多臺不同品牌血細胞分析儀的校準與比對分析

劉媛，但剛，江忠勇，胡莉娜，謝靜，熊杰

·臨床論著·

多臺不同品牌血細胞分析儀的校準與比對分析

劉媛，但剛，江忠勇，胡莉娜，謝靜，熊杰

目的對多臺血細胞分析儀進行校準和比對，以確保本實驗室內不同品牌血細胞分析儀對同一標本的檢測結果具有可比性。方法以Sysmex2100血細胞分析儀對新鮮血定值，然后對另外3臺血細胞分析儀進行校準，按照美國國家臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）的要求，每日隨機選取高、中、低值臨床標本8份，分別用以上3臺血細胞分析儀測定WBC、RBC、HGB、PLT、MCV、HCT，各儀器均采用手動模式對每份標本連續測定2次，連續測定5 d，共40份樣本，進行偏差評估，并作散點圖、建立回歸方程和計算相關系數。結果Sysmex XE-2100、2臺HORIBA ABX-DX120、邁瑞BC-5800測定結果偏差均在可接受范圍內，相關性好（r2≥0.95）。結論通過校準和比對，本實驗室4臺不同品牌的血細胞分析儀檢測結果具有可比性，均可為臨床提供準確可靠的結果。

血細胞分析儀；校準；偏差；品牌

血細胞分析儀操作簡便、快速，準確度、精密度高，是現代臨床檢驗最常用的儀器之一，是血常規檢查的主要儀器。我院檢驗科為滿足大量臨床血常規標本檢測需要，已購置多臺不同廠家或不同型號、系列的血細胞分析儀，因各儀器的檢測系統和原理有所不同，所以同一份標本在不同儀器上的檢測結果可能會有一定的偏差。ISO15189[1]對檢測結果的可比性提出了明確要求，實現同一實驗指標不同檢測系統檢測結果的可比性是質量管理的基本目標。本研究以Sysmex XE-2100為基準儀器，按照美國國家臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）批準的《用患者樣本進行方法比對及偏倚評估-批準指南（EP9-A2）》文件的要求[2]，通過對Sysmex XE-2100、HORIBA ABX-DX120、BC-58003三類儀器進行比對實驗和分析，探討檢測結果是否具有可比性及偏差是否在允許范圍內，評估不同儀器間檢測結果的準確性和一致性，為質量控制提供依據，為臨床提供準確的診斷和療效評價依據。

1 材料與方法

1.1 實驗標本選自本院門診患者EDTA-K2抗凝靜脈全血標本，采集時間在2 h內。每日隨機選取8份標本（含高、中、低值），每份標本連續測定2次，連續測定5 d，共40份標本（考慮待測物的異常情況，分析物濃度應盡可能在測定范圍內均勻分布）。

1.2 儀器與試劑日本Sysmex XE-2100血細胞分析儀，法國HORIBA ABX-DX120（2臺）血細胞分析儀，中國邁瑞BC-5800血細胞分析儀，均使用各公司原裝配套試劑、校準品及質控品。

1.3 校準

1.3.1 Sysmex XE-2100的校準和樣品定值使用原裝配套校準品SCS-1000，批號50610525，取校準品在Sysmex XE-2100上采用手動進樣模式連續測定6次，取2~6次結果計算均值，計算測定均值與靶值間的偏差，偏差=（均值-靶值）×100/靶值。按照校準手冊上列的CV%判斷標準進行判斷，決定是否進行校準系數修改。

然后取正常成人新鮮靜脈血，在校準后的Sysmex XE-2100上，采用手動進樣模式連續重復測定11次，計算2~11次結果的均值、變異系數（CV）、標準偏差（SD），所測得的均值為靶值。

1.3.2 用已定值得新鮮血校準另外3臺血細胞分析儀各儀器均嚴格定期維護、保養，每日用高、中值室內質控品進行質控測定，保證3臺儀器均在控。用已賦值的新鮮血采用手動進樣模式，分別在另外3臺血球儀上連續測定6次，取2-6次結果計算均值，計算測定均值與靶值間的偏差，判斷標準與校準Sysmex XE-2100血細胞分析儀相同。

