miR- 1和miR- 133a對大鼠肥大心肌細胞L-型鈣通道Cavβ2和α1C亞基的調控作用

王玉琴，耿 鵬，吳 揚*

(南通大學 1.附屬醫院 神經內科； 2.航海醫學研究所， 江蘇 南通 226001)

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miR- 1和miR- 133a對大鼠肥大心肌細胞L-型鈣通道Cavβ2和α1C亞基的調控作用

王玉琴1，耿 鵬2，吳 揚2*

(南通大學 1.附屬醫院 神經內科； 2.航海醫學研究所， 江蘇 南通 226001)

目的研究miR- 1和miR- 133a在大鼠心肌細胞肥大中對L-型鈣通道β2亞基(Cavβ2)和α1C亞基的調控作用。方法異丙腎上腺素(ISO)誘導大鼠心肌細胞肥大；在線數據庫microCosm和Targetscan預測miR- 1和miR- 133a的靶基因；分別構建含有Cavβ23′UTR或α1C3′UTR的重組質粒，與miR- 1或miR- 133a共轉染HEK293細胞，驗證Cavβ2亞基是miR- 1的靶基因，α1C亞基是miR- 133a的靶基因；用Western blot法檢測心肌細胞內Cavβ2和α1C蛋白表達；用siRNA干擾Cavβ2和α1C表達，明確Cavβ2和α1C在心肌細胞肥大中的作用。結果1)Cavβ2為miR- 1的潛在靶基因，α1C為miR- 133a的潛在靶基因。2)分別將miR- 1和Cavβ23′UTR，miR- 133a和α1C3′UTR共轉染HEK293細胞，熒光素酶熒光值均顯著降低(P<0.05,P<0.01)。3)分別轉染miR- 1 mimic、miR- 133a mimic上調miR- 1、miR- 133a的表達后，心肌細胞內Cavβ2和α1C蛋白表達均明顯下降(P<0.01,P<0.05)。4)用RNAi下調Cavβ2和α1C表達可明顯抑制心肌細胞表面積(P<0.01)，ANP和β-MHCmRNA表達增加(P<0.05)。結論Cavβ2亞基是miR- 1的靶基因，α1C亞基是miR- 133a的靶基因。miR- 1和miR- 133a可能通過負性調控L-型鈣通道Cavβ2和α1C蛋白表達，抑制心肌細胞肥大。

miR- 1；miR- 133a；L-型鈣通道β2亞基；L-型鈣通道α1C亞基；心肌細胞肥大

MicroRNAs(miRNAs)是一類具有高度保守性的非編碼小RNA分子，是重要的轉錄后調控因子，對生物體基因表達發揮精細的調控作用。近年來，大量研究表明，miRNAs在心肌肥大的發生發展中起著重要的調控作用[1- 2]。miR- 1和miR- 133a在心肌中呈特異性表達，對心肌肥大具有負性調控作用[3- 4]，但其具體調節機制迄今尚未完全闡明。業已證明，L-型鈣通道與心肌肥大發生發展過程密切相關。miR- 1對鈣/鈣調蛋白信號通路具有重要調節功能[5]。miR- 133a通過鈣神經素-NFATc4信號通路調控心肌肥大[6]。因此推測在心肌肥大過程中，miR- 1及miR- 133a是否可能通過調節L-型鈣通道相關蛋白的表達從而調控心肌肥大？本研究從miR- 1及miR- 133a入手，預測并驗證L-型鈣通道β2亞基(L type calcium channel β2subunit,Cavβ2)和α1C亞基是否分別為miR- 1、miR- 133a的靶基因，探討miR- 1和miR- 133a在心肌細胞肥大中對L-型鈣通道的調控作用及機制。

1 材料與方法

1.1 動物與主要試劑

1.1.1 動物：新生1～3 d SPF級SD乳鼠[南通大學實驗動物中心提供，合格證號：SYXK(蘇)2007-0021]。

1.1.2 試劑：異丙腎上腺素(ISO)和β-actin單克隆抗體(Sigma公司)； Lipofectamine 2000(Invitrogen公司)；辣根過氧化物酶(HRP)標記的羊抗鼠IgG、HRP標記的羊抗兔IgG和Dual-Luciferase Reporter Assay System(Promega公司)；miR- 1 mimic、miR- 133a mimic、Negative RNA、miR- 1 Antagomir、miR- 133a Antagomir和突變拮抗物(mutant antagomir)由上海吉瑪生物技術有限公司合成；抗Cavβ2、α1C多克隆抗體(Millipore公司)。

