成都市健康體檢婦女人乳頭狀瘤病毒感染及基因亞型分析

劉玉萍，沈太敏，帥 平，陳 軍，唐 靜(四川省醫學科學院·四川省人民醫院健康管理中心，四川 成都 610072)

成都市健康體檢婦女人乳頭狀瘤病毒感染及基因亞型分析

劉玉萍，沈太敏，帥 平，陳 軍，唐 靜
(四川省醫學科學院·四川省人民醫院健康管理中心，四川 成都 610072)

目的 目的 了解成都市已婚婦女宮頸人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染情況和基因亞型分布。方法 分析2012年10月至2013年9月在我院行健康體檢的1482例婦女的HPV感染情況以及亞型和年齡分布情況。結果 1482例宮頸篩查標本中，HPV陽性標本197例(13.29%)。單一型別HPV感染率為11.47%，混合型別HPV感染率為1.82%。197例HPV感染者中共有19種HPV亞型被檢出，高危型以52、58為主，其次為16、68型，陽性率分別為21.31%、10.00%和9.13%、6.96%。中國人群常見型CP8304陽性率為11.74%。60歲及以上的婦女HPV及高危型HPV感染陽性率最高，其次為20～29歲年齡組，陽性率最低的為40～49歲年齡組婦女。結論 本地區HPV感染率較高，感染主要亞型是52、58、16型，以單一感染為主，此分布特點對本地區HPV感染、宮頸癌及癌前病變的防治有重要意義。

人乳頭狀瘤病毒；基因分型；分子流行病學

宮頸癌發病率僅次于乳腺癌，為女性第2位惡性腫瘤，嚴重危害女性健康，是導致婦女死亡的主要惡性腫瘤之一。目前流行病學、分子生物學、臨床資料等眾多研究已證實人乳頭狀瘤病毒(human papillomavirus，HPV)感染與宮頸癌的發生、發展密切相關，HPV感染是宮頸癌發生的必要條件[1，2]，幾乎所有的宮頸癌組織中可以檢測到人乳頭狀瘤病毒[3]。在不同國家和地區，HPV基因分布的流行病學存在差異，了解和弄清這種差異，對于HPV感染的預防與治療及制定宮頸癌、癌前病變等的預防措施，具有非常重要的意義。本文對成都部分地區婦女HPV感染情況作一調查研究，期望為本地區宮頸癌的防治提供重要的數據資料與參考。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2012年10月至2013年9月在我科進行健康體檢者1482例，年齡21～77歲，其中年齡20～29歲84例、30～39歲480例、40～49歲657例、50～59歲189例，60歲及以上72例。受檢者均為已婚且無宮頸手術史者，由婦科醫生嚴格按照規范操作進行，所有標本采集過程經本人同意。

1.2 方法

1.2.1 樣本采集 取宮頸脫落細胞標本，采用擴陰器充分暴露宮頸，用棉拭子將宮頸口過多的分泌物擦去。將宮頸刷伸入宮頸口處，輕輕搓動宮頸刷使其順時針轉3～5圈。慢慢抽出宮頸刷，將其放入裝有細胞保存液的標本管中。在管口處將多余的刷柄折斷，將刷頭留在樣本管中。旋緊管蓋，做好標記。以上標本均于4 ℃保存，1周內測定。

1.2.2 HPV-DNA亞型檢測 采用HybriMax醫用核酸分子快速雜交基因分型盒(凱普生物科技有限公司)，運用基因擴增技術及導流雜交原理，通過反向點雜交檢測擴增產物與包被有型特異性探針膜雜交結果，采用堿性磷酸酶系統定性檢測，從而對21種HPV基因型(包括13種高危亞型16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68型、5種低危亞型6、11、42、43 和44型和3種中國人群常見亞型53、66和CP8304型)進行分型檢測。

1.3 統計學方法 應用統計軟件包SPSS 13.0對數據進行統計處理。率的比較采用χ2檢驗。P< 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HPV感染率 1482例宮頸篩查標本中，共有197例HPV陽性標本，感染率為13.29%。197例HPV感染者中單一型別HPV感染率為11.47%(170/1482)，混合型別HPV感染率為1.82%(27/1482)，其中2種HPV基因型感染率為1.42%(21/1482)，3種HPV基因型感染率為0.40%(6/1482)。

