胃泌素釋放肽前體在小細胞肺癌診斷及治療中應用

黃梅香+梁藝華+任寧毅+葉儉

[摘 要] 目的：探討胃泌素釋放肽前體（ProGRP31-98）在小細胞肺癌（SCLC）臨床治療中的價值。方法：收集肺部腫瘤患者199例，健康對照人群84例，以ELISA方法檢測血清ProGRP31-98水平，并與NSE、CYFRA21-1、CEA進行聯合檢測并分析其診斷SCLC敏感度和特異度。結果：結合病理及影像技術確診肺癌患者142例，其中鱗癌52例，腺癌40例，未分化癌1例，小細胞癌49例，其他良性病變者57例；49例SCLC患者中，血清ProGRP31-98中位值為610.94 pg/mL，明顯高于非小細胞肺癌（NSCLC）組及健康對照組，差異均有統計學意義（P<0.01）；49例SCLC中廣泛期患者ProGRP31-98水平高于局限期患者，二者中位值分別為959.83pg/mL和320.12pg/mL（P<0.01）；ProGRP31-98診斷敏感性為81.63%，特異性為94.62%， ProGRP31-98+NSE+CYFRA21-1+CEA聯合檢測的敏感性為91.84%，特異性為95.57%，約登指數為87.41，四個指標聯檢敏感性特異性高于單獨檢測，但與ProGRP13-98+NSE比較，差異無統計學意義。結論：血清ProGRP31-98檢測可作為SCLC診斷指標，其水平能為SCLC治療效果、復發監測等提供數據；與NSE聯合檢測可進一步提高敏感性。

[關鍵詞] 胃泌素釋放肽前體；神經元特異性烯醇化酶；小細胞肺癌

中圖分類號：R734.2 文獻標識碼： A 文章編號：2095-5200（2015）03-082-03

城市工業化，吸煙普遍化，使空氣霧霾日益嚴重，肺癌已成為我國首位惡性腫瘤死亡原因。肺癌主要分為小細胞肺癌（SCLC）和非小細胞肺癌（NSCLC），前者約占肺癌的15%-25%，是一種惡性化程度高，侵襲性生長較快，易發生廣泛性壞死和淋巴結轉移的惡性腫瘤，大部分患者就診時已是晚期階段，預后較差，五年生存率極低。正確鑒別二者尤為重要，因為這2種類型的癌癥具有不同的預后：早期NSCLC可通過手術治愈，而SCLC則需要化療和放療。目前的影像學手段很難發現小的、散在腫瘤病灶上的SCLC，而腫瘤標記物（TM）在現代醫學領域中已發揮重要作用，其對肺癌的輔助診斷、分型、分期、預后、療效等均具有重要意義[1]，1982年首次報道神經元特異性烯醇化酶（NSE）可作為SCLC標記物[2]，其應用于臨床診斷已多年，但在局限性SCLC診斷中，常出現陽性率過低，標本易受溶血、脂血影響。1978年McDonald等發現了胃泌素釋放肽（GRP）[3]，其屬于人體胃腸激素，穩定性差，難檢測，而胃泌素釋放肽前體ProGRP（31-98）[4]則具有半衰期較長、更穩定、可以進行體外檢測的特點，其在SCLC中過度表達，SCLC患者中血液ProGRP水平明顯升高，在正常上皮中不表達或表達非常低，在良性肺疾病和上皮來源的腫瘤中低水平表達，本文就ProGRP（31-98）在小細胞肺癌診斷及治療的臨床應用進行分析。

1 材料與方法

1.1 研究對象

收集肺腫瘤科住院患者199例，男137例，女62例，年齡為21～69歲；確診肺癌患者142例，其中NSCLC93例（鱗癌52例，腺癌40例，未分化癌1例），SCLC小細胞癌49例（LD-SCLC組28人，ED-SCLC組21人），其他良性肺部病變患者57例；健康對照人群84例，男69例，女15例，年齡20～70歲；以上各組均排除腎功能衰竭等重大疾病等影響，各組間性別年齡差異不具統計學意義（P>0.05）。

1.2 標本處理

測定者用生化不抗凝真空采血管于清晨抽空腹靜脈血3mL，靜置30min后離心3000r/min轉15min后分離血清后進行檢測，室內溫度濕度在控，試驗前做室內質控，結果在控，CV值控制在10%以內，所有標本無溶血、脂血。

