嬰幼兒肺炎支原體檢測(cè)方法及其實(shí)用性探討

原 芳 韓曉娟

嬰幼兒肺炎支原體檢測(cè)方法及其實(shí)用性探討

原 芳 韓曉娟

目的 對(duì)于不同的患兒合理選擇不同原理的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法, 以提高肺炎支原體的檢出率。 方法 226例高度懷疑為肺炎支原體感染的患兒, 使用不同原理的三種方法進(jìn)行支原體檢測(cè)并對(duì)陽性率比較。結(jié)果 快速培養(yǎng)法優(yōu)于被動(dòng)凝集法和免疫金標(biāo)斑點(diǎn)法, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）, 被動(dòng)凝集法與免疫金標(biāo)斑點(diǎn)法比較, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 被動(dòng)凝集法適于早期篩查及治療效果的監(jiān)測(cè), 適于初篩實(shí)驗(yàn)。快速培養(yǎng)法聯(lián)合使用, 能互相彌補(bǔ)方法學(xué)原理的缺陷、提高肺炎支原體的檢出率。免疫金標(biāo)斑點(diǎn)法對(duì)于高度懷疑但在早期檢測(cè)中免疫球蛋白M（IgM）抗體陰性的可動(dòng)態(tài)觀察復(fù)查免疫球蛋白G（IgG）抗體, 減少漏查率。

肺炎支原體；快速培養(yǎng)法；被動(dòng)凝集法；免疫金標(biāo)斑點(diǎn)法

肺炎支原體感染癥狀并不特異, 單靠其臨床征象診斷十分困難。診斷方法是近年來研究的熱點(diǎn)。本文將不同原理的三種新興方法進(jìn)行了比較, 以求尋找更加適宜臨床應(yīng)用的快速診斷方法。現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 研究對(duì)象為2013年1～6月來本院就診參照肺炎支原體感染臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］高度懷疑為肺炎支原體感染的226例患兒, 年齡30 d～6歲, 平均年齡3.4歲。

1.2 方法 被動(dòng)凝集法：檢測(cè)其IgM抗體效價(jià), 以吸附特異性抗原的明膠顆粒與患兒血清做特異性凝集反應(yīng), 以比值>1：160者為陽性, 試劑為日本富士瑞必歐株式會(huì)社提供。效價(jià)高低與支原體感染情況正向相關(guān)。

快速培養(yǎng)法：標(biāo)本是痰液或咽拭子, 培養(yǎng)加藥敏24 h出結(jié)果。試劑采用陜西百盛園肺炎支原體快速鑒定培養(yǎng)藥敏試劑盒。

免疫金標(biāo)斑點(diǎn)法：濰坊康華生物試劑盒可查IgM和IgG抗體。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ χ-±s）表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示, 采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

在226例高度疑似患兒中, 快速培養(yǎng)法檢測(cè)陽性率最高,達(dá)93.18%, 這與盧志威等［2］的研究相似,快速培養(yǎng)法陽性檢出率明顯高于被動(dòng)凝集法、免疫金標(biāo)斑點(diǎn)法, 差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。被動(dòng)凝集法與免疫金標(biāo)斑點(diǎn)法比較, 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表1。

表1 支原體檢測(cè)陽性率比較（n,%）

3 討論

肺炎支原體抗體分為IgG抗體和IgM抗體兩種, 因肺炎支原體感染的潛伏期為2～3周, 患兒就診時(shí), 通常IgM抗體水平較高, IgG較IgM出現(xiàn)晚。如IgM抗體陰性, 也不能否定肺炎支原體感染, 還需檢測(cè)IgG抗體。通過不同原理檢測(cè)方法的對(duì)比, 為臨床肺炎支原體感染的檢測(cè)提供可靠依據(jù)。

被動(dòng)凝集法檢測(cè)IgM抗體效價(jià), 效價(jià)高低與支原體感染情況正向相關(guān), 實(shí)驗(yàn)室血清學(xué)試驗(yàn)?zāi)壳叭匀皇欠窝字гw感染的主要檢測(cè)方法［3］。作為初篩方法的被動(dòng)凝集法與金標(biāo)滲透法無差別［4］。臨床應(yīng)用中發(fā)現(xiàn)嬰幼兒溶血和黃疸血樣會(huì)干擾金標(biāo)滲透法的顯色背景, 并且弱陽性病例多見, 影響結(jié)果的判定。被動(dòng)凝集法更快速更適用一般條件實(shí)驗(yàn)室臨床初篩試驗(yàn), 適合于早期診斷及治療效果的監(jiān)測(cè)。對(duì)于高度懷疑肺炎支原體感染但I(xiàn)gM抗體檢測(cè)需動(dòng)態(tài)觀察, 必要時(shí)進(jìn)行金標(biāo)斑點(diǎn)法IgG抗體檢測(cè)以提高陽性率。

培養(yǎng)法是病原體檢測(cè)的金標(biāo)準(zhǔn), 以往培養(yǎng)條件較高, 結(jié)果時(shí)間長(zhǎng)不符合臨床需要, 新型肺炎支原體快速鑒定培養(yǎng)藥敏試劑盒培養(yǎng)加藥敏24 h可出結(jié)果, 不抽血, 特別適合嬰幼兒。藥敏試驗(yàn)更能給予臨床合理用藥支持。技術(shù)條件適中,適合二級(jí)甲等以上醫(yī)院微生物試驗(yàn)室, 進(jìn)行住院患兒綜合檢測(cè)和對(duì)于藥物治療不理想的患兒的標(biāo)本檢測(cè)。

綜上所述, 在肺炎支原體感染診斷中, 應(yīng)參考患兒個(gè)體狀況。對(duì)于不同的患兒合理選擇不同原理的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法,提高肺炎支原體的檢出率以及指導(dǎo)臨床合理用藥。

［1］ 胡亞美, 江載芳, 諸福棠.實(shí)用兒科學(xué).第7版.北京:人民衛(wèi)生出版社, 2002:14-15.

［2］ 盧志威, 趙輝, 鄭躍杰, 等.三種方法對(duì)兒童肺炎支原體感染診斷的動(dòng)態(tài)評(píng)價(jià).臨床兒科雜志, 2012, 30（4）:382-385.

［3］ 武翠娥.蛋白芯片檢測(cè)肺炎支原體與膠體金法檢測(cè)肺炎支原體方法的比較.中國(guó)社區(qū)醫(yī)師雜志, 2011, 13（287）:187.

［4］ 朱傳新, 周玉平.肺炎支原體四種檢測(cè)方法的比較.國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志, 2011, 32（7）:798-799.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.10.057

2014-09-15］

454000 河南省焦作市婦幼保健院檢驗(yàn)科