干細胞移植對缺血性腦卒中患者血清同型半胱氨酸、CRP及BDNF含量影響研究

蔡謀善，沈春林，曾令海，黃肖群，宋承偉

(宜昌市第一人民醫院/三峽大學人民醫院 神經內科，湖北 宜昌 443000)

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干細胞移植對缺血性腦卒中患者血清同型半胱氨酸、CRP及BDNF含量影響研究

蔡謀善Δ，沈春林，曾令海，黃肖群，宋承偉

(宜昌市第一人民醫院/三峽大學人民醫院 神經內科，湖北 宜昌 443000)

目的 探討干細胞移植對缺血性腦卒中患者血清同型半胱氨酸(homocysteine，Hcy)、C反應蛋白(C reactive protein，CRP)及腦源性神經生長因子(brain derived neurotrophic factor，BDNF)含量的影響。方法 收集宜昌市第一人民醫院收治的缺血性腦卒中患者42例，隨機分為實驗組和對照組，每組各21例，對照組給予常規治療，實驗組在常規治療基礎上給予自體骨髓間充質干細胞移植治療，治療結束后，對所有患者的血清Hcy、CRP、BDNF水平及臨床療效情況進行檢測。結果 治療后，與對照組比較，實驗組患者的血清Hcy水平較低，差異具有統計學意義(P<0.05)；實驗組患者的血清CRP水平較低(P<0.05)；實驗組患者的BDNF水平較高(P<0.05)；實驗組患者的實驗組患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer評分較高(P<0.05)。結論 干細胞移植能夠顯著降低缺血性腦卒中患者血清Hcy、CRP水平，提高血清BDNF含量，提高治療效果。

干細胞移植；缺血性腦卒中；同型半胱氨酸；CRP；BDNF

缺血性腦卒中是指由于各種原因導致的腦供血動脈狹窄或阻塞，而引起的局部腦組織缺血、缺氧、壞死的疾病。目前國際上公布的病因分型方法已有十余種，主要包括：類肝素藥物治療急性缺血性腦卒中實驗(treatment of acute ischemic stroke with heparin like drugs，TOAST)分型、英國南倫敦改良TOAST分型、美國SSS-TOAST分型、韓國改良TOAST分型等[1]，而且有年輕化的趨勢。腦卒中以其高發病率、致死、致殘率給患者及社會帶來沉重的負擔[2-3]。因此，采用合理的治療方法改善患者預后尤為重要[4]。目前，對于缺血性腦卒中的治療，臨床上多采用改善腦供血、抗血小板聚集、營養腦細胞、控制血壓血糖等對癥治療的方案[5]，對于疾病的復發有一定的預防作用，但是對于已經缺血壞死的神經細胞以及神經功能的損傷療效甚微。干細胞移植治療是一種新的治療手段，主要針對受損神經細胞的修復與再生，已有研究顯示[6]，干細胞有促進缺血性腦卒中患者大腦功能恢復的效果；然而，目前相關的臨床研究較少。因此，本研究通過對治療前后患者血清Hcy、CRP、BDNF水平及臨床療效進行分析研究，探討干細胞移植對缺血性腦卒中患者的影響。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集宜昌市第一人民醫院2014年1月～2015年1月的確診為缺血性腦卒中的患者42例。其中男性27例，年齡50～77歲，平均年齡(60.1±7.2)歲；女性15例，年齡53～80歲，平均年齡(62.3±6.8)歲。病程為20 d～3個月，平均病程(1.75±0.85)月。

診斷標準：診斷依據根據全國第五屆腦血管病學術會議關于缺血性腦卒中的診斷標準[7]，并經頭CT平掃或MRI確診； 排除標準：①缺血性腦卒中發病的急性期；②既往存在腦梗死、腦出血病史；③合并惡性腫瘤；④嚴重的心血管疾病、肝腎功能衰竭等；⑤合并意識障礙或其他神經、精神系統疾病的患者；⑥存在禁忌癥，無法進行腰椎穿刺的患者。

1.2 方法

1.2.1 分組及治療方法：采用隨機數字表，將所有的患者分為實驗組和對照組，每組各21例，實驗組男性14例，女性7例，年齡53～80歲，平均年齡(61.4±6.7)歲，病程0.8～2.4年，平均病程(1.70±0.73)年；對照組男性13例，女性8例，年齡54～80歲，平均年齡(62.7±6.9)歲，病程0.7～2.3年，平均病程(1.75±0.81)年；2組患者的年齡、性別、病程、基本病情等資料差異無統計學意義。對照組患者給予改善腦供血、保護腦細胞、抗血小板聚集、控制血壓、血糖、康復訓練等常規治療；實驗組在常規治療的基礎上，進行自體骨髓間充質干細胞靜脈注射移植治療，移植細胞數量為每次(5～20)×107個，1次/周，共治療3次。