2.2 HPV各基因亞型分布情況 197例HPV感染者中共檢出HPV亞型19種，高危型51和低危型43未被檢出。高危型以52、58為主，其次為16、68型，陽性率分別為21.31%、10.00 %和9.13%、6.96%；低危型以11、6型為主，陽性率分別為2.61、2.17%；中國人群常見型CP8304陽性率為11.74%，見表1。

表1 197例陽性樣本HPV亞型感染分布情況

2.3 HPV感染年齡分布 年齡≥60歲HPV感染陽性率最高(占23.61%)；其次為20～29歲(占19.05%)；陽性率最低的年齡為40～49歲(10.05%)。各年齡組間比較，差異有統計學意義(χ2=16.022，P= 0.003)。高危型HPV感染陽性率最高的是≥60歲(占18.06%)；其次為20～29歲(占15.48%)；陽性率最低的年齡為40～49歲(占8.07%)。各年齡組間比較，差異有統計學意義(χ2=11.134，P= 0.025)，見表2。

表2 不同年齡段HPV及高危型HPV陽性比較 [n(%)]

3 討論

HPV屬于乳頭瘤病毒科的一員，是宮頸癌發生的必要條件，屬雙鏈閉環的小DNA病毒，包含約8000個堿基對。其中包括8個早期開放讀碼框架(E1-E8)、2個晚期讀碼框架和1個非編碼長控區。在早期開放讀碼框架中，E6和E7基因對細胞生長刺激最為重要，E6、E7編碼的E6、E7蛋白分別與抑癌基因p53和Rb結合，引起細胞增殖失控，抑癌基因對DNA的損傷修復功能喪失，導致癌前病變及癌癥的發生。而晚期讀碼框L1和L2基因分別編碼HPV的主要和次要衣殼蛋白，組裝成HPV的衣殼。至今已發現100余種不同亞型的HPV[4]，根據生物學特征和致癌潛能，HPV被分為高危型和低危型，高危型與癌及癌前病變相關，低危型主要與輕度鱗狀上皮損傷和泌尿生殖系統疣相關。高危型HPV包括16、18、31、33、34、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68、73和82等型別，低危型HPV包括6、11、40、42、43、44、54、61、72、81和89等型別[5]。本文采用的是HybriMax醫用核酸分子快速雜交基因分型盒，運用基因擴增技術及導流雜交原理，對21種HPV基因型(包括13種高危亞型16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59 和68型、5種低危亞型6、11、42、43 和44型和3種中國人群常見亞型53、66 和CP8304型)進行分型檢測。

本研究中，該人群HPV感染率為13.29%。HPV在自然人群中的感染率為1.4%～27.3%，一般人群的HPV感染率浮動于10%上下[6]。有研究表明我國北京地區HPV感染率為15.38%，山西省地區HPV感染率為14.8%。與本研究結果基本一致。197例HPV感染者中單一型別HPV感染率為11.47%，混合型別HPV感染率為1.82%。說明本地區已婚女性宮頸細胞中HPV感染以單一型別感染為主，混合型別感染為輔。

在HPV亞型檢測中，最常見的基因型為16型[7]。中國地區常見類型為16、52、58等。高危型52、58，在世界其他地區較為少見，而在中國卻較為常見，而且HPV52、58的陽性率南方地區較北方高。本研究結果顯示，197例HPV感染者中共有19種HPV亞型被檢出，高危型51和低危型43未被檢出。高危型以52、58為主，其次為16、68型，分別占21.31%、10.00 %和9.13%、6.96%，這與楊光建等研究一致[8]。HPV16型居于52、58型之后，這可能為成都地區特點，也可能與樣本的量及選擇有關。

研究顯示，HPV感染率在年輕婦女呈一高峰[9]。另一觀點認為，在年輕婦女與年長婦女有兩個HPV感染高峰，在年齡小于25歲的婦女(16.7%)及年齡大于60歲的婦女(23.0%)中，觀察到兩個HPV感染高峰[10]。與本文研究一致。年齡大于60歲婦女HPV感染增高的原因可能是，隨年齡增長體內原有的免疫力逐漸消失或激素水平變化導致潛伏期病毒復活。而20～30歲女性感染概率高，可能是由于青年女性性生活頻繁，免疫系統未被致敏，易受HPV感染。本文研究顯示，HPV感染陽性率最低的年齡為40～49歲，這可能是因為隨著年齡的增高，性生活頻率減低，感染概率下降。

