回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊對(duì)糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂、血流變的影響

時(shí)沛等

【摘要】目的：研究回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊對(duì)糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠血脂、血流變的影響。方法：將40只糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型對(duì)照組、陽性對(duì)照組、回藥低劑量組、回藥高劑量組。治療后，觀察各組大鼠體重、飲食、血脂四項(xiàng)、血液流變學(xué)。結(jié)果：回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊可降低模型大鼠的飲食、體重，降低TC、TG、LDL-C（P<0.05）；升高HDL-C（P<0.05）；結(jié)論：回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊可以控制攝食量、體重的增加，降低血脂、全血粘度水平。

【關(guān)鍵詞】糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化；血脂；血流變

【中圖分類號(hào)】R285.5【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2015）08-0014-03

糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化是糖尿病并發(fā)癥中最常見的一種，已有調(diào)查結(jié)果發(fā)現(xiàn)，糖尿病患者發(fā)生大血管病變的危險(xiǎn)性約是正常人的3倍，且動(dòng)脈粥樣硬化占61.2%[1]。糖尿病患者往往伴有高血糖代謝紊亂，患者血中的總膽固醇（TC）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、載脂蛋白B（APOLB）均增高，內(nèi)分泌失調(diào)，嚴(yán)重影響患者的身心健康[2-3]。

回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊是臨床用于治療糖尿病合并動(dòng)脈粥樣硬化且療效明顯的回藥方劑[4]。本課題通過觀察該藥對(duì)血脂四項(xiàng)、血液流變學(xué)的影響，進(jìn)一步探討回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊治療糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化的干預(yù)作用，為臨床推廣回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊提供依據(jù)。

1 材料

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠40只，均為SPF級(jí)，雄性，8周齡，體重（240±20）g，由寧夏醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。動(dòng)物許可證編號(hào)：SyXK（寧）2011-0001。

1.2實(shí)驗(yàn)條件SD大鼠每籠4只，飼養(yǎng)于寧夏醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室，飼養(yǎng)溫度（21±1）℃，濕度：41%～51%，壓差：（20±2）Pa，每天光照與黑暗時(shí)間各12h。實(shí)驗(yàn)期間動(dòng)物自由進(jìn)食、飲水。

1.3儀器獨(dú)立通氣籠IVC（型號(hào)：97，蘇州市蘇杭科技器材有限公司）；DS-671電子計(jì)重秤（器號(hào)：11387921，日本獨(dú)資上海寺岡電子有限公司）；冰箱（型號(hào)：BCD-236CKX 河南新飛電器有限公司）；自動(dòng)雙重純水蒸饋器（上海亞榮生化儀器廠生產(chǎn)，型號(hào)SZ93）；AU400全自動(dòng)生化分析儀（日本奧林巴斯公司）；LBY—N6K型全自動(dòng)血流變儀（普利生科貿(mào)集團(tuán)）；潔凈工作臺(tái)（蘇凈集團(tuán)蘇中安泰空氣技術(shù)有限公司）；

1.4藥物與試劑鏈脲佐菌素（STZ）為美國 Sigma公司；回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊由寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬銀川市中醫(yī)醫(yī)院制劑中心提供，為院內(nèi)制劑；血脂康膠囊由北京北大威信生物科技有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字 Z10950029，產(chǎn)品批號(hào)：20140912。

2方法

2.1模型的建立及評(píng)價(jià)[5-6]

2.1.1糖尿病大鼠模型制備①除正常對(duì)照組喂食普通飼料，其余大鼠喂食高脂高糖飼料（由基礎(chǔ)飼料64%加入羊油15% 、蔗糖18% 、蛋黃3%，經(jīng)輻照處理），誘導(dǎo)胰島素抵抗。②一周后，造模大鼠禁食，不禁水，隔夜空腹18h。STZ按45mg/kg體重腹腔注射，之后繼續(xù)喂以高糖高脂飼料，共8周。正常對(duì)照組大鼠在同等條件下腹腔注射檸檬酸鈉緩沖液，并繼續(xù)喂以普通飼料，共8周。