1.3 試劑及儀器

試劑為瑞典康乃格診斷有限公司96人份CanAg proGRP、CEA、NSE、CYFRA21-1 EIA試劑盒，所有操作按SOP文件進行。廠家建議臨床參考范圍分別為：ProGRP<50 pg/mL；NSE<13ng/mL；CEA<5 ng/mL；CYFRA21-1<3.3 ng/mL。微板振蕩器為EYM-BIO水平振蕩儀，振蕩強度應從弱到強。縱向振動約200次/min， 擺動700-900次/min。洗板機為新波EYM-BIO洗板機，設定自動循環清洗6次，每次浸泡時間為15s。酶標儀為雷杜RT-6000酶標儀，雙波 長405/620 nm， 可讀 吸 光度 范 圍 0～3.0。

1.4 統計學方法

采用SPSS17.0統計分析軟件對數據進行錄入、統計和分析，采用相應設定量資料的t檢驗、χ2 檢驗，P>0.05為差異無統計學意義，P<0.05則認為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 各組間血清ProGRP31-98、NSE水平對比

49例SCLC患者中，血清ProGRP31-98中位值為610.94 pg/mL，其中 ED-SCLC組ProGRP水平中位值為959.83 pg/mL，LD-SCLC組、NSCLC組、肺良性病變組、健康組分別為320.12pg/mL、30.17pg/mL、13.94pg/mL、13.81 pg/mL，經非參數檢驗，各組間血清ProGRP、NSE水平差異具有統計學意義（P<0.05），如下表1。

2.2 各組間血清ProGRP13-98及NSE檢測水平陽性率分析

NSCLC組與SCLC組間血清ProGRP13-98及NSE檢測水平陽性率分析可見，NSCLC組 CYFRA21-1陽性率較高，而SCLC組ProGRP13-98的陽性率為83.67%，NSE陽性率為71.4%，經比較具有顯著性差異（P<0.05），如下表2。

2.3 ProGRP13-98、NSE、CYFRA21-1、CEA對檢測SCLC的敏感性和特異性分析

NSE，ProGR13-98，ProGRP13-98+NSE與ProGRP13-98+NSE+CEA+CYFRA21-1組對SCLC組敏感性和特異性見表3，四個指標聯檢敏感性特異性高于單獨檢測，但與ProGRP13-98+NSE比較，差異無統計學意義。

2.4 SCLC患者臨床治療中ProGRP31-98水平分析

49例SCLC患者經治療37例完全緩解者治療后為34.29 pg/mL（），與治療前比較ProGRP31-98水平明顯下降（P<0.01）， 5例無變化者治療前449.84 pg/mL，治療后452.23 pg/mL。治療前后差異無統計學意義，7例病情進展者由治療前的522.05 pg/mL提高到831.95 pg/mL，ProGRP31-98水平明顯高于治療前（P<0.01）。

3 討論

按目前國際分類，可將SCLC分為局限期（Ⅰ期和Ⅱ期）和廣泛期（Ⅲ期和Ⅳ期），大部分的SCLC病患者就診時已是廣泛期，能早發現的腫瘤標記物中，ProGRP近年來倍受關注。胃泌素釋放肽（GRP）是一種由27個氨基酸組成的類似蛙皮素肽類物質，存在于胎兒及新生兒肺組織和原發性肺癌中，特別高表達于SCLC[5]組織，但由于GRP在血漿中半衰期很短，限制了其臨床應用，而GRP前體（Pro-Gastrin-Releasing Peptide）31-98片段含量穩定，經過證明能代表GRP的水平，適用于早期臨床檢測及治療追蹤監測，如上文結果：ED-SCLC組ProGRP水平中位值為959.83 pg/mL，而LD-SCLC組為320.12pg/mL，兩組間水平差異具有統計學意義（P<0.05）；除在肺癌患者組織中會有高表達外，ProGRP亦在神經內分泌系統腫瘤中有所增高。目前，日本等國家已將ProGRP作為常規的體檢項目運用于臨床，用于吸煙者等高危人群普查。

