薄荷流動(dòng)性飲片制備工藝與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

李晨暉 曹 崗 葛衛(wèi)紅 蔡寶昌

·藥學(xué)園地·

薄荷流動(dòng)性飲片制備工藝與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

李晨暉1曹 崗2葛衛(wèi)紅2蔡寶昌2

薄荷；流動(dòng)性飲片；制備工藝；質(zhì)量控制

薄荷為唇形科植物Mentha haplocalyx Briq.的干燥地上部分[1-3]，味辛，性涼，具有疏散風(fēng)熱、清利頭目、利咽、透疹、疏肝行氣的功效，為臨床常用的辛涼解表藥。用于風(fēng)熱感冒、風(fēng)溫初起，頭痛目赤、喉痹、口瘡、風(fēng)疹、麻疹、胸脅脹悶等的治療[4-5]。薄荷油是薄荷中的主要化學(xué)成分，薄荷揮發(fā)油中主要成分為左旋薄荷醇，含量62%～87%；此外，還含有黃酮類、機(jī)酸、蒽醌類等其他非揮發(fā)性成分[6-7]。本文研究薄荷流動(dòng)性飲片的制備工藝，并建立了薄荷拋丸的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，為實(shí)現(xiàn)薄荷飲片自動(dòng)化小包裝提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀 器 CW-12低溫超微粉碎機(jī)（煙臺(tái)慧寶設(shè)備制造有限公司）；HLSG-10P高效混合制粒機(jī)（樂(lè)清市中廈電子儀器廠）；ZLB-800旋轉(zhuǎn)式制粒機(jī)（江蘇張家港市開(kāi)創(chuàng)機(jī)械制造有限公司）；WG-300離心滾丸機(jī)（重慶市科旭制藥機(jī)械設(shè)備制造有限公司）；DHG-9240A電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱（上海一恒科技有限公司）；DZF-6050真空干燥箱（上海一恒科技有限公司）；Agilengt 7890A氣相色譜儀。

1.2 材 料 薄荷采自杭州西湖區(qū)雙靈村，甲醇（色譜純）、薄荷腦（110728-200506）購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所。

2 方法與結(jié)果

2.1 工藝過(guò)程 打粉：取薄荷傳統(tǒng)飲片500g，用低溫超微粉碎機(jī)適度粉碎；制軟材：將藥粉倒入高效混合制粒機(jī)中，加入適量水，混合均勻；制粒：將得到的軟材轉(zhuǎn)入到旋轉(zhuǎn)式制粒機(jī)中，篩網(wǎng)的孔徑為1.5mm；拋丸：將濕顆粒倒入離心滾丸機(jī)中拋圓；干燥：將得到的流動(dòng)性飲片放入鼓風(fēng)干燥箱中30℃低溫干燥10h。

2.2 工藝因素考察 《中國(guó)藥典》2010年版一部薄荷藥材及飲片項(xiàng)下均以薄荷油為含量指標(biāo)，故此工藝考察以薄荷油含量為主要考察指標(biāo)，考慮到薄荷油的極易揮發(fā)性，工藝首先重點(diǎn)考察了粉碎與干燥兩個(gè)工藝環(huán)節(jié)，再進(jìn)行正交優(yōu)選試驗(yàn)。

