醇提濃縮法提取蒺藜皂苷的實驗研究

曹珍艷，魏冰，李彬（北京康比特運動營養研究所，北京 100020）

醇提濃縮法提取蒺藜皂苷的實驗研究

曹珍艷，魏冰，李彬
（北京康比特運動營養研究所，北京 100020）

分別采用醇提濃縮法和水提醇沉法提取蒺藜皂苷，選擇紫外分光光度法進行定性定量測定。結果表明醇提濃縮法比水提醇沉法所得產品的皂苷含量高，更有利于工業化生產。

蒺藜皂苷；醇提濃縮法；水提醇沉法

近年來，隨著我國體育事業迅速發展，運動員肩負著不斷提高體能、增強體力、創造優異運動成績、挑戰人類自身極限的重任。因此，除需要給運動員提供平衡膳食外，還需給運動員增加特殊的運動補劑來平衡運動過程中的物質能量代謝［1］。這些補劑與興奮劑不同，它們合理的使用對運動員的身體健康和運動能力提高有極大的好處［2］。因此，研究和開發類似的運動補劑成為國內外體育科學研究的熱點。

蒺藜是近年來新開發的運動補劑，它對運動能力的提高有顯著作用［3］。蒺藜皂苷作為蒺藜的主要有效成分，已有研究表明蒺藜皂苷有助于人體中性激素含量的提升，特別是雄性激素 的含量。雄性激素，特別是睪酮在增強合成代謝，促進運動員恢復，預防運動性疲勞的發生具有重要作用。蒺藜皂苷是一種有效的運動營養品，故將其作為一種良好的運動營養品予以開發和利用很有意義［4］。

本文分別研究醇提濃縮法［5］和水提醇沉法提取蒺藜皂苷工藝［6］，并用紫外分光光度法測定所得產品的皂苷含量，通過對比兩種不同的生產方法，優化蒺藜皂苷工業化生產工藝。

1 實驗部分

1.1 儀器與試藥

儀器：Mettler Toledo電子天平，UV-754紫外-可見分光光度計，提取罐，粉碎機，噴霧干燥塔，HWS-26型電熱恒溫水浴鍋（上海合恒儀器設備有限公司），Millipore 超純水系統（美國Millipore公司）等。

試藥：蒺藜（原藥材），六水氯化鈷，乙醇，改良對氨基苯甲醛等。

1.2 分析方法

采用紫外分光光度法測定皂苷含量［7］。

標準品溶液：精密稱取干燥對照品CoCl2·6H2O 0.600 0g，加水溶解定容至25mL，搖勻，制成對照品溶液。在檢測波長（515±2）nm下測得其吸光值A1。

樣品溶液：精密稱取樣品2份，每份500.000 0mg左右，置50mL量瓶中，加40mL甲醇，超聲處理30min，放至室溫，定容，搖勻，過濾，濾液即為供試品溶液。

表1 提取方法實驗結果

樣品測定：精密移取樣品溶液5mL于10mL具塞刻度試管中，加改良對氨基苯甲醛5mL，密塞搖勻，60℃水浴中2h。冷卻至室溫，以試劑為空白，在檢測波長（515±2）nm下測定吸光度A2。

含量計算方法：

式中：A1為標準品溶液的吸光值；A2為樣品溶液的吸光值；V1為標準品溶液的總體積（mL）；V2為樣品溶液的總體積（mL）；M1為標準品的稱樣量（mg）；M2為樣品的稱樣量（mg）。

1.3 實驗方法

1.3.1 水提醇沉法

取蒺藜粗粉50g左右，加蒸餾水（固液比1∶10）回流提取3h，趁熱過濾，真空濃縮，以蒸餾水定容至50mL，攪拌下緩慢加入95%乙醇500mL，低溫沉淀24h后濾去沉淀，真空濃縮至近干，將濃縮浸膏噴霧干燥，將干燥品進行粉碎，過篩。

1.3.2 醇提濃縮法

稱取蒺藜粗粉50g左右，投入1L圓底燒瓶中，加入75%乙醇400mL，磁力攪拌下，油浴加熱至外溫70～75℃，回流1.5h，趁熱過濾，將濾餅投入1L圓底燒瓶中，加新的75%的乙醇400mL，重復上述操作兩次。將三次的濾液合并，用旋轉蒸發儀減壓濃縮（真空-0.09～0.1MPa，水溫50～55℃，至無溶劑蒸出，得棕色膏狀半固體產品。濃縮浸膏噴霧干燥，將干燥品進行粉碎，過篩。

