鹽酸伊立替康注射液對直腸癌晚期患者血清GPX3及腫瘤組織液WISP2、FGFBP1的影響

張占東，楊巍，孔燁，馬二民，張斌，路明，花亞偉

(1.鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院，河南省腫瘤醫(yī)院 普外科，河南 鄭州 450008；2.鄭州人民醫(yī)院 普外科，河南 鄭州 450000；3.博愛縣人民醫(yī)院 普外科，河南 焦作 454450)

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鹽酸伊立替康注射液對直腸癌晚期患者血清GPX3及腫瘤組織液WISP2、FGFBP1的影響

張占東1，楊巍1，孔燁1，馬二民2，張斌1，路明3，花亞偉1

(1.鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院，河南省腫瘤醫(yī)院 普外科，河南 鄭州 450008；2.鄭州人民醫(yī)院 普外科，河南 鄭州 450000；3.博愛縣人民醫(yī)院 普外科，河南 焦作 454450)

目的 探討鹽酸伊立替康注射液對直腸癌晚期患者血清谷胱甘肽過氧化物酶3(glutathione peroxidase 3，GPX3)、腫瘤組織液中WNT1誘導信號通道蛋白2(WNT1 inducible signaling pathway protein 2，WISP2)及成纖維細胞生長因子結合蛋白1(fibroblast growth factor binding protein 1，FGFBP1)的影響。方法 選取鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院已確診為晚期直腸癌患者90例，隨機分為實驗組和對照組，對照組給予奧沙利鉑+亞葉酸鈣+氟尿嘧啶化療方案，實驗組給予奧沙利鉑+亞葉酸鈣+鹽酸伊立替康化療方案，每4周重復1次，共6次。治療前后分別檢測2組患者的血清GPX3蛋白含量、腫瘤組織液WISP2、FGFBP1蛋白水平，評價臨床療效。結果 與對照組比較，實驗組患者血清GPX3蛋白含量明顯升高(P<0.05)；腫瘤組織液WISP2蛋白水平顯著升高(P<0.05)；腫瘤組織液FGFBP1蛋白水平顯著降低(P<0.05)；實驗組的總有效率為明顯高于對照組(64.44% vs.42.22%；χ2=4.46，P<0.05)，實驗組的臨床獲益率明顯高于對照組(93.33% vs.75.56%；χ2=5.41，P<0.05)。結論 鹽酸伊立替康注射液能夠使直腸癌晚期患者血清WISP2、腫瘤組織液GPX3表達水平升高，腫瘤組織液FGFBP1表達水平降低，具有良好的臨床療效。

伊立替康；晚期直腸癌；谷胱甘肽過氧化物酶3； WNT1誘導信號通道蛋白2；成纖維細胞生長因子結合蛋白1

直腸癌主要是由于直腸組織的細胞病變后不斷增長而引發(fā)的惡性腫瘤，是臨床最常見的消化道惡性腫瘤之一[1]。資料顯示[2]，結直腸癌在美國常見的癌癥中排第3位，居死亡原因的第2位。我國2007年新病例接近120萬，死亡63萬，分別比2000年增加27%和28%，平均年增加3.9%和4.0%，呈逐年增加趨勢[3]。直腸癌早期臨床癥狀不明顯，出現便血、膿血便、排便梗阻、惡病質等表現時多已到腫瘤晚期，晚期直腸癌已失去手術機會[4]。目前臨床上多采用全身化療抑制病情發(fā)展，5-氟尿嘧啶(5-Fu)是目前治療晚期直腸癌的主要藥物，通常作為一線治療[5]，但是其不良反應較多，容易產生耐藥性，往往治療失敗，因此，尋找其他化療藥物成為目前研究的重點。已有研究顯示[6]，伊立替康(CPT-11)是近年來發(fā)現的抗腫瘤藥物，屬于廣譜抗癌藥，能夠抑制拓撲異構酶1，既往多用于對5-Fu產生耐藥性的患者的二線化療，關于其用于一線化療的相關研究較少。因此，本研究通過對直腸癌晚期患者體內WISP2、GPX3和FGFBP1的變化，以及藥物的臨床療效，探討伊立替康對晚期直腸癌的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集鄭州大學附屬腫瘤醫(yī)院2013年6月～2015年1月的確診為晚期直腸癌的患者90例。將所有患者隨機分為實驗組和對照組，每組各45例。實驗組男性29例，女性16例，年齡30～80歲，平均(53.6±8.1)歲；對照組男性30例，女性15例，年齡29～79歲，平均(52.4±8.3)歲；2組在年齡、性別組成、病情方面無明顯差異。該研究經過倫理委員會批準，并獲患者知情同意。納入標準：經組織病理學檢查確診為晚期直腸癌，且病灶無法經手術切除。排除標準：①患有其他惡性腫瘤；②合并胸水、腹水、腸梗阻、腸穿孔等嚴重并發(fā)癥；③近3個月存在胃腸道出血，凝血功能異常；④存在惡病質；⑤有活動性感染；⑥對研究藥物具有抗藥性或者不能耐受化療的患者。