2.1.2糖尿病大鼠模型的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)糖尿病判定標(biāo)準(zhǔn)：注射后第3日測(cè)定血糖，如連續(xù)測(cè)3次隨機(jī)血糖≥16.7mmol /L，或者出現(xiàn)多飲、多尿、消瘦、乏力等糖尿病癥狀，并且連續(xù)2次隨機(jī)血糖>11.1mmol /L，即視為糖尿病建模成功。

2.1.3糖尿病合并動(dòng)脈粥樣硬化大鼠模型制備糖尿病模型成功大鼠繼續(xù)喂食高脂高糖飼料，均自由進(jìn)食、飲水，共8周。

2.1.4糖尿病合并動(dòng)脈粥樣硬化模型的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)隨機(jī)數(shù)字表法選取3只大鼠處死并取胸主動(dòng)脈，HE染色提示動(dòng)脈粥樣硬化形成，視為造模成功。

2.2分組與給藥SD大鼠按體重隨機(jī)分組，正常對(duì)照組8只：[蒸餾水1ml·（kg·d）-1，ig]；造模成功大鼠隨機(jī)分為4組：模型對(duì)照組8只：[蒸餾水1ml·（kg·d）-1，ig]，陽性對(duì)照組8只：[血脂康0.1g·（kg·d）-1，ig]，回藥低劑量組8只：[回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊0.2g·（kg·d）-1，ig]，回藥高劑量組8只[回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊0.6g·（kg·d）-1，ig]，連續(xù)灌服8周。

2.3標(biāo)本采集與處理每組大鼠在給藥8周后處死，處死前禁食不禁水12h，按2ml/kg體重腹腔注射8%戊巴比妥鈉麻醉，麻醉后，固定四肢，取腹部正中切口，分離下腔靜脈。在下腔靜脈插入無菌空針采血8～10ml。血液標(biāo)本以3000r/min離心5min，取上清液，置于-20℃冰箱內(nèi)保存待測(cè)。

2.4測(cè)試指標(biāo)及方法①每天觀察并記錄各組大鼠的毛色、體態(tài)、行為活動(dòng)等并記錄攝食量與體重。②血脂四項(xiàng)、血液流變學(xué)指標(biāo)的測(cè)定：分別測(cè)定血液流變學(xué)指標(biāo)及血脂四項(xiàng)指標(biāo)[血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）]。

2.5數(shù)據(jù)處理所有數(shù)據(jù)均用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，各項(xiàng)指標(biāo)結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示。各組間比較采用單因素方差分析（one-wayANOVA），如果方差齊采用S-N-K法，若方差不齊采用Tamhane's T2統(tǒng)計(jì)方法，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3結(jié)果

3.1一般情況除正常組外，其他各組大鼠均出現(xiàn)多飲、多食癥狀，體質(zhì)量增加緩慢或減輕，少動(dòng)，反應(yīng)遲鈍，皮毛干枯無光澤，并有不同程度的脫毛、眼病及尾部潰爛等。回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊各組及對(duì)照組上述一般情況較模型組有明顯改善。

3.2各組大鼠攝食量情況給藥期間，模型組攝食量均明顯高于其余各組；回藥組，陽性對(duì)照組攝食量減少，與模型組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；回藥高劑量組與陽性對(duì)照組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。見表3-1。endprint

[JP+2]3.3各組大鼠體重水平的變化造模前各實(shí)驗(yàn)組大鼠體重差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；造模后體重正常對(duì)照組大鼠高于各治療組大鼠（P<0.01）；實(shí)驗(yàn)期間，正常組體重平穩(wěn)增加，各組大鼠體重均緩慢增加或減輕，體重減輕程度由大至小依次為：模型組>陽性對(duì)照組>回藥低劑量組>回藥高劑量組；8周實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，回藥組和陽性對(duì)照組大鼠體重明顯高于模型組（P<0.05）。見圖3-1。[JP]