1.2 心肌細胞培養

縣級報賬制的有效實施，能夠使移民扶持資金管理質量和使用效率得到有力提升。個別的機構與人員在報賬中未能嚴格地遵照縣級報賬制，導致資金運行所經過的環節過多，導致水庫移民后期扶持資金管理中存在較大的安全隱患。同時，在縣級報賬制的操作和實施過程中，監管與制約工作力度不足，導致報賬操作存在不規范的問題，資金管理風險因素較大。另外，部分部門在扶持資金管理中對專戶轉賬的落實不到位，存在多個移民扶持資金混用同一個賬戶的不良現象，導致移民扶持資金管理的規范性與安全性不足。

胰蛋白酶消化法[7]培養乳鼠心室肌細胞。培養48 h后, 換無血清DMEM培養基, 24 h后加入干預因素。

1.3 熒光素酶報告基因檢測

2.3miR-1和miR-133a分別特異性抑制Cavβ2和α1C蛋白表達

1.4 心肌細胞轉染

心肌細胞轉染前加入DMEM(不含血清及抗生素)，24 h后每孔取1.25 μL(25 pmol)寡聚物稀釋至50 μL Opti-MEM培養液；取1.5 μL lipofectamine 2000稀釋至50 μL Opti-MEM培養液，混勻，室溫孵育20 min。棄培養基，每孔加入400 μL Opti-MEM、100 μL轉染試劑，培養24 h后換正常培養基，加入ISO誘導心肌細胞肥大，培養24 h用于檢測。

1.5 Western blot檢測

2.2 miR- 1和miR- 133a靶基因的初步驗證

1.6 siRNA干擾實驗

siRNA干擾序列由吉瑪公司合成(表1)。心肌細胞用無抗生素含15%小牛血清DMEM培養基培養，轉染前1天更換無抗生素、無血清的DMEM培養基，饑餓細胞24 h。將干擾RNA用Lipofectamine 2000轉染心肌細胞。轉染24 h后換正常培養基，加入ISO誘導心肌細胞肥大，培養24 h后用于檢測。

表1 Cavβ2和α1C干擾序列Table 1 Sequences for RNAi of Cavβ2 and α1C

1.7 統計學分析

膨潤土資源開發具有原礦易開采、加工工藝多樣、資源綜合利用率高的顯著特點，而蒙脫石的選礦也有別于傳統的選礦工藝，實際選礦工藝僅用在成分簡單的少量高純產品的加工領域，而且主要是濕法的重選分離工藝，大部分膨潤土資源加工是結合成分組成特點的各種礦物綜合開發利用工藝，單從綜合利用率指標考察，目前國內部分先進加工企業已實現100%的膨潤土資源綜合利用，無廢礦外排。

筆者根據統計數據，按“教師”“學?！眱蓚€板塊分別篩選出認可度較高的教師專業發展評價要素，具體情況如下。

近年來隨著生物信息學和分子生物學技術的發展，一些研究者通過在線數據庫預測miRNA的潛在靶基因，并應用分子生物學技術進行驗證，從而闡明該miRNA的調節功能和作用機制。業已證明[3- 4]，心肌細胞肥大時，miR- 1和miR- 133a表達明顯下降，且均與鈣信號通路有密切關系。那么，miR- 1和miR- 133a能否通過直接調節L-型鈣通道相關蛋白，進而影響心肌細胞肥大？

2 結果

2.1 miR- 1和miR- 133a的靶基因預測

L-型鈣通道Cavβ2為miR- 1的潛在靶基因，α1C亞基為miR- 133a的潛在靶基因(圖1)。

A.result of online prediction of miR- 1; B.result of online prediction of miR- 133a圖1 miRNAs靶基因的預測結果Fig 1 The result of prediction of miRNAs

提取各組心肌細胞總蛋白，用BCA試劑盒進行蛋白定量，10%十二烷基硫酸鈉聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)進行電泳，PVDF膜印跡。室溫封閉2 h，加入一抗Cavβ2、α1C(或β-actin)，4 ℃過夜，然后加入辣根過氧化物酶HRP標記的二抗室溫孵育2 h。ECL化學發光顯色，顯影、定影。將膠片進行掃描或拍照，GDS8000攝取圖像(UVP公司)，IPP6.0分析軟件對條帶進行定量分析。