1.2 方法

1.2.1 治療方法：對照組給予奧沙利鉑(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國藥準字H20050962)100 mg/m2，d1+亞葉酸鈣(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國藥準字H20023636)200 mg/m2，d1+氟尿嘧啶(亞寶藥業(yè)集團股份有限公司，國藥準字H20057995)500 mg/ m2，d1～d5化療方案，每4周重復1次，共6次；實驗組給予奧沙利鉑100 mg/m2，d1+亞葉酸鈣400 mg/m2，d1+鹽酸伊立替康注射液(江蘇恒瑞醫(yī)藥股份有限公司，國藥準字H20040711)180 mg/m2，d1化療方案，每4周重復1次，共6次。

1.2.2 血清指標采集：所有研究對象在治療前后分別取空腹靜脈血5 m，然后分離血清，選用谷胱甘肽過氧化物酶3(glutathione peroxidase 3，GPX3)檢測試劑盒(上海一研生物科技有限公司)進行檢測；分別于治療前后在直腸鏡下取患者癌組織，剪碎，放入1～2 mL勻漿器中，使用勻漿器反復勻漿，加入400 μL裂解液，裂解30 min后，將裂解液移入1.5 mL離心管，在4 ℃下12000 r/min離心5 min，制備腫瘤組織液，置于-20 ℃保存?zhèn)溆茫x用WNT1誘導信號通道蛋白2(WNT1 inducible signaling pathway protein 2，WISP2)ELISA試劑盒(上海紀寧實業(yè)有限公司)、成纖維細胞生長因子結合蛋白1(fibroblast growth factor binding protein 1，FGFBP1)檢測試劑盒(武漢云克隆科技股份有限公司)進行檢測。嚴格按照試劑盒說明，利用雷杜Rayto RT-6000全自動酶標儀，通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA法)檢測血清中GPX3含量、組織液中IGFBP1、WISP2蛋白含量。

1.2.3 療效評價：所有患者治療前后均進行全面檢查，根據實體瘤療效評價標準(response evaluation criteria in solid tumors，RECIST)療效評定標準對治療效果進行評價[7]，分為完全緩解(complete response，CR)，部分緩解(partial response，PR)，疾病穩(wěn)定(stable disease，SD)，疾病進展(progressive disease，PD)。(CR+PR)%為總有效率，(CR+PR+SD)%為臨床獲益率。

2 結果

2.1 治療前后2組患者血清GPX3蛋白含量比較 治療后2組患者GPX3蛋白含量明顯高于治療前(P<0.05)。與對照組比較，實驗組患者血清GPX3蛋白含量明顯升高(P<0.05)。見表1。

表1 治療前后2組患者血清GPX3蛋白含量比較±s)Tab.1 Comparison of serum GPX3 content between two ±s)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 治療前后2組患者腫瘤組織液中WISP2蛋白含量比較 治療后2組患者WISP2蛋白含量指標明顯高于治療前(P<0.05)。與對照組比較，實驗組患者血清WISP2蛋白含量明顯升高(P<0.05)。見表2。

