二苯氧雜蒽衍生物的合成及抗腫瘤活性

楊異卉++高尚+劉波++宋永彬++于楠+++高雯++楊佳卉

摘要：為了研究二苯并[a，j]氧雜蒽類衍生物的抗腫瘤活性，在無溶劑微波輻射或者直接加熱條件下，以6-溴-2-萘酚和醛為原料、對甲苯磺酸為催化劑合成了3.11-二溴-14-取代二苯并[a，j]氧雜蒽類衍生物.利用IR、1H NMR、13C NMR和HRMS等方法確定了目標化合物的結構，并采用MTT法評價了它們對4種腫瘤細胞和一種正常細胞的細胞毒活性.結果表明部分氧雜蒽類衍生物在體外展現了抗腫瘤活性，其中，化合物3m和31對NB4細胞的IC50值分別為25.8molol/L和51.4μmol/L，說明在二苯并[a，j]氧雜蒽的3和11位引入溴原子可以增強其抗腫瘤活性，

關鍵詞：二苯并氧雜蒽；抗腫瘤活性；微波輻射；合成

DOI：10.15938/j.jhust.2015.02.021

中圖分類號：062

文獻標志碼：A

文章編號：1007-2683（2015）02-0109-06

0 引 言

抗腫瘤藥物的研究一直是藥物研發的熱點，優秀的先導化合物的合成是開發抗腫瘤藥物的重要前提.具有抗腫瘤活性的化合物很多，但絕大多數化合物在殺滅腫瘤細胞的同時，也殺滅了正常細胞，缺少細胞選擇性.臨床上許多抗腫瘤藥物的選擇性差、不良反應多，因此發現抗腫瘤活性好且具有良好選擇性的先導化合物非常重要.

氧雜蒽類化合物，尤其是苯并氧雜蒽類化合物具有廣泛的生理活性，如抗病毒、抗菌、抗炎、光敏治療的致敏劑和拮抗氯苯唑胺的肌松弛作用，關于此類化合物的研究報道也很多.目前，氧雜蒽類化合物的抗腫瘤活性研究較多，但二苯并[a，j]氧雜蒽類化合物的抗腫瘤活性研究較少，此類化合物的母核（結構見圖1（a））具有一定的抗腫瘤活性.本課題組合成了一系列的二苯并[a，j氧雜蒽類化合物（結構見圖1（b）），它們在體外實驗中展現了良好的抗腫瘤活性，對多種腫瘤細胞產生較強的抑制增值作用，并發現在二苯并[a，j]氧雜蒽的3和11位引入取代基可以顯著增強此類化合物的抗腫瘤活性.溴原子含有孤對電子，它可以進攻腫瘤細胞的親電中心，增強化合物的抗腫瘤活性.因此，本研究決定在二苯并[a，j]氧雜蒽的3和11位引入溴原子（結構見圖1（c）），并評價其抗腫瘤活性.

1 儀器與試劑

核磁共振譜用Bruker AVANCE-300MHz核磁共振譜儀測定（TMS為內標，CDC13為溶劑）；紅外光譜由Avatar 370FT-IR型紅外光譜儀測定（KBr壓片）；高分辨質譜由Waters公司的LCT PremierXE飛行時間質譜儀測定；美國CEM Discover微波合成儀.所用試劑和溶劑均為市售分析純，6-溴-2一萘酚為實驗室自制，通過核磁共振氫譜鑒定其結構.

2 實驗方法

2.1 目標化合物的制備

2.1.1 3.11-二溴-14-芳基-14H-二苯并[a，j]氧雜蒽的合成

在50mL圓底燒瓶中加入30mmol的6-溴-2一萘酚、15mmol芳香醛2a-2j、1.5mmol對甲基苯磺酸及磁力攪拌子，然后放人微波反應器中，反應溫度為125℃（合成3a時溫度為80℃），功率100W，常壓下反應10min（合成3a時為12min），TLC監測反應，產物用DMF和乙醇混合溶劑重結晶后得到化合物3a-3j，合成路線見圖2.其中，3a-3c為新化合物，3d-3j為已知化合物.

2.1.2 3.11-二溴-14-烷基-14H-二苯并[a，j]氧雜蒽的合成

在50mL三頸瓶中加入30mmol的6-溴一2一萘酚、15mmol脂肪醛2k-2n和1.5mmol對甲基苯磺酸，在磁力攪拌下加熱至樣品融化，反應2-3h，用TLC檢測反應，產物用DMF和乙醇混合溶劑重結晶得化合物3k-3n，合成路線見圖2.其中，3m和3n為新化合物，3k和31為已知化合物.

2.1.3 14-取代-14H-二苯并[a，j]氧雜蒽的合成

14-取代二苯并[n，j]氧雜蒽類化合物4a-4n（此類化合物可以看成二苯并[a，j]氧雜蒽類化合物的母體，結構見圖3）作為活性試驗的陰性對照，其結構特點是將化合物3a-3n的溴原子變成氫原子.4a-4n合成方法和化合物3a-3n的合成方法相同.4a-4n均為已知化合物，根據它們熔點數據對它們進行了結構確認，

2.2抗腫瘤活性測試

本論文采用MTT法對合成的目標化合物3a-3n進行體外抗腫瘤活性評價，As203作為陽性對照藥，化合物4a-4n作為陰性對照物，選用了4種腫瘤細胞，分別是NB4細胞（白血病細胞）、SK-HEP—l細胞（人肝癌細胞）、HepG2細胞（人肝癌細胞）、HeLa細胞（人宮頸癌細胞）和1種正常HPASMC細胞（人肺動脈平滑肌細胞）.將對數生長周期的細胞懸浮液濃度調至1×103個/mL-6×103個/mL，加到96孔板中，每孔100μL，實驗設置樣品組、對照組（陰性樣品對照組、陽性藥對照組、空白對照組）和空白校零組（不含細胞，只有培養基液）.在5%CO2和37℃的條件下，培養至細胞貼壁生長后，加入樣品（6個濃度梯度），每孔加樣品溶液10μL，設3個復孔.在此條件下繼續培養48h后，棄去培養液，再補充100μL培養液，每孑L加入5mg/mL的MTT溶液20μL，37℃反應后，除去上清液，每孔加入100μLDMSO振蕩10min，使結晶物充分溶解.采用酶聯免疫檢測儀在490nm（貼壁細胞）或570nm（懸浮細胞）測量各孔的吸光值（OD值）.根據公式計算抑制率：抑制率（%）=（OD對照-OD樣品）/（OD對照-OD樣品）×100%，根據不同樣品濃度下的抑制率，利用SPSS軟件計算出求出IC50值.

3 結果與討論

3.1二苯并[a，j]氧雜蒽衍生物的性狀、產率、熔點