規(guī)模化豬場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果及分析

祖海濤　田青芳　趙曉南　金文杰　王愛(ài)國(guó)　朱連德

(1勃林格殷格翰動(dòng)物保健（中國(guó)）有限公司，北京100004；2江蘇省永康農(nóng)牧科技有限公司，江蘇常州213000；3揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)服務(wù)中心，江蘇揚(yáng)州225000）

豬病防控Swine Disease Prevention and Control

規(guī)模化豬場(chǎng)抗體檢測(cè)結(jié)果及分析

祖海濤1田青芳2趙曉南2金文杰3王愛(ài)國(guó)1朱連德1

(1勃林格殷格翰動(dòng)物保健（中國(guó)）有限公司，北京100004；2江蘇省永康農(nóng)牧科技有限公司，江蘇常州213000；3揚(yáng)州大學(xué)獸醫(yī)服務(wù)中心，江蘇揚(yáng)州225000）

疾病是制約生豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要因素之一。近年來(lái)，豬病錯(cuò)綜復(fù)雜，給診斷和防制帶來(lái)難度。及時(shí)開(kāi)展抗體檢測(cè)，可以了解豬場(chǎng)內(nèi)重大疾病的免疫水平或感染狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)疫病風(fēng)險(xiǎn)。本文對(duì)江蘇省某規(guī)模化豬場(chǎng)進(jìn)行了豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬病的血清學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行了分析。

豬瘟；藍(lán)耳病；偽狂犬病；抗體

疫病已經(jīng)成為制約生豬產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要瓶頸之一，尤其是豬瘟、藍(lán)耳病（PRRS）、偽狂犬病（PRV）等烈性傳染病。近年來(lái)，由于多方面的原因，生豬養(yǎng)殖業(yè)疫病控制面臨嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。豬群的飼養(yǎng)密度越來(lái)越大，豬只的抵抗力逐步降低，導(dǎo)致豬病越來(lái)越錯(cuò)綜復(fù)雜，給診斷和防制帶來(lái)很多困擾。為了解豬場(chǎng)內(nèi)重大疾病免疫水平或感染狀態(tài)，及時(shí)發(fā)現(xiàn)疫病風(fēng)險(xiǎn)，為重大疫病的預(yù)警、防控提供理論依據(jù)，更好地指導(dǎo)養(yǎng)豬生產(chǎn)，豬場(chǎng)通常會(huì)定期開(kāi)展抗體檢測(cè)。本文對(duì)江蘇省永康農(nóng)牧科技有限公司進(jìn)行了豬瘟、藍(lán)耳病、偽狂犬病的血清學(xué)系統(tǒng)檢測(cè)，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行了分析，現(xiàn)報(bào)告如下，供讀者參考。

1　材料和方法

1.1豬場(chǎng)的選擇

江蘇省永康農(nóng)牧科技有限公司，共存欄1 500頭母豬，實(shí)行單點(diǎn)式飼養(yǎng)管理模式，自繁自養(yǎng)，全進(jìn)全出。仔豬在3周齡斷奶，斷奶當(dāng)天轉(zhuǎn)入保育舍，10周齡轉(zhuǎn)入育肥舍，豬場(chǎng)生產(chǎn)成績(jī)很好，3年內(nèi)沒(méi)有暴發(fā)過(guò)烈性傳染性疾病。豬場(chǎng)位于江蘇常州朱林鎮(zhèn)，遠(yuǎn)離養(yǎng)殖高密度區(qū)，自然防疫條件較好。

豬場(chǎng)主要疫苗的免疫程序?yàn)椋簭?009年起，一直使用某進(jìn)口PRRSV弱毒疫苗（VR2332毒株）；進(jìn)口豬偽狂犬基因缺失疫苗（Bartha-K61株）；高效豬瘟細(xì)胞苗。