本次實驗中，SCLC組ProGRP31-98+NSE+ CYFRA21-1+CEA聯合檢測的敏感性為91.84%，特異性為95.57%，約登指數為87.41，四者聯合檢測有效提高診斷率。血清ProGRP31-98檢測除可作為SCLC確診指標外，還能用于監測SCLC治療效果、復發和預后情況，是復發監測敏感性最高的腫瘤標志物之一，在治療過程中，其下降水平與治療療效呈正相關，并與影像學監測有密切聯系[6-7]。治療后ProGRP水平保持穩定或顯著升高，提示治療無效或預示肺癌復發，臨床可再制定方案；同時，作為肺癌預后評估的重要指標，ProGRP13-98水平高則預示愈后不良；相關研究表明，與CEA、CYFRA 21-1、NSE、SCC等其他肺癌相關腫瘤標志物相比，ProGRP13-98占有優勢[8]，與NSE、CYFRA21-1、CEA聯合檢測可進一步提高敏感性[9-13]。本研究提示四個指標聯檢敏感性特異性高于單獨檢測，但與ProGRP13-98+NSE比較差異無統計學意義。

綜上所述，由于小細胞肺癌組織來源及病程發展過程的復雜性，單一腫瘤標志物的測定影響因素較多，因此臨床使用有一定局限性，選擇合適的腫瘤標志物進行早期聯合診斷，于病程發展的追蹤、療效的評估、復發及轉移的監測有諸多益處，以ProGRP31-98的高敏感度和高特異度，再加上NSE聯合檢測是較為理想的組合。

參 考 文 獻

[1] HATZAKIS K D，FROUDARAKIS M E，BOUROS D，et al.Prognostic value of serum tumor markers in patients with lung cancer.[J].Respiration（English Edition），2002，69（1）：25-29.

[2] FRANGOPOULOS F，PERROS I，SIMOU G，et al.Clc053 poster pro-gastrin-releasing peptide as a tumour marker of small-cell lung cancer： the first comparative evaluation with neuron-specific enolase in greek population[J].Lung Cancer，2007，55：13-13.

[3] MOLINA R，FILELLA X，AUG? J M.Progrp： a new biomarker for small cell lung cancer.[J].Clin Biochem，2004，37（7）：505-11.

[4] MOODY T W，PERT C B，GAZDAR A F，et al.High levels of intracellular bombesin characterize human small-cell lung carcinoma.[J].Science，1981，214（4526）：1246-1248.

[5] SPINDEL E R，CHIN W W，PRICE J，et al.Cloning and characterization of cdnas encoding human gastrin-releasing peptide.[J].Proc Natl Acad Sci U S A，1984，81（18）：5699-5703.

[6] 王莉，賈志凌，于忠和，等.血清Pro-GRP和NSE檢測在小細胞肺癌中的意義[J].臨床肺科雜志，2010，15（9）：1235-1236.

[7] 徐秀娟，陶敏，謝菁.CA125及CA724對晚期肺癌GP方案化療的預測價值[J].臨床肺科雜志，2011，16（2）：232-233.

[8] 金欣，陳建魁，佟雅麗，等.血清ProGRP對小細胞肺癌的診斷和療效判斷價值[J].軍事醫學科學院刊，2006，30（4）：354-356

[9] 李佳霖.血清NSE、ProGRP在小細胞肺癌患者診斷和復發的價值[J].中國實用醫藥，2013，8（16）：4-5.

[10] 趙先文，荊潔線，韓存芝，等.小細胞肺癌血清ProGRP（31-98）與神經元性烯醇化酶同步檢測的臨床價值及其相關性[J].腫瘤研究與臨床，2011，23（8）：518-521.

[11] 張苑，張婷.肺癌血腫瘤標志物相關研究進展[J].國際檢驗醫學雜志，2010，31（12）：1419-1421.

[12] 陳永健，金衛東，楊廣宇，等，血漿胃泌素釋放肽前體，細胞角質蛋白19和癌胚原對各型腫瘤的診斷價值[J].中華實驗和臨床病毒學雜志，2011，25（5）：381-383.

[13] 王慜杰，李學祥，高佳，等.血清ProGRP、TPS及NSE在小細胞肺癌患者治療監測中的應用[J].中華檢驗醫學雜志，2011，34（2）：152-157.