組別 例數時間WISP2(mg/mL)對照組45治療前8.27±1.65治療后12.87±2.56*實驗組45治療前8.36±1.86治療后16.37±2.76*#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 治療前后2組患者組織液FGFBP1蛋白含量比較 治療后2組患者FGFBP1蛋白含量指標明顯低于治療前(P<0.05)。與對照組比較，實驗組患者血清FGFBP1蛋白含量明顯降低(P<0.05)。見表3。

組別 例數時間FGFBP1(mg/mL)對照組45治療前42.48±5.97治療后20.38±2.42*實驗組45治療前42.58±6.13治療后14.38±2.01*#

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.4 2組患者臨床療效比較 實驗組的總有效率為64.44%，明顯高于對照組的42.22%(χ2=4.46，P<0.05)；實驗組的臨床獲益率為93.33%，明顯高于對照組的75.56%(χ2=5.41，P<0.05)。見表4。

表4 2組患者臨床療效比較[n(%)]Tab.4 Comparison of efficacy between two groups[n(%)]

#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

結直腸癌是常見的惡性腫瘤之一，過去數十年間，全球結直腸癌年發(fā)病例數超萬，發(fā)病呈上升趨勢[8]。目前，對于直腸癌的治療，早期多采用手術根治療法，取得了良好的臨床療效，但由于直腸癌早期臨床癥狀不明顯，發(fā)現時多已不適合手術治療，只能通過化療減緩病情發(fā)展，提高患者的生活質量。資料顯示[9]，FOLFOX方案(氟尿嘧啶、亞葉酸鈣聯(lián)合奧沙利鉑)是臨床上較常用的治療晚期直腸癌的方案，但是氟尿嘧啶需要靜脈輸注，易引起感染等相關并發(fā)癥，而且腫瘤組織容易產生耐藥性。伊立替康是由美國FDA批準的治療晚期結直腸癌的藥物，能夠抑制DNA拓撲異構酶1，研究表明[10]，其在機體內與羧酸酯酶反應，產生SN-38，SN-38和伊立替康均能夠導致DNA損傷，產生細胞毒性，抑制腫瘤細胞的生長，促進其凋亡，發(fā)揮抗腫瘤作用。體外研究顯示[11]，伊立替康對離體的人結直腸癌HCT-116細胞仍能發(fā)揮細胞毒性作用。在本實驗中，通過觀察2組患者患者體內WISP2、GPX3和FGFBP1的變化，以及藥物的臨床療效，探討伊立替康應用于晚期直腸癌的療效。

本研究結果發(fā)現，實驗組患者血清GPX3蛋白含量與對照組比較明顯升高(P<0.05)，提示伊立替康能夠促進GPX3的表達。GPX3屬于谷胱甘肽過氧化物酶家族的一員，具有清除人體內過氧化物的作用，能夠減少機體內過多的活性氧(reactive oxygen species，ROS)。ROS能夠使氧化應激過程加劇，損傷細胞及DNA，引起基因突變，產生腫瘤細胞，曾有研究報道[12]，GPX3在結腸癌、食管癌、胃癌等多種消化道腫瘤中表達異常，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展關系密切。本研究結果表明，實驗組血清GPX3蛋白含量高于對照組(P<0.05)，提示伊立替康能夠上調GPX3基因的表達，促使其發(fā)揮抗氧化應激、抗基因突變的作用。

WISP2為連接組織生長因子，具有介導細胞信號轉導的作用，能夠抑制細胞增殖，調控腫瘤細胞的生長，相關研究發(fā)現[13]，WISP2對腫瘤增殖起到負性調節(jié)的作用，屬于抑癌基因的一種，其在結腸癌組織的表達較正常組織呈現下調現象，腫瘤的發(fā)生發(fā)展與其低表達有關。本研究結果顯示，實驗組患者腫瘤組織液WISP2蛋白含量與對照組比較明顯升高(P<0.05)，提示伊立替康能夠使WISP2的表達上調，增強抑癌效果。