Cavβ23′UTR+miR- 1 mimic組熒光值明顯低于mutantCavβ23′UTR+miR- 1 mimic組和Cavβ23′UTR+negative RNA組(P<0.05) (圖2A)；α1C3′UTR+ miR- 133a mimic組熒光值明顯低于mutantα1C3′UTR+ miR- 133a mimic組和α1C3′UTR +negative RNA(P<0.01) (圖2B)。

A.luciferase reporter assay verify the target of miR- 1; B.luciferase reporter assay verify the target of miR- 133a; *P<0.05 compared with Cavβ2 3′UTR+negative RNA group and mutant Cavβ2 3′UTR+ miR- 1 group; #P<0.01 compared with α1C 3′UTR+negative RNA group and mutant α1C 3′UTR+miR- 133a group

HEK293細胞接種于24孔板培養，待細胞在培養板面積達80%～90%時用于轉染。每孔取100 ng重組pmirGLO+25 pmol RNA稀釋至50 μL減血清培養基(Opti-MEM)中；取1.5 μL lipofectamine 2000稀釋至50 μL Opti-DMEM培養基中，混勻，靜置20 min。棄培養基，加入400 μL Opti-DMEM、100 μL轉染試劑，培養6 h后更換含15%胎牛血清DMEM培養液，24 h后，按照說明書操作步驟進行熒光素酶報告基因檢測。

結果顯示，剖宮產生下的嬰兒體內某一類與腸道健康相關的腸道細菌-擬桿菌門(Bacteroidetes phylum)，比順產的嬰兒數量少，且細菌的總數前者也比后者少。而且，剖宮產的嬰兒血液中Th1的循環濃度較低，造成Th1及Th2失衡，將使嬰兒比較容易產生起敏反應。缺少優良的腸道細菌，促進免疫系統過度反應，可能導致過敏、糖尿病及腸炎。

精細化的國別研究旨在把服務“一帶一路”倡議的大目標轉化為可實際落實的小目標。國別研究可以研究一個國家，也可以研究由幾個語言文化相似國家組成的文化區域，以語言為切入點，進而研究該國或該地區的宗教信仰、文化習俗、禁忌習慣等多人文環境知識。同時，國別研究不應僅局限于了解有關國家的文化通識知識，還可以結合學生所學專業研究該專業在目標國家的發展現狀、營商環境和法律制度等更具專業導向的國別知識。

2.4Cavβ2和α1C亞基在心肌細胞肥大中的作用

Cavβ2RNAi組Cavβ2mRNA和蛋白表達均明顯低于ISO組和negative RNA組(P<0.01) (圖4A,C);α1CRNAi組α1CmRNA和蛋白表達均明顯低于ISO組和negative RNA組(P<0.01,P<0.05) (圖4B,D)。

與ISO組、negative RNA組相比，RNAi組心肌細胞表面積明顯減小(P<0.01) (圖5A, D)，且心肌肥大標志基因ANP和β-MHCmRNA表達亦均顯著下降(P<0.05) (圖5B, C, E, F)。

3 討論

其中：L為錨桿長度，m；L1為錨桿錨入穩定巖層深度，一般長度取1.0 m；L2為錨桿的有效長度，m。L3為錨桿在巷道中的外露長度，一般取0.1 m。其中：L2=[B/2+Htan(45°-ω/2)]/fd=1.32 m，其中：B為巷道開掘寬度，取6.3 m；H為巷道開掘高度，取5.0 m；fd為頂板巖石普氏系數，取3； ω為兩幫圍巖的似內摩擦角，ω=tan-1(fd)。計算可得L=2.42 m。根據圍巖結構特征觀測結果，其主導裂隙發育范圍主要集中于2.0 m內，因此根據理論計算和現場實測結果，可選用長度為3.0 m中空注漿錨桿。

以上研究結果充分表明，miR- 1和miR- 133a抑制心肌細胞肥大的作用可能與它們分別抑制Cavβ2和α1C有關，miR- 1和miR- 133a可能是通過負性調控L-型鈣通道Cavβ2和α1C亞基的表達，抑制心肌細胞肥大。

A.effect of miR- 1 on protein expression of Cavβ2; B.effect of miR- 133a on protein expression of α1C; *P<0.05, **P<0.01 compared with control group(without ISO); #P<0.05, ##P<0.01 compared with ISO group

