2000, 8(10):1145-1149.

［4］ 中華醫學會傳染病與寄生蟲病學分會, 肝病學分會.病毒性肝炎防治方案.肝臟, 2000, 5(4):257-263.

［5］ Antoni R, Guadalope G, Miquel N, et al.Diagnosis, treatment, and prophylaxis of spontaneous bacterial peritonitis: a consensus document.J Hepatol, 2000, 32(1):142-153.

［6］ Such J, Frances R, Perez-Mateo M.Nitric oxide in patients with cirrhosis and bacterial infections.Metab Brain Dis , 2002, 17(4): 303-309.

［7］ 王錦輝, 陳旻湖, 孫光裕, 等.肝硬化患者小腸細菌過度生長與內毒素血癥.中華內科雜志, 2002, 41(7):459-461.

［8］ 王雷, 任成山.內毒素與慢性肝病的關系研究進展.中華肝臟病雜志, 2003, 11(4):60-62.

［9］ Bradham CA, Plipe J, Manns MP, et al.Mechanisms of hepatic toxicity.TNF-α induced liver injury.Am J Physiol, 1998, 275(3Pt1):G387-G392.

［10］ Tiggelman AM, Boers W, Linthorst C, et al.Interleukin-6 production by liver fibroblasts in cuture.Evidence for a regulatory role of LPS, IL-1beta and TNF alpha.J Hepatol, 1995, 23(3):295-306.

Changes of pro-inflammatory cytokines in hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis patients

CHEN Yu-jun, HUNAG Pei-jie.Department of Gastroenterology, Henan Anyang City People’s Hosptial, Anyang 455000, China

Objective To investigate clinical significance of level changes of pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor-α (TNF-α) and interleukin-6 (IL-6) in hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis (SBP) patients and hepatic sclerosis complicated with sterile ascites (SA) patients.Methods Double antibody enzyme-linked immune sorbent assays (ELISA) was applied to detect levels of ascites, TNF-α and IL-6 in blood samples of 188 hepatic sclerosis patients.Among them there were 78 cases of hepatic sclerosis complicated with spontaneous bacterial peritonitis (SBP group) and 110 cases of hepatic sclerosis complicated with sterile ascites (SA group).Tachypleus amebocyte lysate tripeptide chromogenic substrate azo method was applied to detect endotoxin (LPS) levels.There were another healthy people at the same period as health control group.Comparisons were made on LPS, TNF-α, and IL-6 levels in the three groups.Results SBP group and SA group both had obviously higher levels of plasma LPS, TNF-α and IL-6 than the health control group (P＜0.001).SBP group had much higher levels of ascites LPS, TNF-α and IL-6 than SA group (P＜0.001).Plasma LPS in hepatic sclerosis ascites patients had positive correlation with TNF-α and IL-6 (P＜0.05).Conclusion Endotoxemia exists in hepatitis cirrhotic ascites patients.Increased TNF-α and IL-6 are related with increased endotoxin in hepatitis cirrhotic ascites patients.

Hepatic sclerosis; Ascites; Endotoxin; Tumor necrosis factor-α; Interleukin-6

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.24.010

2015-03-25］

455000 河南省安陽市人民醫院消化內科