2.2.1 粉碎工藝 薄荷為易揮發(fā)性藥材，普通萬(wàn)能粉碎機(jī)粉碎薄荷存在兩個(gè)問(wèn)題：一是粉碎過(guò)程產(chǎn)熱，致使揮發(fā)性成分大大損失；二是粉碎不均勻。因此，采用低溫超微粉碎機(jī)，粉碎倉(cāng)為全封閉，采用-10℃低溫粉碎，粉碎粒度與粉碎時(shí)間呈正比。因?yàn)楸『傻厣喜糠秩胨帲譃槿~和莖部分，薄荷葉很容易粉碎，而莖不易粉碎，故采取先粉碎一段時(shí)間，過(guò)4號(hào)藥典篩，將不能過(guò)下去的莖再粉碎一段時(shí)間。經(jīng)預(yù)實(shí)驗(yàn)，在保證拋丸成型的前提下采用盡可能粗的粉末，確定為以下三個(gè)水平進(jìn)入正交試驗(yàn)：①5+4：先粉碎5min，過(guò)四號(hào)篩，將未通過(guò)部分再粉碎4min；②6+5：先粉碎6min，過(guò)四號(hào)篩，將未通過(guò)部分再粉碎5min；③7+6先粉碎7min，過(guò)四號(hào)篩，將未通過(guò)部分再粉碎6min。其中最粗粉末為5+4粒徑分布如圖1所示。

圖1 5+4粉末粒徑分布圖

2.2.2 干燥工藝 結(jié)果表明∶鼓風(fēng)干燥30℃，干燥9h，含水量剛好達(dá)到中國(guó)藥典2010年一部中薄荷飲片項(xiàng)下對(duì)水分的要求，且薄荷油量也合格，所以本實(shí)驗(yàn)采用鼓風(fēng)干燥30℃，干燥10h。見(jiàn)表1。

2.2.3 正交優(yōu)選工藝參數(shù) 通過(guò)預(yù)試驗(yàn)可知,影響拋丸工藝的4個(gè)主要因素為：①粉碎時(shí)間；②加水量；③滾圓轉(zhuǎn)速；④滾圓時(shí)間。本研究采用四因素三水平L9（34）正交試驗(yàn)設(shè)計(jì),進(jìn)行工藝條件的優(yōu)化篩選,見(jiàn)表2。以圓整度、目標(biāo)收率和薄荷油量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，權(quán)重系數(shù)分別為20%、20%和60%。綜合評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)：圓整度倒數(shù)×0.2+目標(biāo)收率×0.2+薄荷油量×0.6。其中圓整度按照以下3.1方法考察；目標(biāo)收率為中國(guó)藥典1號(hào)篩與2號(hào)篩之間的成品量；薄荷油量按照《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄XD揮發(fā)油測(cè)定法甲法測(cè)定。經(jīng)方差分析表3和表2中直觀分析結(jié)果可知：對(duì)綜合評(píng)分影響的因素，大小依次為B＞A＞D＞C，但均無(wú)顯著性影響。對(duì)A因素ⅡA＞ⅢA＞ⅠA，B因素有ⅠB＞ⅡB＞ⅢB，C 因素有ⅡC＞ⅢC＞ⅠC，D 因素有ⅡD＞ⅠD＞ⅢD直觀分析最佳工藝為A2B1C2D2，即粉碎時(shí)間為 6+5min，加水量為1∶1.2，滾圓時(shí)間為6min，滾圓轉(zhuǎn)速為 600r/min。見(jiàn)表 2～4。

表1 不同干燥方式比較

表2 因素水平表

表3 L9（34）正交試驗(yàn)表

3 粉體學(xué)性質(zhì)評(píng)價(jià)

3.1 圓整度 將一拋丸置一平板上，將平板一側(cè)抬起，測(cè)量在拋丸開(kāi)始滾動(dòng)前傾斜平面與水平面的夾角，該角越小，拋丸的圓整度越好，每份樣品測(cè)10次，求出平均值。見(jiàn)表4。

表4 方差分析

3.2 休止角 固定漏斗法，即將漏斗固定于坐標(biāo)紙（紙放置于水平臺(tái)上）上方一定高度，從漏斗加入物料直到形成的堆積圓錐頂部與漏斗底部剛好接觸，測(cè)定圓錐直徑，以漏斗底高度與圓錐半徑比作為正切值計(jì)算休止角。見(jiàn)表5。

3.3 脆碎度 取5g用吹風(fēng)機(jī)吹去脫落的粉末，精密稱重，置脆碎度測(cè)定儀中，轉(zhuǎn)動(dòng)100次。取出，同法除去粉末，精密稱重，減失重量/原重量×100%，計(jì)算脆碎度。見(jiàn)表5。