A.effects of Cavβ2 RNAi on mRNA levels of Cavβ2; B.effects of α1C RNAi on mRNA levels of α1C; C.effects of Cavβ2 RNAi on protein levels of Cavβ2; D.effects of α1C RNAi on protein levels of α1C; *P<0.05, **P<0.01 compared with control group(without ISO); #P<0.05, ##P<0.01 compared with ISO group

物流在我國的國民生活中占據重要地位，而且整個的基礎網絡非常薄弱，其實我很贊同這樣的外來者進來加快市場的深度變革和市場融合。但是這里面涉及到利益的重新分配問題，必然會有陣痛，但我認為這是必要的。

有研究表明心肌細胞肥大時，細胞內鈣離子濃度增高，這與L-型鈣通道活性增強有關[8]。L-型鈣通道是心肌細胞內鈣離子濃度的重要調節者[9]，主要由α1、α2、β、γ和δ亞基組成，其中功能亞基α1C在心肌高表達[10]；調節亞基Cavβ有4種亞型，其中僅Cavβ2在心肌中表達，它能使L-型鈣通道活性增強[11]。為了進一步探討在心肌細胞肥大中miR- 1和miR- 133a對其靶基因Cavβ2和α1C的調控作用，應用RNAi干擾Cavβ2和α1C的表達，觀察對心肌細胞肥大的影響。結果表明RNAi可分別有效干擾Cavβ2和α1C表達，同時能有效抑制ISO誘導的心肌細胞表面積、ANP和β-MHCmRNA表達的增加，抑制心肌細胞肥大。

本研究首先通過microCosm數據庫發現L-型通道Cavβ2亞基是miR- 1潛在靶基因，通過Targetscan數據庫發現L-型鈣通道α1C亞基是miR- 133a潛在靶基因。為了驗證該預測結果，一是構建含有Cavβ23′UTR和突變的Cavβ23′UTR重組質粒以及含有α1C3′UTR和突變的α1C3′UTR重組質粒，將構建的質粒分別與miR- 1或miR- 133a共轉染HEK293細胞，檢測各組熒光值。結果表明，與其他組相比，轉染野生型Cavβ23′UTR+miR- 1 mimic組、轉染野生型α1C3′UTR+miR- 133a mimic組熒光值均顯著下降。二是將miR- 1 mimic或miR- 133a mimic轉染至心肌細胞， 上調miR- 1和miR- 133a的表達，檢測Cavβ2和α1C蛋白表達水平，結果發現過表達miR- 1、miR- 133a可明顯抑制Cavβ2、α1C的蛋白表達。研究結果表明Cavβ2和α1C分別是miR- 1、miR- 133a的靶基因。

A.effects of Cavβ2 RNAi on cell surface area; B.effects of Cavβ2 RNAi on mRNA levels of ANP; C.effects of Cavβ2 RNAi on mRNA levels of β-MHC; D.effects of α1C RNAi on cell surface area; E.effects of α1C RNAi on mRNA levels of ANP; F.effects of α1C RNAi on mRNA levels of β-MHC; *P<0.05, **P<0.01 compared with control group(without ISO); #P<0.05, ##P<0.01 compared with ISO group

[1] Kuppusamy KT, Sperber H, Ruohola-Baker H. MicroRNA regulation and role in stem cell maintenance, cardiac differentiation and hypertrophy[J]. Curr Mol Med, 2013, 13:757- 764.

[2] Martinelli NC, Cohen CR, Santos KG,etal. An analysis of the global expression of microRNAs in an experimental model of physiological left ventricular hypertrophy [J]. PLoS One, 2014, 9: e93271.doi:10.1371/journal.pone.0093271.

[3] Li Q, Song X W, Zou J,etal. Attenuation of microRNA- 1 derepresses the cytoskeleton regulatory protein twinfilin1 to provoke cardiac hypertrophy [J]. J Cell Sci, 2010, 123: 2444- 2452.

[4] Care A, Catalucci D, Felicetti F,etal. MicroRNA- 133 controls cardiac hypertrophy[J]. Nat Med, 2007, 13: 613- 615.

[5] Ikeda S, He A, Kong SW,etal. MicroRNA- 1 negatively regulates expression of the hypertrophy-associated calmodulin and Mef2a genes[J]. Mol Cell Biol, 2009, 29: 2193- 2204.

[6] Li Q, Lin X, Yang XS,etal. NFATc4 negatively regulated in miR- 133a-mediated cardiomyocyte hypertrophic repression[J]. Am J Physiol Heart Circ Physiol, 2010, 298: H1340- 1347.

