針刺大椎、足三里穴對大鼠運動性疲勞影響的實驗研究?

劉景玉，劉治中，馬俊楠，燕 平

(1.山西中醫學院，太原 030024;2.中國中醫科學院中醫基礎理論研究所，北京 100700)

針刺大椎、足三里穴對大鼠運動性疲勞影響的實驗研究?

劉景玉1，劉治中2，馬俊楠1，燕 平1

(1.山西中醫學院，太原 030024;2.中國中醫科學院中醫基礎理論研究所，北京 100700)

目的:從抗氧化系統、能量代謝系統等方面研究針刺大椎穴、足三里穴治療對運動性疲勞的影響。方法:采用大鼠游泳訓練模型，60只雄性大鼠按隨機數字表法分為安靜對照組、運動對照組、運動+大椎穴+足三里穴組和運動+足三里穴組4組各15只。其中安靜對照組不進行游泳訓練也不針刺，其余3組每天進行游泳訓練60 min，運動對照組運動后不進行針刺，剩余2組運動后進行針刺實驗，連續5周。測定與運動性疲勞相關的生化指標。結果:本實驗表明針灸大椎、后三里能夠使大鼠血清乳酸、血清尿素氮和肝臟丙二醛水平降低，血糖和肝、肌糖原水平及肝臟內超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶等抗氧化酶活性升高。結論:針刺大椎、后三里兩穴不僅能夠緩解運動性疲勞，且其作用效果優于單純針刺足三里穴。

針灸;大椎;足三里;自由基;能量代謝;運動性疲勞

近年來，現代醫學針對運動中廣泛存在的運動性疲勞研究較多，而傳統中醫于此方面顯示出極大的優勢，其中以安全有效為特色的針灸治療受到了廣泛的關注。本實驗組查閱大量文獻發現，關于針刺足三里穴抗運動性疲勞的研究較多，而同時配合針刺大椎穴的研究報道甚少。大椎穴又名百勞穴，匯聚手足三陽的陽熱之氣與督脈的陽氣上行頭頸，從而有協調臟腑活動的作用。刺激足三里和大椎穴可補氣補血、益精補腎、平衡陰陽，故本實驗旨在研究探討足三里與大椎穴配合刺激對運動性疲勞的作用機制。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

1.1.1 實驗動物 體質量150～180 g的6周齡SD雄性大鼠60只，山西醫科大學實驗動物中心提供。適應性喂養7 d，保持每天換飲水和加足飼料，室溫為20～25℃，相對濕度45%～60%左右。

1.1.2 試劑和儀器

2.1 試劑

戊巴比妥鈉、BUN、LAC、肝、肌糖、SOD、MDA、GSH-Px等試劑盒(購于上海世儀生物科技有限公司)。

2.2 儀器

秒表、血糖儀(德國羅氏)，Enspire酶標儀(美國PerkinElmer)，UV1601可見紫外分光光度儀(日本 瑞立)，AU5800生化分析儀(美國 Beckman Coulter)，低溫臺式離心機(德國Heraeus)，WP7微波爐(順德市格蘭仕電器實業有限公司)，塑鋼玻璃游泳池150 cm×60 cm×70 cm(上海欣軟信息科技有限公司)。

2 方法

2.1 游泳運動訓練模型

游泳訓練分為適應性訓練(3周，周六周日不進行游泳訓練)和大強度耐力訓練(2周，1周7 d)，每天60 min。

2.2 動物分組及針刺

按隨機數字表法將60只雄性大鼠分為安靜對照組(Ⅰ)、運動對照組(Ⅱ)、運動加針刺大椎穴與足三里穴組(Ⅲ)和運動加針刺足三里穴組(Ⅳ)4組各15只，分籠飼養。實驗期間，安靜對照組不進行運動訓練也不進行針刺治療，運動對照組只進行運動訓練不進行針刺治療，運動+大椎+足三里組與運動+足三里組每天游泳訓練結束后進行針刺治療。將大鼠俯臥于鼠固定器上，在所需針刺穴位［1］(大椎:第7頸椎與第1胸椎間，背部正中，足三里:小鼠膝關節外側腓骨小頭下3.5 mm)處剃毛，消毒后以32號0.5寸毫針直刺，持續捻轉2 min，留針3 min。

2.3 檢測指標與測試方法

于實驗第32天全部實驗大鼠進行力竭性游泳訓練，記錄力竭時間。力竭游泳參數:塑鋼玻璃游泳池150 cm×60 cm×70 cm，水深50 cm，水溫(30± 1)℃，大鼠尾部系5%體質量的重物;力竭判定指標:大鼠經10 s后仍不能返回水面。力竭游泳結束30 min后，3%戊巴比妥鈉溶液麻醉大鼠，腹主動脈采血取血清待測;取肝臟、股四頭肌液氮凍存待測，葡萄糖氧化酶法測定血糖含量;蒽酮法測定肝、肌糖原的含量;比色法測定LAC含量;酶偶聯速率法測定BUN含量;TBA比色法測定MDA含量;黃嘌呤氧化酶法測定超氧化物歧化酶(SOD)含量，DTNB法測定谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-PX)含量。

