羅格列酮治療對膿毒癥肺損傷患者血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2影響研究

李強，吳建順，李慧

(青海省中醫院 急診科，青海 西寧 810000)

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羅格列酮治療對膿毒癥肺損傷患者血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2影響研究

李強，吳建順，李慧

(青海省中醫院 急診科，青海 西寧 810000)

目的 探討羅格列酮輔助治療對膿毒癥肺損傷患者血清高遷移率族蛋白-1(high mobility group box1，HMGB1)、TNF-α及Th1/Th2影響研究。方法 收集青海省中醫院2013年8月～2014年8月收治的60例膿毒癥肺損傷患者，按照用藥方法隨機分為實驗組和對照組，各30例。對照組給予常規西醫綜合對癥治療，包括重癥監護、胃腸減壓、禁食水、補充血容量、抗炎、維持水和電解質平衡、改善微循環等。實驗組在對照組治療基礎上給予患者羅格列酮，2次/天，2周為1個療程，于1、3、7、14 d對所有患者的血清血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2進行檢測。結果 治療后，與對照組相比，實驗組患者各指標均顯著改善，血清HMGB1水平降低顯著(P<0.05)；血清TNF-α水平降低較為顯著(P<0.05)；血清Th1/Th2比值降低顯著(P<0.05)。結論 羅格列酮輔助治療能夠顯著降低HMGB1、TNF-α水平及Th1/Th2比值。

羅格列酮；膿毒癥；肺損傷；HMGB1；TNF-α；Th1；Th2

膿毒癥是嚴重感染、重癥胰腺炎、重度燒傷、嚴重創傷及大手術后等常見并發癥，是由于各種病原體侵入感染體內組織器官，引起全身劇烈炎癥的反應綜合征[1]。膿毒癥時受損傷的臟器中，肺臟最易受累[2]，急性肺損傷(acute lung injury，ALI)在膿毒癥患者中發生率最高[3]，其頑固性的低氧血癥和呼吸窘迫是導致患者死亡的主要原因之一，病死率高達30%～50%[4]，嚴重威脅著人類的健康。目前對于膿毒癥患者臨床多采取抗感染、抗炎、抗休克以及呼吸、循環和營養支持等對癥治療的措施，療效并不顯著。羅格列酮屬于噻唑烷二酮類胰島素增敏劑，增加脂聯素基因表達及循環血中脂聯素水平。脂聯素(adiponectin，APN)為內源性活性蛋白，主要由脂肪組織特異性分泌，是重要的免疫反應負性調節因子[5]。研究已證實，APN具有保護心血管系統、抗慢性炎癥、改善胰島素抵抗及調節脂代謝等功能[6]。本文通過觀察脂聯素輔助治療對膿毒癥肺損傷患者血清高遷移率族蛋白-1(high mobility group box1，HMGB1)、TNF-α及Th1/Th2影響，來探究脂聯素輔助治療對膿毒癥肺損傷患者的療效?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集青海省中醫院收治的2013年8月～2014年8月收治的60例膿毒癥肺損傷患者，隨機分為實驗組和對照組。實驗組男15例，女15例，年齡 28～70 歲，平均年齡(50.35±11.85)歲；對照組30例，男14例，女16例，年齡 25～69 歲，平均年齡(49.47±10.38)歲。所有患者均符合《2008嚴重膿毒癥和膿毒癥休克管理指南》解讀(五)——膿毒癥誘導急性肺損傷/急性呼吸窘迫綜合征的機械通氣治療》[7]的診斷標準。

1.2 納入標準 所有患者年齡≥18歲及≤70歲；APACHE Ⅱ評分≥6分；無貧血，白血病等血液系統疾??；無肝臟，腎臟等臟器惡性腫瘤；所有患者同意進行實驗措施，并簽署知情同意書，本實驗獲得本院倫理協會批準，全程跟蹤隨訪。

1.3 排除標準 排除不符合上述診斷標準和納入標準者；排除孕婦或哺乳期婦女、兒童；排除病人處于瀕死狀態(估計在12 h內死亡)；排除伴有嚴重慢性臟器功能障礙疾??；排除已接受藥物或其他治療者。

1.4 方法

1.4.1 治療方法：對照組給予常規西醫綜合對癥治療，包括重癥監護、胃腸減壓、禁食水、補充血容量、抗炎、維持水和電解質平衡、改善微循環等。實驗組在對照組治療基礎上給予患者羅格列酮，2次/天，2周為一個療程。分別觀察并且記錄2組患者入院后1、3、7、14 d生命體征、常規檢查、臟器功能評價等各項指標變化情況。