1.4 比對以Sysmex XE-2100為基準儀器，HORIBA ABX-DX120、邁瑞BC-5800為比對儀器。各儀器對當日選取的8份標本（保證每份標本有足夠量：能夠用基準儀器作2次測定；能夠用比對儀器作2次測定；如果需要應能繼續進行追蹤實驗）分別開始檢測，測定各項參數，儀器均采用手動模式對每份標本連續測定2次。兩次測定中，樣本排列順序為1、2、3、4、5、6、7、8和8、7、6、5、4、3、2、1，順序中的分析物濃度應盡可能隨機排列，以減少交叉污染及漂移對重復測定標本平均值的影響。連續測定5 d，共40份樣本。

1.5 數據統計與分析設基準儀器測定結果為靶值x，比對儀器測定結果為測定值y。用SPSS16.0統計軟件計算各儀器40份樣本6個項目兩次測定的平均值，求基準儀器與比對儀器的相對偏差進行偏差分析，相對偏差=（測定值-靶值）/靶值×100%。

相關性分析：以Yi對Xi作Yi散點圖（Yi，比對儀器雙份測定的均值；Xi，基準儀器雙份測定的均值；i,樣本數），求得其相關系數r和回歸方程Y= b X+a，P＜0.05為差異有統計學意義。

1.6 判斷標準相對偏差判斷標準：以1988年美國臨床實驗室改進修正案(CLIA'88)允許誤差范圍（TEa）的1/2作為偏倚界限：白細胞(WBC)為7.5%，紅細胞(RBC)為3%，血紅蛋白(HGB)為3.5%，血小板(PLT)為12.5%，紅細胞平均體積(MCV)為3.5%，紅細胞比容（HCT）為3%[3]。醫學決定水平（X c）范圍內儀器間相對偏差（SE%）＜1/2TEa，80%標本數結果滿足上述條件，則認為偏差在可接受范圍內。

相關性判斷標準：r2≥0.95則分析物濃度范圍合適，方法間具有可比性，比對通過。

2 結果

2.1 線性測定以Sysmex XE-2100檢測結果為x軸，以HORIBA ABX-DX120和邁瑞BC-5800檢測結果為y軸，對各項指標40個樣本均值分別作x、y散點圖(圖1)，目測無離群點，散點圖分布初步確定各指標在HORIBA ABX-DX120、邁瑞BC-5800上檢測結果與Sysmex XE-2100檢測結果呈直線正相關。

圖1 ABX-DX120A、ABX-DX120B和BC-5800與XE-2100各檢測指標均值散點圖

2.2 相對偏差分析比對儀器HORIBA ABXDX120、邁瑞BC-5800與基準儀器Sysmex XE-2100間各指標的相對偏差，滿足SE%＜CLIA'88 1/2TEa的樣本數已超過40份樣本的4/5（表1），各指標均達到偏差可接受要求。

2.3 線性相關性分析WBC、RBC、HGB、PLT、MCV和HCT 6項指標r2值均＞0.95，直線斜率b值均接近1，截距a值除PLT、MCV外，均接近0，見表2。

表2 ABX -DX120A、ABX-DX120B和BC-5800與XE-2100檢測項目的相關性分析

3 討論

隨著醫學檢驗學的發展，同一檢驗項目不同檢測系統的儀器多種多樣，現代血液分析儀主要應用電學和光學兩大原理，電學原理有阻抗法和射頻電導法，光學原理包括光散射法和分光光度法。各種類型血液分析儀檢測各種參數的原理不盡相同[4-5]，各儀器都有獨立的質控系統和試劑系統。我院檢驗科有3種不同品牌的血細胞分析儀，既擔負著大量急診和門診、住院標本的檢測，又根據本實驗室設定的復檢規則及時對異常結果做儀器復檢，其中Sysmex XE-2100參加衛計委室間質評并取得優秀成績。因此，我們在對HORIBA ABX-DX120、邁瑞BC-5800進行室內質控、定期校準的基礎上，又與Sysmex XE-2100進行比對，來判斷不同儀器檢測結果是否具有良好可比性，偏差是否在允許范圍內，以確保各儀器間結果一致，從而為臨床提供準確和穩定的報告結果。