HPV感染是全球性的大問題，對女性宮頸癌防治尤為重要。目前有兩種HPV疫苗已被美國FDA認證上市：Cervarix疫苗用于預防HPV16和18型感染引起的宮頸癌前病變和宮頸癌；Gardasil疫苗用于預防HPV16、18、11和6型感染引起的生殖器疣、不典型性病變、癌前病變及癌癥。HPV基因分布的流行病學在不同國家、不同地區存在差異，HPV感染完整的流行病學資料非常缺乏，因此建立不同地區間HPV基因分布的數據庫迫在眉睫。根據這種分布的不同，開發針對性的、有效的HPV疫苗，對于HPV感染的預防與治療、宮頸癌及癌前病變的預防和治療均有重要意義。

[1] de Sanjose S，Quint WG，Alemany L，et al.Human papillomavirus genotype attribution in invasive cervical cancer：a retrospective cross-sectional worldwide study[J].Lancet Oncol，2010，11(11)：1048-1056.

[2] Giorqi Rossi P，Chini F，Bisanzi S，et al.Distribution of high andlow risk HPV types by cytological status：a population based studyfrom Italy[J].Infect Agent Cancer，2011，6：2.

[3] Arbyn M，Castellsagué X，de Sanjosé S，et al.Worldwide burden of cervical cancer in 2008[J].Ann Oncol，2011，22(12)：2675-2686.

[4] 耿建祥，王旭波.人乳頭瘤病毒檢測及其臨床應用[M].北京：人民衛生出版社，2009：381-427.

[5] Woods R Sr，O'Regan EM，Kennedy S，et al.Role of human papillomavirus in oropharyngeal squamous cell carcinoma：A review[J].World J Clin Cases，2014，2(6)：172-193.

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[7] Ripabelli G，Grasso GM，Del Riccio I，et al.Prevalence and genotype identification of human papillomavirus in women undergoing voluntary cervical cancer screening in Molise，central Italy[J].Cancer Epidemiol，2010，34(2)：162-167.

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[9] Datta SD，Koutsky LA，Ratelle S，et al.Human papillomavirus infection and cervical cytology in women screened for cervical cancer in the United States，2003-2005[J].Ann Intern Med，2008，148(7)：493-500.

[10]王千秋，齊淑貞.生殖道人乳頭瘤病毒感染的流行與防治[J].實用醫院臨床雜志，2009，6(2)：37-41.

Human papillomavirus infection in uterine cervix and subtype analysis among health examination women in Chengdu

LIUYu-Ping，SHENTai-Min，SHUAIPing，HENJun，TANGJing
(CenterofHealthManagement，SichuanAcademyofMedicalSciences&SichuanProvincialPeople’sHospital，Chengdu610072，China)

SHENTai-Min

Objective To evaluate the prevalence of human papillomavirus(HPV)infection and subtype distribution among health examination women in Chengdu.Methods A total of 1，482 samples were collected from health examination women for HPV subtype analysis between October 2012 and September 2013.The overall HPV prevalence，infectious status of various subtypes and age distribution were compared and analyzed.Results Among the 1，482 women，197 cases were infected with HPV.The overall HPV prevalence was 13.29%.The single HPV infection rate was 11.47%.The multiple infection rates were 1.82%.Among 21 genotypes of HPV，19 genotypes were detected and the main high-risk genotypes were HPV52，58，16 and 68.The highest HPV prevalence rate was found in women at and over 60 years old followed by those aged from 20 to 29.The lowest HPV prevalence rate was found in women aged from 40 to 49.Conclusion The infection rate of HPV was high in Chengdu.The main genotypes were HPV 52，58 and 16，which were primarily in a single infection.The distribution character has an important value in the prevention and treatment of HPV infection，cervical cancer and precancerous lesions.

Human papillomavirus；Genotypes；Molecular epidemiology

四川省衛生廳科研基金資助項目(編號：110204)

沈太敏

R711.3

A

1672-6170(2015)06-0052-03

2015-06-04；

2015-07-09)