PRRS免疫程序：母豬、公豬普免3次/年，后備母豬在配種前免疫2次，仔豬14日齡免疫，免疫劑量均為1頭份/次。

豬瘟免疫程序：母豬哺乳期跟胎免疫，公豬普免3 次/年，后備母豬在配種前免疫2次，仔豬4周齡、8周齡免疫2次，免疫劑量均為1頭份/次。

PRV免疫程序：母豬、公豬普免3次/年，后備母豬在配種前免疫2次，仔豬9周齡免疫1次，免疫劑量均為1頭份/次。

1.2采樣方案

隨機(jī)采集不同階段豬只的血液，每個(gè)階段豬只采集5份血樣。血液采集后，分離血清，送合作實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，采血方案見(jiàn)表1。該豬場(chǎng)為種豬場(chǎng)，公豬的更新率較高，故本次采集血樣公豬的年齡均為2年以內(nèi)的青年公豬。

1.3抗體檢測(cè)操作方法

檢測(cè)試劑盒均為美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)，操作方法以及結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)參照試劑盒說(shuō)明書。

表1　豬場(chǎng)各類豬群血清采集方案　（份）

2　結(jié)果

2.1豬瘟檢測(cè)結(jié)果及分析

2.1.1豬瘟（CSF）抗體檢測(cè)結(jié)果（阻斷率≥40%為陽(yáng)性）

豬瘟（CSF）抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖1～4。

2.1.2豬瘟抗體分析

結(jié)合圖1～4分析如下。

⑴種豬群

經(jīng)產(chǎn)母豬、公豬的豬瘟抗體陽(yáng)性率均為100%，剛進(jìn)入隔離舍的后備母豬抗體陽(yáng)性率為80%，所有種豬群的抗體陽(yáng)性率平均為98.7%，符合我國(guó)農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疾病強(qiáng)制免疫計(jì)劃中種豬群抗體陽(yáng)性率90.0%的合格率要求，同時(shí)種豬群豬瘟抗體的離散度較小（4%～26%），說(shuō)明種豬階段豬瘟抗體的保護(hù)效果很好。

圖1　豬瘟（CSF）抗體阻斷率檢測(cè)結(jié)果

圖2　各階段豬只豬瘟抗體平均值、離散度

圖3　各階段豬只豬瘟抗體陽(yáng)性率

圖4　豬瘟抗體阻斷率分布

從豬瘟的抗體阻斷率分布范圍可以看出，高胎齡母豬和低胎齡母豬（包括后備母豬、青年公豬）抗體阻斷率要低于中胎齡的母豬，這可能是由于低胎齡母豬免疫豬瘟的次數(shù)相對(duì)較少，故產(chǎn)生的豬瘟抗體水平較低。高胎齡母豬抗體阻斷率較低，可能是由于隨著使用年限的增加，免疫豬瘟疫苗的次數(shù)不斷增加，導(dǎo)致機(jī)體對(duì)豬瘟疫苗產(chǎn)生了一定程度的免疫麻痹，同時(shí)高胎齡母豬自身健康狀況的惡化，使其對(duì)豬瘟疫苗的免疫應(yīng)答有所下降。不同懷孕階段及哺乳母豬的豬瘟抗體阻斷率無(wú)明顯差異。

⑵商品豬群

商品豬群豬瘟抗體的陽(yáng)性率為87.5%，符合我國(guó)農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疾病強(qiáng)制免疫計(jì)劃中商品豬群70.0%的合格率要求，同時(shí)商品豬群豬瘟抗體的離散度差異較小（7%～38%），3周齡和7周齡仔豬抗體的陽(yáng)性率分別為80%和40%，同時(shí)3、7周齡仔豬豬瘟抗體阻斷率均在65%以下；10周齡仔豬豬瘟抗體陽(yáng)性率為100%，但80%豬只抗體阻斷率小于65%，10周齡以后，豬瘟抗體阻斷率逐漸增加。結(jié)合商品豬群豬瘟的免疫程序，即4周齡首免、8周齡二免，在首免后豬瘟的抗體阻斷率并沒(méi)有明顯增加，二免后豬瘟抗體阻斷率逐漸增加，該豬場(chǎng)商品豬群豬瘟抗體阻斷率的變化趨勢(shì)屬于正常現(xiàn)象。同時(shí)也提醒我們，豬瘟疫苗二免以后才能產(chǎn)生較好的保護(hù)力，首免和二免的間隔時(shí)間不要超過(guò)5周。