表1 ABX-DX120A、ABX-DX120B和BC-5800與XE-2100各檢測項目的相對偏差分析

通過比對HORIBA ABX-DX120和邁瑞BC-5800與基準儀器Sysmex XE-2100間6項指標的比較，r2﹥0.95，可認為WBC、RBC、HGB、PLT、MCV、HCT這6項指標在這3類設備的檢測結果一致性很好；而比對儀器HORIBA ABX-DX120的MCV參數r2=0.9621，BC-5800的MCV參數r2= 0.9562，說明這兩種儀器MCV分析結果與Sysmex XE-2100的一致性欠佳，但仍然合格。從各儀器的檢測數據發現，PLT檢測值不夠穩定，主要是因影響PLT自動分析的因素比較多，建議在臨床應用中，同一臺血細胞分析儀室內質控PLT的CV值控制在4%左右。為保證檢測結果有更嚴格的準確性和一致性，應更全面規范地實現質量保證、儀器校準和性能評價，除偏差和比對分析外，實施對精密度、攜帶污染率、準確性、標本老化、儀器對異常標本和干擾物的靈敏度、空白讀數、試劑穩定性等的性能驗證[6-7]。

目前同一實驗室擁有多臺血液分析儀已屬普遍現象，如何加強同一實驗室內多臺血液分析儀間全血細胞計數準確性和可比性是質量控制工作的重點。當前“檢驗結果互認”已成為社會關注的焦點問題之一,而互認的前提是檢驗結果必須有可比性。最好的方法是用配套校準品定期對血細胞分析儀進行校準，但配套校準品不但價格昂貴，而且有效期較短，基層醫院難以對每臺儀器購置配套的校準品。而新鮮血作為校準品的替代物校準血細胞分析儀不但結果準確、可比性好,而且來源方便、經濟實惠。通過此次比對試驗不難看出，比對儀器和基準儀器的線性相關性良好，偏差小，在工作中可配合相互使用。

[1]中國合格評定國家認可委員會.醫學實驗室質量和能力認可準則在臨床血液學檢驗領域的應用說明[S].CNAS-CL43,2012: 2-4.

[2]葉應嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規程[M].4版.南京:東南大學出版社,2006:62.

[3]Allison FS.An historical review of quality control in hematology [J].Am JMed Technol,1993,49(9):625-632.

[4]張志強，王新鋒.兩種血細胞分析儀的實驗室內比對結果分析[J].中國衛生檢驗雜志，2014，24(19):2818-2820.

[5]何平.同一品牌相同類型血液分析儀檢測結果的可比性研究[J].中國實驗診斷學，2013，17(2):337-338.

[6]陳麗芳，林淑儀，姚淑雯，等.多臺血細胞分析儀檢測結果可比性分析[J].廣東醫藥，2013，44(1):39-40.

[7]熊立凡,劉成玉.臨床檢驗基礎[M].4版.北京:人民衛生出版社, 2009:127-128.

Calibration of differentbrands of blood cell analyzers and comparative analysis

Liu Yuan,Dan Gang,Jiang Zhongyong,Hu Lina,Xie Jing,Xiong Jie Department of Laboratory,Center of Laboratory Medicine/PLA Key Laboratory of High Humidity Medicine,General Hospital of Chengdu Military Command,Chengdu,Sichuan,610083,China

Objective To calibrate a number of blood cell analyzers and make comparison among them in order to ensure the comparability of the testing results for the same sample detected by the different brands of analyzers.Methods Sysmex2100 blood cell analyzer was used to evaluate the fresh blood.The other three blood cell analyzerswere calibrated.According to the requirements of the USCommittee for Clinical Laboratory Standards(NCCLS),8 sampleswith high,medium,and low value were random ly selected daily to detect WBC,RBC,HGB,PLT,MCV,and HCT by the three blood cell analyzers.Those machines were manipulated in manual mode to test every sample twice for continuous 5 days.Totally 40 samples were tested

the deviation evaluation. Scatterplotwas drawn,and regression equation was established.Correlation coefficientwas calculated.Results The deviation of the testing results by Sysmex XE-2100,two HORIBA ABX-DX120,and Mindray BC-5800 was within the tolerance interval,and the correlation was good(r2≥0.95).Conclusion Through the calibration and comparison,there is certain comparability of the testing results by the four analyzers of differentbrands.All provide accurate and reliable results for the clinic.

blood cell analyzer;calibration;deviation;brand

R 446

A

1004-0188（2015）08-0873-03

10.3969/j.issn.1004-0188.2015.08.021

2015-07-13）

四川省衛計委科研課題（140007）

610083成都，成都軍區總醫院實驗醫學中心檢驗科、高濕醫學全軍重點實驗室

熊杰，電話：028-86570452