3 統計學方法

采用 SPSS 13.0軟件進行統計分析，以 α＜0.05。

4 結果

4.1 針刺對大鼠力竭時間的影響

表1顯示，運動對照組與安靜對照組大鼠力竭時間比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明大鼠經長期游泳訓練產生的運動性疲勞會使大鼠游泳力竭時間變短;運動+大椎+足三里組、運動+足三里組與運動對照組大鼠力竭時間比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明針刺治療延長了大鼠力竭時間。運動+大椎+足三里組與運動+足三里組比較，大鼠力竭時間比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明針刺大椎、足三里兩穴的大鼠比只針刺足三里穴的大鼠效果更好。

4.2 針刺大椎、后三里穴對大鼠血清LAC、BUN水平的影響

表2顯示，運動對照組與安靜對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明經長期游泳訓練的大鼠血清LAC、BUN水平升高;運動+大椎+足三里組、運動+足三里組與運動對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明大鼠經針刺治療后血清LAC、BUN水平恢復;運動+大椎+足三里組與運動+足三里組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明大椎、足三里兩穴配合針刺大鼠血清LAC、BUN水平恢復優于單純針刺足三里穴。

表1 各組大鼠力竭時間比較(±s)

表1 各組大鼠力竭時間比較(±s)

注:與安靜對照組比較:*P＜0.05;與運動對照組比較:△P＜0.05;與運動+足三里組比較:#P＜0.05

組 別 鼠數 力竭時間(s) I 15 20.24±0.23 II 13 18.49±0.29*III 13 21.00±0.37△#IV 14 20.07±0.26△

表2 各組大鼠血清LAC、BUN水平比較(±s)

表2 各組大鼠血清LAC、BUN水平比較(±s)

注:與安靜對照組比較:*P＜0.05;與運動對照組比較:△P＜0.05;與運動+足三里組比較:#P＜0.05

組 別 LAC(mmol/L) BUN(mmol/L) I 5.77±0.22 7.54±0.16 II 9.34±0.36* 11.02±0.24*III 5.67±0.16△# 7.21±0.25△#IV 6.38±0.28△ 8.31±0.39△

4.3 針刺對大鼠血糖和肝、肌糖原水平的影響

表3顯示，運動對照組與安靜對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明運動疲勞大鼠血糖和肝、肌糖原水平降低;運動+大椎+足三里組、運動+足三里組大鼠與運動對照組比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明大鼠經針刺治療后血糖和肝、肌糖原水平恢復;運動+大椎+足三里組與運動+足三里組大鼠血糖水平比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明大椎、足三里兩穴配合針刺大鼠血糖水平恢復優于單純針刺足三里穴。

表3 各組大鼠血糖、肝糖原和肌糖原水平比較(±s)

表3 各組大鼠血糖、肝糖原和肌糖原水平比較(±s)

注:與安靜對照組比較:*P＜0.05;與運動對照組比較:△P＜0.05;與運動+足三里組比較:#P＜0.05

組 別 血糖(mmol/L) 肝糖原(mg/g) 肌糖原(mg/g) I 5.02±0.26 6.14±0.24 1.82±0.25 II 3.26±0.35* 3.08±0.26* 1.42±0.13*III 5.56±0.22△# 6.08±0.35△ 1.79±0.17△Ⅳ 4.87±0.35△ 6.10±0.28△ 1.80±0.20△

4.4 針刺對大鼠肝臟SOD、GSH-Px、MDA水平的影響

表4顯示，運動對照組與安靜對照組大鼠肝臟SOD、GSH-Px、MDA水平比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明運動疲勞大鼠肝臟 SOD、GSH-Px水平降低，MDA水平升高;運動+大椎+足三里組、運動+足三里組大鼠與運動對照組大鼠肝臟 SOD、GSH-Px、MDA水平比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明大鼠經針刺治療后肝臟SOD、GSH-Px、MDA水平恢復;運動+大椎+足三里組與運動+足三里組大鼠肝臟SOD、GSH-Px、MDA水平比較差異有統計學意義(P＜0.05)，說明大椎、足三里兩穴配合針刺，大鼠肝臟SOD、GSH-Px、MDA水平恢復優于單純針刺足三里穴。

表4 各組大鼠SOD、GSH-Px、MDA水平比較(±s)

表4 各組大鼠SOD、GSH-Px、MDA水平比較(±s)

注:與安靜對照組比較:*P＜0.05;與運動對照組比較:△P＜0.05;與運動+足三里組比較:#P＜0.05

組 別 SOD (U/mg pro) GSH-Px (U/mg pro) MDA (nmol/mg pro) I 358.10±16.55 61.02±3.05 7.42±1.12 II 286.57±14.76* 47.95±3.28* 9.84±1.55*III 375.83±18.38△# 53.63±4.72△# 6.82±1.34△#IV 347.25±18.56△ 59.24±4.37△ 7.02±1.26△