3.4 堆密度 稱取一定量拋丸（m），置于10mL量筒中，從距離5cm處下落，連續(xù)操作3次。測(cè)定量筒體積（V），堆密度（d）由公式d=m/V求出。見(jiàn)表5。

表5 粉體學(xué)參數(shù)

4 拋丸薄荷腦GC含量測(cè)定

4.1 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 進(jìn)樣口溫度：250℃；檢測(cè)器溫度：250℃；分流比：20∶1；載氣：N2；體積流量：1.0mL/min；進(jìn)樣量：1μL。升溫程序見(jiàn)表 6。

表6 升溫程序

在上述色譜條件下，薄荷腦與其他成分完全分離，薄荷腦保留時(shí)間約10min，氣相色譜圖如圖2所示。

4.2 供試品溶液的制備 取本品約2.0g，精密稱定，置于150mL具塞錐形瓶,加入40mL甲醇超聲30min，濾過(guò)。用少量甲醇洗滌殘?jiān)叭萜?次，濾過(guò)。濾液合并至50mL量瓶中，甲醇定容，取上清液15 000r/min高速離心，上清液過(guò)0.45μm濾膜得供試液。

4.3 對(duì)照品貯備液制備 取薄荷腦對(duì)照品適量,精密稱定，加甲醇制成1.36g/L薄荷腦對(duì)照品貯備液。

圖2 薄荷腦（A）及薄荷流動(dòng)性飲片（B）GC色譜圖

4.4 線性關(guān)系考察 分別精密吸取一定量質(zhì)量濃度為1.36g/L的薄荷腦對(duì)照品貯備液，加甲醇稀釋成0.034、0.068、0.136、0.170、0.340、0.680g/L 的 一 系 列質(zhì)量濃度的對(duì)照品溶液。分別吸取0.034、0.068、0.136、0.170、0.340、0.680 及 1.36g/L 對(duì)照品溶液，按“2.1”色譜條件進(jìn)行測(cè)定。以峰面積積分值為縱坐標(biāo)（Y），薄荷腦對(duì)照品質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)（X，mg/mL），繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果Y=611.160975X+3.9237361（r=0.99979），薄荷腦進(jìn)樣量在0.034～1.36g/L內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

4.5 精密度實(shí)驗(yàn) 取薄荷腦對(duì)照品溶液，進(jìn)樣1μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積，計(jì)算得其RSD=0.449%。

4.6 重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 取同一批供試品，平行取樣6次，精密稱定，照“4.2”項(xiàng)下方法處理，在給定的色譜條件下進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果薄荷腦峰面積的RSD=0.893%。

4.7 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一供試品溶液，分別于0、2、4、8、12、24h不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)樣分析，對(duì)薄荷腦的峰面積進(jìn)行考察，結(jié)果薄荷腦的峰面積的RSD=1.38%，表明常溫下供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定。

4.8 加樣回收率實(shí)驗(yàn) 取已知薄荷腦含量的供試品粉末6份各約1.0g，精密稱定，分別精密加入甲醇30mL，再精密加入對(duì)照品溶液（C=0.22007mg/mL）10mL，按上述供試品溶液制備方法制備，并按上述色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算加樣回收率，結(jié)果薄荷腦的平均回收率為99.68%，RSD為3.23%。

4.9 樣品含量測(cè)定 取薄荷拋丸樣品研碎粉末2g，精密稱定，按“4.2”項(xiàng)下步驟操作，制得供試品溶液，取1μL進(jìn)樣測(cè)定，按標(biāo)準(zhǔn)曲線法計(jì)算供試品中薄荷腦的含量，測(cè)得薄荷腦含量為2.7318mg/g。