FGFBP1最初來源于表皮鱗狀細胞癌株，屬于成纖維細胞生長因子家族，資料顯示其在人肺癌組織及細胞系呈現高表達[14]，FGFBP1上調能夠促進腫瘤細胞增長，還能夠促進新生血管的發(fā)生，使得腫瘤組織血液供養(yǎng)豐富，有利于腫瘤細胞的生長、增殖以及轉移。本研究結果顯示，實驗組患者血清FGFBP1蛋白含量與對照組比較明顯降低(P<0.05)，提示伊立替康有下調FGFBP1表達的作用，能夠通過降低FGFBP1蛋白的表達水平來抑制腫瘤發(fā)展。本研究結果顯示，實驗組的總有效率及臨床獲益率均明顯高于對照組(均P<0.05)，這與趙得平等[15]報道，利用伊立替康聯(lián)合卡培他濱治療原發(fā)性及轉移性結腸癌患者46例，腫瘤控制率達到70.6%～75.9%的結果相類似。

本實驗通過對90例晚期直腸癌患者血清GPX3蛋白含量、腫瘤組織液WISP2、FGFBP1蛋白水平，臨床療效等結果進行分析，證實了鹽酸伊立替康注射液能夠使直腸癌晚期患者體內WISP2、GPX3表達水平升高，FGFBP1表達水平降低，具有良好的臨床療效。

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(編校：王儼儼)

Effect of irinotecan hydrochloride injection on serum GPX3 and WISP2, FGFBP1 in tumor tissue fluid of patients with advanced rectal cancer

ZHANG Zhan-dong1, YANG Wei1, KONG Ye1, MA Er-min2, ZHANG Bin1, LU Ming3, HUA Ya-wei1

(1.Department of General Surgery, The Affiliated Cancer Hospital of Zhengzhou University, Henan Cancer Hospital, Zhengzhou 450008, China; 2.Department of General Surgery, Zhengzhou People’s Hospital, Zhengzhou 450000, China; 3.Department of General Surgery, Boai Xian Ren Min Yi Yuan, Jiaozuo 454450, China)

ObjectiveTo analyse the effect of irinotecan hydrochloride injection on serum glutathione peroxidase 3 (GPX3), and WNT1 induced signaling pathway protein 2 (WISP2) and fibroblast growth factor binding protein 1 (FGFBP1) in tumor tissue fluid of patients with advanced rectal cancer.Methods90 patients who were diagnosed with advanced rectal cancer in the hospital were collected.All patients were randomly divided into experimental group and control group,control group were treated with oxaliplatin + calcium folinate + fluorouracil chemotherapy, and experimental group were treated with oxaliplatin + calcium folinate + irinotecan hydrochloride injection chemotherapy. The treatment were repeated every four weeks, a total of six times.The serum GPX3 content, and WISP2, FGFBP1 levels in tumor tissue fluid were detected in two groups pre-and post treatment.The clinical efficacy was evaluated.ResultsCompared with control group, the serum level of GPX3 in experimental group increased significantly (P<0.05); WISP2 level in tumor tissue fluid of experimental group increased significantly (P<0.05); FGFBP1 level in tumor tissue fluid of experimental group decreased significantly (P<0.05).The total efficiency of experimental group was higher than that of control group(64.44% vs.42.22%；χ2=4.46，P<0.05), and the clinical benefit rate of experimental group was significantly higher than that of control group(93.33% vs.75.56%；χ2=5.41，P<0.05).ConclusionThe irinotecan hydrochloride injection could increased levels of serum GPX3 and WISP2 in tumor tissue fluid, reduce FGFBP1 level in tumor tissue fluid, which has good clinical curative effect.

irinotecan; advanced rectal cancer; glutathione peroxidase 3; WNT1 inducible signaling pathway protein 2; fibroblast growth factor binding protein 1

張占東，男，碩士，主治醫(yī)師，研究方向：胃腸腫瘤，E-mail：hnzhangzhandong@163.com。

R735.3

A

1005-1678(2015)08-0098-04