1.4.2 患者血清HMGB1的水平測定：分別對所有患者于1、3、7、14 d早晨抽取外周靜脈血5 mL，離心取上清，采用生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測患者血清HMGB1的水平，嚴格按照HMGB1試劑盒說明書操作。

1.4.3 患者血清TNF-α的水平測定：分別對所有患者于1、3、7、14 d早晨抽取外周靜脈血5 mL，離心取上清，采用生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA)患者血清TNF-α水平，嚴格按照TNF-α試劑盒說明書操作。

1.4.4 患者血清Th1/Th2的水平測定：分別對所有患者于1、3、7、14 d早晨抽取外周靜脈血5 mL，采用放射免疫法檢測患者外周血Th1、Th2水平，并計算其比值。

2 結果

2.1 患者一般情況比較 實驗組與對照組患者在男女比例，平均年齡和APACHE Ⅱ評分等方面的資料差異無統計學意義。見表1。

表1 2組患者一般情況表±s)Tab.1 Comparison of the baseline of two ±s)

2.2 治療前后患者HMGB1水平比較 治療后，2組患者的HMGB1水平均呈下降趨勢，與前一時間點比較，后一時間點HMGB1水平較低(P<0.05)，與對照組相比，同一時間點實驗組HMGB1水平較低(P<0.05)。見表2。

表2 治療前后患者HMGB1水平比較Tab.2 Comparison of HMGB1 of two groups pre- and ±s)

*P<0.05，與前一時間點比較，compared with previous time；#P<0.05，與對照組相比，compared with control group

2.3 治療前后患者TNF-α的水平比較 治療后，2組患者的TNF-α水平均呈下降趨勢，與前一時間點比較，后一時間段TNF-α水平較低(P<0.05)，與對照組相比，同一時間段實驗組TNF-α水平較低(P<0.05)。見表3。

表3 治療前后患者TNF-α水平比較Tab.

*P<0.05，與前一時間點比較，compared with previous time；#P<0.05，與對照組相比，compared with control group

2.4 治療前后患者Th1/Th2的水平比較 治療后，2組患者的Th1/Th2水平均呈下降趨勢，與前一時間點比較，后一時間段Th1/Th2水平較低(P<0.05)；與對照組相比，同一時間段實驗組Th1/Th2水平較低(P<0.05)。見表4。

表4 治療前后患者Th1/Th2水平比較Tab.4 Comparison of Th1/Th2 of two groups pre- and ±s)

*P<0.05，與前一時間點比較，compared with previous time；#P<0.05，與對照組相比，compared with control group

3 討論

膿毒癥的發病率逐年遞增，其中急性肺損傷和急性呼吸窘迫綜合征是目前臨床上膿毒癥患者死亡的主要原因。膿毒癥的發生與免疫功能失衡密切相關[8]。細菌和內毒素等侵入腸道血液循環，機體免疫系統被過度激活，而從引起全身性炎癥反應綜合征。膿毒癥可繼發多器官損害等嚴重疾病，其大量釋放的炎性細胞首先侵襲肺臟，并引發急性肺損傷。內毒素是膿毒癥急性肺損傷全身性炎癥反應的觸發劑，多種免疫指標參與免疫抑制及調節。免疫細胞釋放促炎細胞因子，從而啟動炎癥級聯反應。研究表明，羅格列酮可顯著提高膿毒癥小鼠的生存率，抑制晚期炎癥介質HMGB1的表達，促進脂聯素的分泌[9]。脂聯素是多種生物學活性的分泌型蛋白，屬于免疫負性調節因子[10]，可通過抑制致炎因子的釋放，實現其抗炎作用。

HMGB1是相對于TNF-α的晚期促炎癥因子。晚期糖基化終產物受體(receptor for advanced gly-cation end products，RAGE)是HMGB1的主要受體，在正常組織中RAGE低表達，在T細胞、巨噬細胞等炎性細胞中高表達。HMGB1分泌后與RAGE在細胞表面結合，激發細胞內多種信號轉導機制，從而使細胞釋放其他因子，導致機體損傷。本研究結果顯示，治療后，與治療前相比，2組患者的HMGB1水平均顯著降低(P<0.05)；與對照組水平相比，實驗組患者的HMGB1水平降低較明顯(P<0.05)。有研究顯示，膿毒癥所導致的死亡常發生致炎癥細胞因子恢復正常水平8h后，巨噬細胞開始分泌HMGB1，HMGBl可以激活單核/巨噬細胞，釋放細胞因子，如TNF-α、IL-β和IL-6等，釋放的細胞因子又可進一步激活單核/巨噬細胞，形成正反饋反應。HMGB1其胞外功能依賴B Box結構域，而單獨的A Box肽段則可以抑制HMGBl或B Box肽段的作用。HMGB1不僅參與了膿毒癥、急性肺損傷等急性炎癥過程，而且參與了類風濕性關節炎(rheumtoid arthritis，RA)、系統性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus，SLE)等自身免疫性炎癥過程。在炎癥反應中，HMGB1可以促進中性粒細胞黏附于血管內皮，進而滲出到炎癥部位發揮抗炎作用，并且發現這種作用依賴于RAGE和B2整合素MACF-1[11]。