3.4各組大鼠血脂四項(xiàng)水平的變化正常對(duì)照組血清TC水平明顯低于模型對(duì)照組；回藥組與模型組相比，TC水平明顯降低（P<0.01）；回藥高劑量組、陽性對(duì)照組TC水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型組大鼠與正常對(duì)照組相比血清TG水平明顯升高（P<0.01）；經(jīng)治療，回藥高劑量組與陽性對(duì)照組血清TG較模型對(duì)照組降低（P<0.05）；回藥組與陽性對(duì)照組之間TG水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；正常對(duì)照組HDL-C水平明顯高于模型對(duì)照組（P<0.01），治療后，回藥高劑量組HDL-C水平明顯高于模型對(duì)照組（P<0.01）；模型組與回藥低劑量組、陽性對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；空白對(duì)照組LDL-C水平明顯低于其他各組；治療后，回藥組、陽性對(duì)照組LDL-C水平較模型對(duì)照組明顯升高（P<0.01），高劑量組、陽性對(duì)照組LDL-C水平差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。（P>0.05）見表3-2。

3.5各組大鼠血液流變學(xué)水平的變化與正常對(duì)照組比較，模型對(duì)照組全血粘度高切變率、全血粘度中切變率、全血粘度高切變率、血漿粘度明顯升高（P<0.01），治療后，各組全血粘度值較模型對(duì)照組明顯降低（P<0.01），其中以回藥高劑量組作用明顯（P<0.01）；其中回藥高劑量組、陽性對(duì)照組全血粘度高切變率、全血粘度低切變率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見表3-3。

4討論

回族醫(yī)學(xué)側(cè)重于從功能角度、整體角度、變化角度把握生命規(guī)律，其基本理論的“四元”、“三子”（七行）學(xué)說，各行氣組分之間充滿了各種聯(lián)系，真一陰陽七行系統(tǒng)在不斷地演化過程中，必須保持其內(nèi)部的相對(duì)穩(wěn)定，以適應(yīng)不斷變化的外部環(huán)境[7]。當(dāng)自身的調(diào)控能力降低，即生態(tài)失衡時(shí)，這些異常的病理產(chǎn)物，無法及時(shí)“成熟”而“清除”，將會(huì)成為損傷人體正氣、阻礙氣機(jī)的主要因素，同時(shí)又將傷陽、化熱、成瘀，成為疾病發(fā)展的主要病理環(huán)節(jié)[8]。這種觀點(diǎn)同樣也符合糖尿病并發(fā)動(dòng)脈粥樣硬化產(chǎn)生時(shí)其內(nèi)外環(huán)境發(fā)生不平衡性的改變。

回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊是在回藥基本方基礎(chǔ)上結(jié)合中醫(yī)基礎(chǔ)理論指導(dǎo)下組方而成。在中醫(yī)理論中消渴病病機(jī)主要在于脾腎兩虛、痰濁瘀滯，病理性質(zhì)為本虛標(biāo)實(shí)，而以陰虛為本，痰瘀毒互結(jié)阻滯為標(biāo)，治當(dāng)補(bǔ)脾益腎、消瘀散濁為原則，因此在回醫(yī)理論指導(dǎo)下結(jié)合中醫(yī)基礎(chǔ)理論以獲得更好療效。方中以回藥方“消渴、肝脾腫硬、胸膈滿悶方”的“修合諸般帖藥方”為基礎(chǔ)，滴乳（乳香）、木兒（沒藥）、也而撒（知母）、胡咱則（枸杞）幫助人體自身的調(diào)控力，使病理產(chǎn)物得到清除，補(bǔ)脾益腎，活絡(luò)散瘀，恢復(fù)健康的穩(wěn)態(tài)稟性。而在此基礎(chǔ)上根據(jù)中醫(yī)理論加人參、黃芪、黃精、茯苓、阿福體汀（菟絲子）、婆固脂（補(bǔ)骨脂）、何首烏等補(bǔ)脾益腎，生津止渴；加川芎、葛根、干祖伐（牛膝）、澤瀉、山楂、法半夏、水蛭粉等祛痰消濁，化瘀通脈，加川黃連、黃芩等清熱解毒，全方共奏健脾補(bǔ)腎，祛痰消濁、化瘀通脈之效。

本課題糖尿病模型組較正常對(duì)照組飲食量明顯升高，體重明顯下降，血清TC、TG、LDL-C升高，HDL-C下降，全血粘度水平升高，通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)回藥復(fù)方軟化動(dòng)脈膠囊可顯著降低糖尿病AS大鼠血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇水平，降低全血粘度水平，但其涉及的具體機(jī)制，仍有待于進(jìn)一步探討。

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（收稿日期：2015.01.29）endprint