1.2.2 血清指標采集及測量：所有研究對象均于治療前后采集空腹12小時后靜脈血5 mL，然后分離血清，采用DELTA全自動全血CRP檢測儀(上海希亞克診斷用品有限公司)，通過免疫透射比濁法檢測C反應蛋白(CRP)含量；采用Thermo MK3酶標儀(賽默飛世爾)，嚴格按照說明書操作，采用酶聯免疫分析法(ELISA)檢測血清中同型半胱氨酸(Hcy)、腦源性神經生長因子(BDNF)水平。

1.2.3 臨床療效評估：根分別于治療前以及治療6個月后，根據功能獨立性評定量表(FIM)、日常生活能力量表(ADL)以及Fugl-Meyer神經功能評測法，對所有患者的臨床治療效果進行評估。

2 結果

2.1 治療前后2組患者血清Hcy水平比較 治療后，2組患者的血清Hcy水平與治療前比較，均顯著降低(P<0.05)；實驗組患者的血清Hcy水平明顯低于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 治療前后2組患者血清Hcy水平比較Tab.1 Comparison of level of Hcy in serum between two ±s,μmol/L)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.2 治療前后2組患者血清CRP水平比較 治療后，2組患者的血清CRP水平與治療前比較，均顯著降低(P<0.05)；實驗組患者的血清CRP水平明顯低于對照組(P<0.05)。見表2。

表2 治療前后2組患者血清CRP水平比較Tab.2 Comparison of the level of CRP in serum between two ±s, mg/L)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.3 治療前后2組患者血清BDNF水平比較 治療后，2組患者的血清BDNF水平與治療前比較均顯著升高(P<0.05)；實驗組患者的血清BDNF水平明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表3。

表3 治療前后2組患者血清BDNF水平比較Tab.3 Comparison of the level of BDNF in serum between two ±s, μmol/L)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

2.4 治療前后2組患者FIM、ADL、Fugl-Meyer評分比較 治療后，2組患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer評分與治療前比較均顯著改善(P<0.05)；實驗組患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer評分均明顯高于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 治療前后2組患者FIM、ADL、Fugl-Meyer評分比較，分)Tab.4 Comparison of FIM， ADL and Fugl-Meyer of two ±s, score)

*P<0.05，與同組治療前比較，compared with the same group pre-treatment；#P<0.05，與對照組治療后比較，compared with control group post-treatment

3 討論

近年來，腦卒中的日益年輕化引起了醫學界廣泛的關注。多項研究指出青年腦卒中患者中以缺血性腦卒中為主體。有研究報道，發達國家的青年缺血性腦卒中病因中動脈夾層分離和心源性因素占有重要地位[8]。血性腦卒中以局部腦組織缺血、缺氧、壞死為主要的病理基礎，缺血缺氧的部位可以通過藥物干預擴張血管來改善局部循環，而壞死部分的損傷在很大程度上是不可逆的，這也是導致患者認知、運動功能障礙的主要原因，NIHSS評分、PLT計數、BUN水平及ALB水平是影響缺血性腦卒中患者近期預后的主要因素[9]。隨著細胞學的發展，干細胞移植作為新的治療手段逐漸成為研究熱點。干細胞是具有高分化及增殖潛能的細胞，包括骨髓源性細胞、人胚胎干細胞、內皮祖細胞、誘導多能干細胞等[10]，其中骨髓間充質干細胞具有易獲得、可自體移植等優點，目前研究較多。有研究顯示[11]，移植的干細胞一方面通過促進壞死組織血管、神經結構再生來恢復損傷部位的完整性，另一方面，干細胞還可以刺激各種營養因子的分泌，促進血管、神經細胞的再生，修復損傷，從而對缺血性腦卒中起到治療作用。在本實驗中，筆者通過對患者血清相關指標以及臨床療效的分析研究，來探討干細胞移植對缺血性腦卒中患者的治療效果以及其作用機理。

研究結果發現，治療后，實驗組患者的血清Hcy水平明顯低于對照組(P<0.05)，證實了干細胞移植能夠降低患者血清Hcy的水平，減少Hcy對血管的損傷作用。曾有研究報道，高Hcy血癥是心腦血管病的獨立危險因素[12]。Hcy是蛋氨酸代謝產生的含硫氨基酸，在正常人血清中含量很低，而在心腦血管病患者體內Hcy水平明顯較高。Hcy含有還原性巰基，容易氧化生成氧自由基損害血管內皮細胞，同時能夠促進平滑肌增殖、與低密度脂蛋白產生協同作用、抑制抗凝和纖溶系統的功能，從而加速血管動脈粥樣硬化的進程，血清Hcy水平的升高與缺血性腦卒中發生的風險增加密切相關[13]。