膿毒癥早期機體可以產生大量的TNF-α、IFN-γ/IL-2等炎癥細胞因子，炎癥細胞因子TNF-α、IL-1β在膿毒癥中是最早釋放的因子之一，故稱前炎癥期細胞因子[12]。巨趣細胞是細胞因子生成的主要來源之一，TNF-α不斷刺激活中性粒細胞和巨噬細胞等，炎癥細胞聚集并釋放炎癥細胞因子，產生“級聯放大作用”。本研究結果顯示，脂聯素輔助治療后，2組患者的TNF-α水平均顯著降低，與治療前相比，差異具有統計學意義(P<0.05)；治療后，與對照組水平相比，實驗組患者的TNF-α水平降低較明顯，差異具有統計學意義(P<0.05)。可見，脂聯素可以有效地降低TNF-α的水平，抑制淋巴細胞的凋亡，調節免疫系統的紊亂,從而對膿毒癥肺損傷患者產生保護作用。

T輔助細胞(Th)根據功能不同分為Th1和Th2 2個亞群，Th1和Th2可反映機體細胞免疫功能狀態，Th1細胞分泌IFN-γ、IL-2、IL-6、IL-8等，增強宿主對微生物感染的防御功能。Th2 細胞分泌IL-4、IL-5、IL-6等，對微生物感染起負性調節作用。Th1淋巴細胞和Th2淋巴細胞分別通過各自產生的細胞因子發揮相互調節和相互制約作用。Th1/Th2平衡變化是體內炎癥反應與抗炎反應免疫平衡變化的基礎，反映了機體細胞免疫功能。本實驗結果顯示，膿毒癥肺損傷的患者Th1/Th2比值明顯較高，經脂聯素輔助治療后，2組患者的Th1/Th2比值均顯著降低(P<0.05)；與對照組水平相比，實驗組患者的Th1/Th2比值降低較明顯(P<0.05)。Th1/Th2平衡向Th2方向漂移提示膿毒癥肺損傷出現免疫抑制，出現以Th2為主的免疫反應及淋巴細胞的凋亡。有研究證實，脂聯素可以調控IL-6和IL-10的表達[13]，本研究實驗組患者治療后Th1/Th2比值明顯降低，提示可能通過調控IL-6和IL-10的水平而降低了Th1/Th2比值。

本研究通過探究羅格列酮輔助治療對膿毒癥肺損傷患者血清HMGB1、TNF-α及Th1/Th2影響，證實了羅格列酮輔助治療能夠顯著降低HMGB1、TNF-α水平及Th1/Th2比值。本實驗得出的結論及反映的現象將在下一步研究中進一步論證。

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(編校：王冬梅)

Effect of rosiglitazone on serum HMGB1, TNF-α and Th1/Th2 in patients with lung injury induced by sepsis

LI Qiang, WU Jian-shun, LI Hui

(Department of Emergency, Traditional Chinese Medicine Hospital of Qinghai Province, Xining 810000, China)

ObjectiveTo investigate the effect of rosiglitazone on serum HMGB1,TNF-α and Th1/Th2 in patients with lung injury induced by sepsis.Methods60 patients with sepsis lung injury in our hospital from August 2013 to August 2014, were randomly divided into experimental group and control group according to the medication methods, 30 cases in each group, control group was given conventional western medicine treatment, including intensive care, gastrointestinal decompression, fasting water, added blood volume, anti-inflammatory, maintenance of water and electrolyte balance, improve microcirculation, etc. On the basis of control group, experimental group was treated with rosiglitazone, two times per day, two weeks as a course of treatment. Serum HMGB1, TNF-α, Th1/Th2 were detected in 1, 3, 7, 14 days in all patients.ResultsCompared with control group post-treatment,serum HMGB1,TNF-α and Th1/Th2 ratio were significantly decreased in the experimental group (P<0.05).ConclusionRosiglitazone can significantly reduce the levels of serum HMGB1,TNF-α and Th1/Th2.

rosiglitazone; sepsis; lung injury; HMGB1; TNF-α; Th1; Th2

李強，男，本科，副主任醫師，研究方向：急診危重病，E-mail：qinghailiqiang@163.com。

R563

A

1005-1678(2015)08-0095-03