液相色譜—串聯質譜法測定紡織纖維中的分散藍1和分散黃3

胡羽鵬　顧浩威

摘 要：建立了同時測定紡織纖維中分散藍1和分散黃3的高效液相色譜-串聯質譜分析方法。紡織品材料經甲醇超聲提取后，以C18色譜柱分離，乙腈（A）-5mmol/L乙酸銨（B）作流動相，進行HPLC-MS/MS在MRM模式下的定性及定量分析。分散藍1和分散黃3在0.1-0.8μg/mL范圍內有很好的線性，r2可達0.99，分散藍1的檢出限為5.0μg/mL，分散黃3的檢出限為2.5μg/mL。樣品加標實驗中，分散藍1和分散黃3的加標回收率為85.9%-103.6%，相對標準偏差（RSD）為1.59%-5.39%。該方法準確、快速、靈敏度高，適用于紡織品中分散藍1和分散黃3含量的定性、定量測定。

關鍵詞：液相色譜-串聯質譜；紡織品；分散藍1；分散黃3

隨著電視、互聯網的傳播，犯罪分子的反偵查能力越來越強，傳統的指紋、足跡的痕跡物證通常會被破壞，而在犯罪案件現場中常常保留有各種紡織纖維的微量物證，而分析檢驗這些微量物證可以為案件指明方向并提供直接證據。紡織纖維中的分散藍1和分散黃3是紡織纖維中的致敏染料，常常會引起人體或動物的過敏。染色過程中，染料分子通過吸附、擴散等多重處理，從而使染液轉移到被染物上[2]。通過對致敏染料的檢驗分析，可以為案件偵破提供方向和證據。

對分散藍1和分散黃3檢測的方法有很多種，王明泰[2]等采用了氣相色譜-質譜法、陳美娟[3]、胡奇志[4]等采用液相色譜法對分散藍1和分散黃3進行了測定，但是前處理都相對繁瑣，靈敏度不高。文章采用甲醇超聲提取后用LC-MS-MS測定，方法簡單快速、靈敏度高。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

標準品購置：分散藍1（99%）和分散黃3（99%），購于美國Dr Ehrenstorser GmbH公司；甲醇、乙腈均為色譜純。

LC-MS-MS系統：API 4000（ESI）配 LC-30液相系統。

1.2 實驗方法

1.2.1 標準儲備液配制

標準儲備液：準確稱取分散藍1、分散黃3固體標準品各0.01g（精確到0.001g），用甲醇配制成濃度為0.1mg/mL的分散藍1和分散黃3儲備液，4℃冰箱保存備用。

1.2.2 樣品的制備

取紡織纖維混合均勻，準確稱取紡織纖維1.0g（精確至0.001g）于50mL比色管中，再加入10mL甲醇，放于70℃恒溫震蕩水浴中20min。然后再70℃恒溫超聲提取10min。取有機相。殘渣中加入10mL甲醇，再次提取2次，合并有機相。有機相吹氮濃縮、用甲醇定容至1mL，最后用0.45μm濾膜過濾，備用。

1.2.3測定條件。

（1）液相色譜條件

色譜柱：ZORBAXExtendC18柱（4.6×150mm×3.5μm）；流動相：乙腈（A）-5mmol/L乙酸銨（B），梯度洗脫（程序見表1）；柱溫為40℃；進樣量為2μL。

（2）質譜條件

電噴霧離子源，噴霧電壓（IS）為5500V，離子源溫度（TEM）為600℃；碰撞氣為6psi；氣簾氣為24psi；霧化氣為60psi。多反應監測各離子對及各優化參數見表2。

2 結果與討論

2.1 提取溶劑的選擇

分散藍1和分散黃3較易溶于醇、酮等多種有機溶劑。選取常用有機溶劑乙酸乙酯、甲醇、正己烷和丙酮為提取試劑進行了加標回收率實驗。實驗表明，用甲醇提取時，分散藍1和分散黃3的回收率都能達到85%以上，并且提取的干擾雜質少，所以最終選定甲醇作為提取溶劑。

2.2 色譜條件的優化

2.2.1 色譜柱的選擇

本實驗采用規格為4.6×150mm×3.5μm的AgilentZORBAXExtend色譜柱為分離柱。

采用乙腈和5mmol/L乙酸銨水溶液為流動相進行梯度洗脫，2種目標物均分離良好，峰型尖銳對稱，且目標峰沒有基質干擾，如圖1所示。

2.3 質譜條件的選擇和優化

首先采用0.8μg/mL分散藍1和分散黃3標準溶液，采用蠕動泵樣方式進樣，在ESP+全掃描模式下找出母離子，經確定為分子離子，然后對其子離子進行全掃描，最后選取豐度較強的2個子離子，優化其錐孔電壓、碰撞能量等質譜參數。選取豐度較大并且響應穩定的來做定量離子。

2.4 校準曲線、線性范圍及檢出限

取分散藍1和分散黃3混合標準溶液進行測定，其濃度分別為：0.0，0.05，0.1，0.2，0.4，0.8，1.2μg/mL，以峰面積（Y）對濃度（X，μg/mL）進行線性回歸，得到校準曲線，結果見表3。結果表明：分散藍1和分散黃在0.1～0.8μg/mL范圍內相關系數均可達到0.99以上、線性關系良好。

采用信噪比S/N=3的計算方式測算檢出限，分散藍1的檢出限為5.0μg/kg，分散黃3的檢出限為2.5μg/kg。

2.5 回收率、變異系數

在紡織纖維樣品中添加濃度為0.4μg/mL的分散藍1和分散黃3混合標液，經上述方法進行測定，樣品空白和加標的色譜圖和質譜圖如圖2所示，結果表明：在此色譜條件下能很好的將這2種目標物質分離。

分散藍1和分散黃3的加標回收率及5次重復測定的變異系數結果見表4。結果表明：分散藍1和分散黃3的平均回收率在85.9%-103.6%之間，變異系數（RSD）在1.59%-5.39%之間。

3 結束語

采用HPLC-MS/MS同時測定紡織纖維中分散藍1和分散黃3，方法準確、快速、靈敏度高，適用于紡織品中分散藍1和分散黃3含量的定性、定量測定。

參考文獻

[1]何瑾馨.染料化學[M].北京：中國紡織出版社，2009：11.

[2]王明泰，牟峻，周曉，等.氣相色譜/質譜（GC/MS）聯用技術在紡織品安全檢測中的應用[J].檢驗檢疫科學，2007，17：105-108.

[3]陳美娟，李亞明，張蓉，等.高效液相色譜法測定紡織品上的致敏性分散染料[J].染料與染色，2006，43（4）：51-52.

[4]胡奇志，黎宏彥，李少冥.反相高效液相色譜法測定偶氮分散染料混合物的研究[J].分析化學，1994，22（4）：429.

[5]李懿睿，郭衛榮.液相色譜-質譜法快速測定紡織品中6種致敏性分散染料[J].實驗室研究與探索，2010，29（2）：11-13.

[6]馬強，白樺，王超，等.超高效液相色譜-串聯質譜法同時測定玩具中的16種致癌和致敏染料[J].分析化學，2010，38（1）：51-56.