5 討 論

國(guó)家中醫(yī)藥管理局于2008年8月公布《小包裝中藥飲片醫(yī)療機(jī)構(gòu)應(yīng)用指南》，小包裝飲片的全面推廣已是大勢(shì)所趨。但是目前，由于中藥飲片品種多樣，形態(tài)各異，小包裝飲片的生產(chǎn)形式落后，多靠手工，不能自動(dòng)化生產(chǎn)，不符合現(xiàn)代工業(yè)化的發(fā)展模式。本文選取中藥中質(zhì)輕體大，且具揮發(fā)性的典型品種薄荷進(jìn)行了工藝摸索，對(duì)于流動(dòng)性中藥飲片的發(fā)展奠定了一定的理論基礎(chǔ)。

傳統(tǒng)薄荷飲片和藥材體積疏松、龐大，無(wú)法實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化包裝，而且薄荷儲(chǔ)存3個(gè)月左右，常有霉變現(xiàn)象，揮發(fā)性有效成份大量流失，切損耗大等問(wèn)題，從而影響藥材的質(zhì)量和臨床藥效的發(fā)揮，所以運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)改造傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)將成為中藥飲片生產(chǎn)技術(shù)發(fā)展的主要趨勢(shì)[8-9]。薄荷流動(dòng)性飲片是在總結(jié)薄荷現(xiàn)有的各種新型中藥飲片優(yōu)缺點(diǎn)的基礎(chǔ)上，依據(jù)中醫(yī)藥復(fù)方配伍理論和臨床應(yīng)用需要，對(duì)薄荷傳統(tǒng)飲片進(jìn)行特殊加工的一種原創(chuàng)性的新型中藥飲片。薄荷流動(dòng)性飲片是在傳統(tǒng)飲片的基礎(chǔ)上，以水為黏合劑，不添加任何輔料，將薄荷低溫粗粉運(yùn)用現(xiàn)代化的拋丸技術(shù)制成可流動(dòng)性飲片。薄荷新型飲片可以群藥共煮，符合湯劑的要求，便于規(guī)范化生產(chǎn)，機(jī)械化生產(chǎn)包裝等優(yōu)點(diǎn)，尤其適用于體積大、機(jī)械化小規(guī)格包裝有難度的常用草類、花類、皮類等藥材。

本工藝為保持中藥飲片的特色，未添加任何輔料，只選用適量水作為黏合劑，力求保持其化學(xué)性質(zhì)，改變傳統(tǒng)中藥飲片的物理形態(tài)，增加其流動(dòng)性，便于自動(dòng)化生產(chǎn)包裝。《中國(guó)藥典》2010版僅對(duì)傳統(tǒng)薄荷飲片中的總揮發(fā)油作了規(guī)定，而沒(méi)對(duì)其揮發(fā)油中具體成分限定。為控制薄荷流動(dòng)性飲片的質(zhì)量，建立了GC方法直接測(cè)定薄荷中的薄荷腦，對(duì)于薄荷中薄荷腦的GC測(cè)定方法很多，多是先提薄荷油，再測(cè)定薄荷油中薄荷腦含量，本文首次創(chuàng)新性研究薄荷流動(dòng)性飲片，并直接測(cè)定薄荷中的薄荷腦，所需樣品量少，且簡(jiǎn)單易行。另外，較之前常用的內(nèi)標(biāo)法，我們采用了外標(biāo)法，簡(jiǎn)化了操作步驟。

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（收稿：2014-07-20 修回：2014-09-12）

浙江省經(jīng)貿(mào)委中藥現(xiàn)代化專項(xiàng)（No.浙財(cái)企字[2008]268號(hào)）；浙江省中醫(yī)藥重點(diǎn)研究計(jì)劃（No.2008ZA002）

1杭州市第一人民醫(yī)院藥劑科（杭州 310006）；2浙江中醫(yī)藥大學(xué)中藥炮制技術(shù)中心（杭州 310053）

曹崗，Tel：15868486269；E-mail：caogang33@163.com