CRP也是評價缺血性腦卒中預后的重要指標，反映動脈粥樣硬化的進展。CRP是一種炎癥反應標志物，而動脈周揚樣硬化斑塊的形成與炎癥反應關系密切，由于各種原因導致的血管內皮損傷，能夠促進炎癥相關因子的合成分泌，促進淋巴細胞、中性粒細胞等的聚集，引起巨噬細胞活化，同時促進血小板聚集形成血栓，加速動脈硬化進程，另外，這些炎癥因子也能引發腦卒中后的神經元損傷。研究表明[14]，腦卒中患者血清CRP水平升高，可以用來評估患者預后。本研究結果顯示，治療后實驗組患者的血清CRP水平明顯低于對照組(P<0.05)，表明干細胞移植能夠降低缺血性腦卒中患者體內的炎癥反應。

BDNF是一種腦源性的神經營養因子，具有促進神經細胞分化、生長、增殖的作用。研究發現[15]，BDNF參與腦缺血損傷的保護過程，一方面可以促進超氧化物歧化酶等的產生，以消除氧化應激反應對于神經細胞的損害，防止神經細胞凋亡；另一方面，又能直接作用于血管內皮及神經元，促進血管及神經的再生，恢復神經功能。本研究結果顯示，治療后，實驗組患者的血清BDNF水平明顯高于對照組(P<0.05)，表明干細胞移植能夠促進缺血性腦卒中患者BDNF的合成分泌，起到腦保護作用。

FIM、ADL、Fugl-Meyer評分都是評估缺血性腦卒中療效的常用指標，FIM 量表可以用來評估患者生活自理、活動、行動、理解交流、社會認知、括約肌控制方面的能力，ADL可以評價患者日常生活活動的能力，Fugl-Meyer側重于對患者運動功能的評價。三種評價手段聯合使用，能夠更全面準確的評估對患者的臨床療效。本研究結果顯示，治療6個月后，實驗組患者的FIM、ADL、Fugl-Meyer評分均明顯高于對照組(P<0.05)，表明干細胞移植治療缺血性腦卒中患者具有良好的臨床效果。

本實驗通過對缺血性腦卒中患者血清同型半胱氨酸、CRP、BDNF水平及臨床療效檢測結果進行分析，證實了干細胞移植能夠顯著降低缺血性腦卒中患者血清Hcy、CRP水平，提高血清BDNF含量，提高治療效果，對臨床有指導意義。在下一步研究中，將進行安全性方面的研究，為干細胞移植更好的應用于缺血性腦卒中的治療提供依據。

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(編校：譚玲)

Effect of stem cell transplantation on serum homocysteine, CRP and BDNF in patients with ischemic stroke

CAI Mou-shanΔ, SHEN Chun-lin, ZENG Ling-hai, HUANG Xiao-qun, SONG Cheng-wei

(Department of Internal Medicine,Yichang First People’s Hospital/People’s Hospital of China Three Gorges University,Yichang 443000,China)

ObjectiveTo analysis the effect of stem cell transplantation on serum homocysteine(Hcy), C reactive protein(CRP) and brain derived neurotrophic factor(BDNF) in patients with ischemic stroke.Methods42 patients who were diagnosed with ischemic stroke in Yichang First People’s Hospital were collected.All patients were randomly divided into experimental group and control group, 21 cases in each group.The control group was treated with conventional therapy, and the experimental group was treated with autologous bone marrow mesenchymal stem cell transplantation for treatment on the basis of conventional therapy, after treatment, the serum levels of serum homocysteine, CRP, BDNF and clinical curative effect were detected in all patients.ResultsAfter treatment, compared with control group, the serum Hcy level was lower in the experimental group(P<0.05); the serum CRP level was lower in the experimental group (P<0.05); the serum BDNF level was higher in the experimental group (P<0.05); the FIM, ADL and Fugl-Meyer score were higher in the experimental group(P<0.05).ConclusionsThe stem cell transplantation can significantly reduce the serum Hcy and CRP levels in patients with ischemic stroke, increase the content of BDNF in serum, improve the therapeutic effect, and have a guiding significance for clinical.

stem cell transplantation; ischemic stroke; homocysteine; C reaction protein; brain derived neurotrophic factor

蔡謀善,通訊作者，男,本科,副主任醫師,研究方向:神經內科,E-mail:yichangcms@163.com。

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1005-1678(2015)09-0091-03