2.2PRRSV檢測(cè)結(jié)果及分析

2.2.1PRRS抗體檢測(cè)結(jié)果（≥0.4為陽(yáng)性）PRRS抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖5～8。

圖6　各階段豬只PRRS抗體平均值、離散度

圖7　各階段豬只PRRS抗體陽(yáng)性率

圖8　PRRS抗體值分布

2.2.2PRRS抗體分析

IDEXX PRRSV抗體檢測(cè)試劑盒以藍(lán)耳病病毒的核衣殼蛋白（N蛋白）為包被抗原，N蛋白不能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生針對(duì)病毒的中和抗體，不適用于對(duì)疫苗免疫保護(hù)力的監(jiān)測(cè)，但是能夠在一定程度上判斷豬只藍(lán)耳病病毒的免疫或感染狀態(tài)，且因其保守性好、敏感性高、結(jié)果重復(fù)性好，而被廣泛應(yīng)用。結(jié)合圖5～8分析如下。

⑴種豬群

種豬群PRRS抗體陽(yáng)性率為77.3%，其中7胎及以上母豬抗體陽(yáng)性率為53.%，種豬群抗體值均小于2.5，說(shuō)明種豬群內(nèi)PRRSV的感染壓力很低。同時(shí)，青年公豬、后備母豬、低胎齡母豬的抗體值要明顯大于高胎齡母豬。這種現(xiàn)象在PRRSV穩(wěn)定、長(zhǎng)期使用進(jìn)口PRRSV疫苗的豬場(chǎng)內(nèi)經(jīng)常可以見(jiàn)到，隨著豬只免疫PRRSV疫苗的次數(shù)不斷增加，PRRS抗體值逐漸降低，但豬群的PRRSV感染壓力越來(lái)越小。在離散度方面，7胎及以上胎齡母豬的抗體離散度最高，但該階段母豬的抗體值均低于1.5。這提示我們?cè)诮庾x抗體離散度的時(shí)候，需要考慮到具體抗體值的大小；與高抗體值相比，在低抗體值水平下，相同的數(shù)值差異，會(huì)導(dǎo)致離散度明顯增加。

⑵商品豬群

與3周齡相比，7周齡仔豬抗體平均值、抗體陽(yáng)性率均有所增加，10周齡后出現(xiàn)下降的趨勢(shì)，但13周齡后又出現(xiàn)上升趨勢(shì)。10周齡以后抗體平均值均在2.1以內(nèi)，商品豬群中只有2個(gè)樣本的抗體值大于2.5，分別是7周齡和25周齡的兩個(gè)樣本（抗體值分別為2.59和2.72）。結(jié)合豬場(chǎng)的PRRSV免疫程序，仔豬14日齡免疫某進(jìn)口PRRSV弱毒疫苗（VR2332毒株），說(shuō)明7周齡抗體值增加是疫苗免疫后的正常反應(yīng)，13周齡時(shí)抗體值增加，但抗體值均在2.0左右，說(shuō)明10～13周齡豬場(chǎng)內(nèi)存在一定的野毒感染，但感染的壓力很小。

