清肺顆粒中甘草的薄層鑒別方法研究

李玉平，胡宇莉，蘇　亮（重慶市動物疫病預防控制中心，重慶　401120）

清肺顆粒中甘草的薄層鑒別方法研究

李玉平，胡宇莉，蘇亮
（重慶市動物疫病預防控制中心，重慶401120）

摘要：試驗采用薄層色譜鑒別法研究和改進清肺顆粒中甘草的鑒別方法。結果顯示，供試品色譜中，檢出與甘草對照藥材相同顏色的斑點，且陰性對照無干擾，說明改進后的方法簡便快速，專屬性強，重現性好。

關鍵詞：清肺顆粒；甘草；薄層鑒別

清肺顆粒具有清肺平喘、化痰止咳的功效，主要由板藍根、浙貝母、葶藶子、甘草和桔梗5味中藥組成，其質量標準收載于獸藥質量標準匯編中。在標準中甘草的薄層鑒別方法，對照藥材與樣品處理前處理方法不一致，進而會引起結果存在一些差異，專屬性不強，同時提取方法復雜，提取次數較多，費時費力，增加了實驗的成本。

為建立簡便快速、專屬性強和重現好的薄層鑒別方法，本試驗參考《中華人民共和國獸藥典》2010版第二部及相關文獻報道，對處方中的薄層鑒別方法進行了研究和改進，進而建立適合制劑中甘草質量標準控制的薄層鑒別方法[ 1-3 ]。

1　試驗材料

1.1試驗儀器

KQ-600DA型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；AB204-S型分析天平（梅特勒-托利多公司）；DK-98-Ⅱ型電熱恒溫水浴鍋（天津市泰斯特儀器有限公司）；三用紫外檢測儀（上海安亭科學儀器廠）。

1.2試驗藥品和試劑

甘草對照藥材（批號：120904-201117，購自中國食品藥品檢定研究院）；清肺顆粒（批號為：20130901、20130902、20130903，由重慶市方通獸藥有限公司提供）；所用試劑均為分析純。

2　方法與結果

2.1不同處理方法的結果比較

2.1.1原標準方法

取清肺顆粒10 g，置具塞錐形瓶中，加水40 mL使其溶化，加乙醚45 mL，密塞，超聲處理30 min，濾過，濾液揮去乙醚，加正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，加水10 mL洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘渣加甲醇5 mL使其溶解，作為供試品溶液。

2.1.2改進后方法

取清肺顆粒研細，取粉末10 g，置具塞錐形瓶中，加水40 mL使其溶化，過夜，超聲處理30 min，濾過，濾液加正丁醇提取2次，每次20 mL，合并正丁醇液，加水10 mL洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘渣加甲醇1 mL使其溶解，作為供試品溶液。清肺顆粒用不同方法對樣品處理的結果比較見圖1。

2.2改進后的方法和試驗結果

2.2.1供試品溶液的制備

取清肺顆粒10 g，研細，按上述方法制備供試品溶液。

2.2.2陰性對照溶液的制備

取缺甘草的清肺顆粒粉末10 g，按上述方法制備陰性對照溶液。

圖1　清肺顆粒不同方法對樣品處理的結果比較

2.2.3對照藥材溶液的制備

取甘草對照藥材1 g，加水50 mL，回流提取30 min，濾過，濾液用正丁醇振搖提取2次，每次30 mL，合并正丁醇液，用水30 mL洗滌，取正丁醇層水浴蒸干，殘渣加甲醇1 mL使其溶解，作為對照藥材溶液。

2.2.4薄層層析及結果

取上述3種溶液各10 μL，分別點于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-甲酸-冰醋酸-水（15?1?1?2）為展開劑，展開，取出，熱風吹干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰后，在日光及紫外燈365 nm下檢視。結果顯示，供試品色譜中，分別在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點或熒光斑點，而陰性對照無干擾，清肺顆粒甘草TLC圖譜見圖2。

圖2　清肺顆粒甘草TLC圖譜

3　討論

甘草的薄層鑒別過程中，原標準方法采用乙醚處理樣品，乙醚易糊化于玻璃容器中，難以過濾；并且將提取后的濾液揮去乙醚，樣品中含有水，具塞玻璃瓶中難以確定乙醚揮發的程度，進而影響到樣品后續的提取，同時乙醚對人體有一定的危害。參考相關文獻，改進后的方法減去了樣品用乙醚處理的步驟，直接采用正丁醇提取，既沒有影響色譜斑點的檢出，又解決了樣品糊化黏附和過濾的問題，簡化了試驗流程，減少了對人體的危害[ 4-6 ]。

改進后的方法將原標準中所使用的“含1%氫氧化鈉的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板”改為“以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板”，結果顯示色譜斑點清晰，專屬性強和重現性好。

由于顆粒劑的硬度和脆度較大，改進法在制備供試品溶液時將其研細，此方法使樣品的溶解度提高，從而使薄層譜在重現性和平行性方面良好，結果準確、可靠。

[參考文獻]

[ 1 ]中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典[M].北京:中國農業出版社, 2010．

[ 2 ]李敏,陳建蓉,李莉.獸用四逆湯中甘草、干姜的薄層色譜鑒別研究[J].寧夏農林科技, 2010（5）: 38-39.

[ 3 ]曾赟昀,彭中芳.紫雪顆粒中甘草、玄參的薄層鑒別[J].今日藥學, 2008, 18（2）: 32-33．

[ 4 ]孫國英,張春麗,黃超,等.椰露止咳合劑中魚腥草和甘草薄層鑒別方法的改進[J].中藥材, 2009, 32（7）: 1 148-1 150.

[ 5 ]賴克道,劉元,文志云,等.薄層色譜法定性鑒別小柴胡顆粒中的柴胡、甘草[J].廣西醫學, 2009（6）: 886-887.

[ 6 ]徐慶儀,徐濟恒.清痤顆粒中赤芍、金銀花、甘草的薄層色譜鑒別[J].內蒙古中醫藥, 2011, 30（5）: 87.

前沿科技摘編

Study of TLC Identification for Radix Glycyrrhizae of Qingfei Granules

LI Yuping, HU Yuli, SU Liang
（Chongqing Animal Disease Control and Prevention Center, Chongqing 401120, China）

Abstract:TLC were used to study and improve the identification method of radix glycyrrhizae of qingfei gran?ules. The results showed that the same color chromatographic spots were detected in the test samples and their respec?tive reference substance, and the negative control without interference. The results showed that this method was sim?ple andrapid,strong specificity,goodreproducibility.

Key words:qingfei granules; radix glycyrrhizae; TLC

作者簡介：李玉平（1986-），女，河南林州人，碩士，助理獸醫師，研究方向為中藥質量研究。

收稿日期：2015-08-01

中圖分類號：R286；R284.1

文獻標志碼：A

文章編號：1001-0084（2015）09-0005-03