5 結論與討論

尿素氮是機體蛋白質代謝的最終產物，機體運動持續時間較長(＞30 min)、強度較大時蛋白質代謝較明顯，但其供能比例不超過18%，因此血清中尿素氮含量與運動機能狀態、疲勞程度以及運動負荷的大小有關，并以此評定運動負荷的強度［2］。當運動肌肉糖原耗盡時，非運動肌肉中糖原不能及時補充肌細胞內分隔存在的糖原，肌肉吸收較多的血糖供能，引起血糖降低進而影響中樞神經系統的能量供應，乳酸堆積導致運動性疲勞造成體能下降［3］。SOD可有效清除體內超氧陰離子，其活性的變化反映體內自由基的代謝和生成情況［4］。MDA反映機體脂質過氧化程度，同時亦為自由基生成及對膜脂質雙層結構破壞的評定指標。GSH-Px是一種可以分解過氧化物及過氧化氫的含硒的酶，通過阻斷脂質過氧化連鎖反應，從而保護膜結構和功能的完整［5］。大強度運動使肝臟代謝異常或紊亂，破壞肝組織抗氧化系統，不能被及時清除氧自由基攻擊細胞膜形成的MDA，導致肝功能有所下降［6］。

中醫學的針刺療法對于消除和緩解運動性疲勞具有良好的效果，且簡便易行、無毒副作用。運動性疲勞是機體生理過程中不能持續其機能在一特定水平上或不能維持預定的運動強度［7、12］。運動性疲勞是一個很復雜的綜合性生理現象，它以中樞神經的作用為主導，是在中樞神經系統和周圍組織相互影響下發生的神經、感覺系統和運動系統及內臟器官的活動而出現的復雜的相互聯系的變化［7］。中醫認為，精(津)血為體力產生的物質基礎，它的化生和運行與中醫脾、腎、肝、心有密切關系［8］。由整體觀出發，運動性疲勞的本質為臟腑功能失調或津血不足，因其為暫時性內傷虛勞，故多可通過調養或自行恢復［9］，而脾虛、腎虛、氣虛、血虛等不同形式的虛證為運動性疲勞的主要表現。目前運用中醫藥方法尤其是針灸療法防治運動性疲勞的相關研究，已成為運動醫學界的一大熱點。《通玄指要賦》有記載:“三里卻五勞之羸瘦。”足三里穴能補益中氣，又有回陽固脫之效，因此前人將它列為回陽九針穴之一。現代研究表明［4-10］，針灸足三里穴能夠延緩運動性疲勞發生。大椎穴為機體聯絡臟腑、協調表里內外的網絡系統(督脈)的重要穴位，《針灸甲乙經》即言大椎為“三陽督脈之會”，可代表督脈通過監督調節各陽經上傳下達，從而達到統帥經絡功能協調臟腑活動的作用［11］。本實驗結果顯示，大椎與足三里兩穴配合作用不僅可以使運動訓練后的大鼠血清LAC、BUN和肝臟MDA水平降低，血糖和肝、肌糖原水平及肝臟抗氧化酶SOD、GSH-Px活性升高，具有良好的抗運動性疲勞效果，且作用效果優于單純刺激足三里穴的抗運動性疲勞效果。

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Experiment Study the Impact of Acupuncture Dazhui and Zusanli Point on Sports Fatigued Rats

LIU Jing-yu1，LIU Zhi-zhong2，MA Jun-nan1，Yan Ping1
(1．Shanxi University of Traditional Chinese Medicine，Taiyuan 030024，China; 2．Basic theory Institute，China Academy of Chinese Medical Sciences，Beijing 100700，China)

Objective:To study the impact of acupuncture Dazhui and Zusanli point on sports fatigued rats in terms of antioxidant system and energy metabolic system.Methods:The rat models of swimming training were used.60 male rats were randomized into four groups(n=15)，named a motionless control group，a motion control group，a motion + acupuncture Dazhui and Zusanli point group，a motion motion+acupuncture Zusanli point group.In the motionless group，no any motion exercise and acupuncture was applied.Other groups swimming training 60 minutes a day，in the motion control group no acupuncture was applied，in the remaining two groups after motion training corresponding acupuncture was applied for 5 weeks.Afterwards，the relevant biochemical indexes of sports fatigue were determined.Results:Acupuncture Dazhui and Zusanli point decreased the levels of serum lactic acid and urea nitrogen and liver malondialdehyde and increased the levels of blood glucose and some liver antioxidase activities such as superoxide dismutase and glutathione peroxidase.Conclusion:Acupuncture Dazhui and Zusanli point can be anti-sports fatigue，more effective than Acupuncture Zusanli acupoint only.

Acupuncture;Dazhui point;Zusanli point;Free Radicals;Energy Metabolism;Sports Fatigue

R245.31

:B

:1006-3250(2015)11-1435-03

2015-02-14

山西省科技廳自然科學基金資助項目(2012011041-3)

劉景玉(1980-)，男，黑龍江人，講師，醫學碩士，從事體育教育、運動醫學的臨床與研究，E-mail:42519256@ qq.com。