[7] 高嵩丹，李宏偉，李愛玲，等. Akt介導過氧化氫促新生大鼠心肌細胞肥大[J]. 基礎醫學與臨床，2008, 28:149- 152.

[8] Viola HM, Macdonald WA, Tang H,etal. The L-type Ca(2+) channel as a therapeutic target in heart disease[J]. Curr Med Chem, 2009,16: 3341- 3358.

[9] Cao H, Wang F, Wang W,etal. Ca(2+) influx through L-type Ca(2+) channels and transient receptor potential channels activates pathological hypertrophy signaling [J]. J Mol Cell Cardiol, 2012, 53: 657- 667.

[10] Leach RN, Brette F, Orchard CH. Antisense oligonucleotide against the Ca channel beta subunit decreases L-type Ca current in rat ventricular myocytes[J]. Biochem Biophys Res Commun, 2007, 352: 794- 798.

[11] Bodi I, Mikala G, Koch SE,etal. The L-type calcium channel in the heart: the beat goes on[J]. J Clin Invest, 2005, 115: 3306- 3317.

新聞點擊

剖宮產嬰兒腸道益生菌較少

據美國國家科學院院報(PNAS)網站(2013-08-13)報道，瑞典最近一項研究發現，剖宮產生下的嬰兒在出生后的前2年，體內腸道的益生菌含量，比順產的嬰兒少。

研究者以高通量DNA測序分析24名嬰兒在6個時間點的糞便微生物組成，以及取得血液樣本以了解免疫系統化學物質Th1及Th2相關趨化因子的濃度。這24名嬰兒中有9名是剖宮產、15名為順產。

心肌細胞肥大時Cavβ2和α1C表達明顯增加；分別將miR- 1 mimic或miR- 133a mimic轉染至心肌細胞后，相應的Cavβ2和α1C表達均明顯下降(P<0.01,P<0.05)(圖3A,B)。

景德鎮以青花、顏色釉、玲瓏瓷和粉彩聞名于世，作為景德鎮四大名瓷之一的粉彩更是憑借它柔潤的釉色贏得無數人的喜愛。燒制粉彩的過程是在擺臺上再施以含有砷物的粉底，在經過低溫燒制以后，砷發生乳化作用形成。

針對以上結論提出以下幾點建議：(1)適當增加進口，主攻單產。棉花屬于高耗水農作物，根據計算如果大量增加棉花進口，帶來的負面影響也較大，如農戶種植積極性受挫、紡織行業依懶性強等。按照自治區“十三五”規劃與發展，優化棉花種植布局，主攻單產，集中發展優勢種植區、高產棉與優質棉區，壓縮高風險棉區種植面積；(2)適當調整種植業結構，并著力推廣高效灌溉技術。按照“十三五”規劃，優化種植業結構，調棉增飼，增大飼料種植比例。同時推廣微灌技術，提高灌溉效率；(3)建立并逐步完善相關補償機制，促進種植結構調整的實施，引導農戶轉變觀念，樹立節水觀念。

研究表示，母親的腸道微生物會經由陰道生產方式傳遞給順產的寶寶，剖宮產則會改變嬰兒菌落。過去曾有研究指出剖宮產與嬰兒發生過敏之間的關聯性，這項研究也顯示剖宮產會使腸道的細菌多樣性降低，可能因此才提高過敏概率。未來將針對剖宮產嬰兒補充益生菌是否可以刺激免疫系統發展成熟，并避免產生過敏進行研究。

四要依法治網、辦網、上網，加強網絡倫理建設。網絡空間是公共空間，既不是“法外之地”，也不是不受道德約束的“虛擬空間”。因此，既要堅持依法治網、依法辦網、依法上網，讓互聯網在法治軌道上健康運行，也要加強網絡倫理、網絡文明建設，發揮道德教化引導作用。堅持依法治網和以德治網相結合，相輔相成，促使各方協同共治，共同擔負起凈化網絡空間的責任。

該研究刊登于《英國醫學期刊》(BMJ)。

早餐吃得飽有助降低糖尿病、高血壓及心血管疾病

據美國國家科學院院報(PNAS)網站(2013-08-15)報道，1天3餐中早餐尤其重要，近日一項由以色列臺拉維夫大學所做的研究指出，不論是想要瘦身或者是維持健康，與吃什么有很大的關系，因為新陳代謝會受到身體的生理時鐘所影響，所以我們吃東西的時間點會影響身體如何消化食物。該研究發現，1天中，早餐吃的多者能減輕體質量，同時心血管疾病風險也較低。