2.3PRV檢測(cè)結(jié)果及分析

2.3.1豬偽狂犬病（PRV）gE抗體檢測(cè)結(jié)果（≤0.6為陽(yáng)性）

PRV-gE抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖9。

圖9　PRV-gE抗體檢測(cè)結(jié)果

圖10　PRV-gB抗體檢測(cè)結(jié)果

圖11　PRV-gB抗體離散度、平均值

圖12　PRV-gB抗體陽(yáng)性率

圖13　PRV-gB抗體分布

2.3.2豬偽狂犬病（PRV）gB抗體檢測(cè)結(jié)果（≤0.6為陽(yáng)性）

PRV-gB抗體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖10～13。

2.3.3PRV gE、gB抗體分析

⑴gE抗體檢測(cè)顯示該豬場(chǎng)為豬偽狂犬野毒陰性場(chǎng)。

⑵種豬群。gB抗體檢測(cè)結(jié)果顯示，經(jīng)產(chǎn)母豬群及已經(jīng)結(jié)束隔離的后備母豬gB抗體陽(yáng)性率為100%，同時(shí)S/N值均在0.1以下，說(shuō)明該豬場(chǎng)后備母豬在配種之前經(jīng)過(guò)兩次免疫PRV疫苗、經(jīng)產(chǎn)母豬多次免疫PRV疫苗以后可以產(chǎn)生很好的gB抗體。青年公豬、剛進(jìn)入隔離舍的后備母豬gB抗體陽(yáng)性率相對(duì)較差，可能與免疫次數(shù)相對(duì)較少有關(guān)。這提示我們經(jīng)過(guò)多次免疫后，豬群可以產(chǎn)生較好的PRV保護(hù)水平，同時(shí)也提示我們需要加強(qiáng)針對(duì)后備種豬群的生物安全，提高免疫頻率。

⑶商品豬群。與3周齡相比，7周齡仔豬的gB抗體水平明顯降低，說(shuō)明母源抗體的保護(hù)力在逐漸消失。10周齡后gB抗體逐漸增加，說(shuō)明9周齡PRV免疫已經(jīng)產(chǎn)生作用。25周齡時(shí)gB水平降到最低，說(shuō)明疫苗的保護(hù)力在這階段已經(jīng)很弱，提示我們肥豬群是豬場(chǎng)內(nèi)PRV野毒的突破口，豬場(chǎng)需要根據(jù)自身情況加強(qiáng)肥豬群的生物安全、增加商品豬群的免疫密度，提高gB抗體水平，防止野毒的感染。

3　討論

通過(guò)對(duì)該豬場(chǎng)豬瘟、PRRS、偽狂犬相關(guān)抗體的系統(tǒng)分析，可以得出，這三種疾病在該豬場(chǎng)得到了很好的防控。同時(shí)根據(jù)抗體的變化曲線，我們也可以得到以下規(guī)律。

⑴后備種豬群由于疫苗免疫的密度較小，抗體水平通常較差，在豬場(chǎng)中屬于高風(fēng)險(xiǎn)群體。

⑵不同妊娠階段、哺乳期母豬群在抗體水平上無(wú)明顯差異。

⑶在解讀抗體離散度的時(shí)候，需要考慮到具體抗體值的大小，與高抗體值相比，抗體值越低，相同的數(shù)值差異產(chǎn)生的離散度明顯增加。

⑷商品豬群豬瘟需要免疫兩次以后，方可得到較強(qiáng)的免疫保護(hù)，在制定豬瘟的免疫程序時(shí)，需要根據(jù)豬瘟的母源抗體水平確定合理的首免時(shí)間，在首免后的5周內(nèi)進(jìn)行2免。

在沒(méi)有PRRSV重復(fù)感染的PRRSV穩(wěn)定豬場(chǎng)，如免疫進(jìn)口PRRSV弱毒疫苗（VR2332毒株），種豬群隨著免疫次數(shù)的增加，N蛋白抗體的水平會(huì)逐漸下降。

⑸肥豬階段是PRV的感染窗口，需要根據(jù)豬場(chǎng)的具體情況，調(diào)整商品豬群PRV的免疫程序，提高gB抗體的水平，并加強(qiáng)肥豬階段的生物安全。

4　小結(jié)

在豬場(chǎng)疾病風(fēng)險(xiǎn)逐漸增大的時(shí)代，豬場(chǎng)更需要重視疫病的檢查和監(jiān)測(cè)。設(shè)計(jì)科學(xué)合理的、能夠反映豬群實(shí)際狀況的采血方案，采血后進(jìn)行重大疫病抗體的檢測(cè)并對(duì)結(jié)果進(jìn)行科學(xué)的分析，以便及時(shí)發(fā)現(xiàn)并科學(xué)處理豬群中潛在的疫病風(fēng)險(xiǎn)，提高豬群的健康狀況，將豬病尤其是重大疫病扼殺在“搖籃”之中，實(shí)現(xiàn)豬場(chǎng)的健康可持續(xù)發(fā)展。

S858.28

A

1673-4645(2015)11-0046-05

2015-08-19