這項研究將93位肥胖女性隨機分為每天攝取總熱量1 400卡的2組，1組3餐的個別攝取熱量為700、500和200卡，另一組則為200、500和700卡，700卡的早餐及晚餐則包含了一樣的食物。

護理人員是經過專業的護理學校畢業,通過專業的考試并領有執照的醫務工作者。由于護理人員的工作與人們的健康,甚至生命息息相關,所以要求護理人員不僅要具有完備的專業素質,更要有健康的身體和良好的心理素質。伴隨著科學技術水平的提高,人類對健康和疾病的思考也發生了相應的改變,致使醫學模式也發生了大轉變,醫療事業也是飛速發展,與此同時,護理工作日益展現出其重要的作用與地位。護理工作要求高、責任重、操作多、工作量超負荷、上班時間沒有規律是護理工作的一大特點。據報道,護理工作壓力明顯高于一般職業,護理人員身心健康水平遠低于普通職業人群。

研究追蹤12周以后的結果顯示，早餐攝取較高熱量者，平均減輕體質量8.07 kg、腰圍減少；晚餐攝取較高熱量者，則減輕體質量3.31 kg、腰圍也隨之減少。而且早餐吃較豐盛者，1 d之內的其余時間會減少再吃點心的欲望，而且她們的胰島素、葡萄糖及三酰甘油濃度都比較低，飯后也未出現血糖值達到高峰，顯示心血管疾病、糖尿病、高血壓、高膽固醇的風險都降低。

這項研究提醒人們不要在晚餐吃更多的食物，這樣不利于減輕體質量，更對身體有害，還會提高心血管疾病風險。

該研究刊登于新一期《肥胖》(Obesity)期刊。

Regulation of miR- 1 and miR- 133a on L-type calcium channel Cavβ2and α1C subunits in rat cardiomyocyte hypertrophy

WANG Yu-qin1, GENG Peng2, WU Yang2*

(1.Dept. of Neurology, the Affiliated Hospital of Nantong University; 2.Institute of Navigation Medicine, Nantong University, Nantong 226001, China)

ObjectiveTo investigate the regulation of miR- 1 and miR- 133a on L-type calcium channel β2subunit(Cavβ2) andα1Csubunit during rat cardiomyocyte hypertrophy.MethodsCardiomyocyte hypertrophy was induced by isoproterenol (ISO, 10 μmol/L). The targets of miR- 1 and miR- 133a were predicted by online database microCosm and Targetscan, respectively. The 3′ untranslated region sequences ofCavβ2andα1Cwere respectively cloned into reporter vector and then transiently transfected into HEK293 cells. The luciferase activities of samples were measured for demonstrating the expression of luciferase reporter vector. The protein expression of Cavβ2and α1C were evaluated by Western blot. The expression levels of Cavβ2and α1C were inhibited by RNAi to determine

miR- 1; miR- 133a; L-type calcium channel β2subunit; L-type calcium channel α1C subunit; cardiomyocyte hypertrophy

2014- 09- 02

：2014- 10- 27

江蘇省南通社會發展計劃項目(S2010010)

*通信作者(correspondingauthor)：wy@ntu.edu.cn

1001-6325(2015)02-0196-07

研究論文

R 542.2

：A

the effects of Cavβ2and α1C on cardiomyocyte hypertrophy.Results1)Cavβ2was one of potential targets of miR- 1,α1Cwas the one of potential targets of miR- 133a. 2) The luciferase activities of HEK293 cells with the plasmid containing widetypeCavβ23′UTR sequence orα1Csignificantly decreased(P<0.05,P<0.01). 3)Upregulation of the miR- 1 and miR- 133a by miR- 1 mimic and miR- 133a mimic transfection suppressed protein expression of Cavβ2and α1C, respectively(P<0.01,P<0.05). 4)Downregulation ofCavβ2andα1Cby RNAi could markedly inhibit the increase of cell surface area(P<0.01), mRNA expression ofANPandβ-MHC(P<0.05).ConclusionsCavβ2is the target gene of miR- 1 andα1Cis the target gene of miR- 133a. miR- 1 and miR- 133a can negatively regulate the expression of L-type calcium channel Cavβ2and α1C subunit, inhibiting cardiomyocyte hypertrophy.