1.4 工業化生產驗證

工藝流程：粉粹（粗粉）、提取、濃縮、噴霧干燥。

2 結果與討論

2.1 提取方法比較

將水提醇沉法所得實驗結果與醇提濃縮法所得實驗結果進行比較，如表1所示。

從表1可以看出，醇提濃縮法所得產品總皂苷含量高，操作簡單易行，適合工業大生產。

2.2 工業化大生產驗證

2.2.1 粉粹過篩工藝

采用粉粹過篩工藝進行工業化放大生產試驗驗證，結果如表2所示。

表2 粉粹工藝

從表2可以看出，粉粹過篩工藝的收率較高，為99.91%，適用于工業化放大生產。

2.2.2 提取工藝

將粗粉各800kg，投入6個提取罐中。每個提取罐分三次提取，每次1.5h，每次用體積分數75%的乙醇4 000L回流提取，溫度控制在70～75℃，合并提取液。實驗結果如表3所示。

表3 提取工藝

從表3可以看出，用體積分數75%的乙醇回流提取3次，每次1.5h，提取效果較好，適用于工業化放大生產。

2.2.3 濃縮工藝

控制濃縮溫度為72～78℃，真空度為-（0.06～0.07）MPa，濃縮達到比重為1.10，實驗結果如表4所示。

從表4可以看出，真空濃縮工藝適用于工業化放大生產，控制濃縮溫度以72～78℃為宜。

表4 濃縮工藝

2.2.4 噴霧干燥工藝

采用噴霧干燥工藝，進行工業化放大生產試驗驗證，結果如表5所示。

表5 噴霧干燥工藝

從表5可以看出，采用噴霧干燥工藝，最終的總皂苷含量較高，為52.12%，適用于工業化放大生產。

3 結論

綜合分析使用醇提濃縮法和水提醇沉法提取蒺藜皂苷所得干浸膏、總皂苷的含量，發現醇提濃縮法比水提醇沉法所得總皂苷含量高。而且通過工業化大生產驗證，發現醇提濃縮法更適合于工業化提取蒺藜皂苷，其核心提取工藝為蒺藜粗粉用體積分數75%的乙醇回流提取3次，每次1.5h。蒺藜皂苷是蒺藜中重要的有效成分，因此醇提濃縮法為工業化提取蒺藜皂苷提供了參考數據。

[1] 閆守扶,韓雨梅.運動營養補充品發展現狀[J].中國體育科技,2003,39(6):23-24, 27.

[2] 熊正英,李娟,王效良,等.某些運動補劑影響運動能力的研究進展[J].商洛師范?？茖W校學報,2004,18(2):1-4.

[3] 楊楠.部分運動補劑開發研究進展[J].牡丹江師范學院學報（自然科學版),2009,66(1):25-27.

[4] 于文兵，梁紅秀，許衍菊.蒺藜皂苷對大強度訓練大鼠血清ALT，AST，CK，LDH，BUN及睪酮的影響[J].南京體育學院學報（自然科學版）,2007,6(2):38-40.

[5] 李瑞海,李君玲,楊松松.蒺藜總皂苷提取工藝研究[J].中國實驗方劑學雜志,2006,12(8):1-2.

[6] 宋彥顯,閔玉濤.蒺藜皂甙的提取及部分純化研究[J].中山大學學報,31（2）:170-120.

[7] 殷翔,劉維,嚴偉民.刺蒺藜皂苷水提工藝研究[J].上海醫藥,2004,(25)5:231-232.

Experimental Study on Alcohol Extraction Method for Extraction of Saponins from Tribulus Terrestris

CAO Zhen-yan, WEI Bing, LI Bin
(Beijing Kangbite Sports Nutrition Research Institute, Beijing 100020)

Alcohol extraction concentration and water extraction alcohol precipitation method was used to extract saponin from Tribulus terrestris, qualitative and quantitative analysis were carried out by ultraviolet spectrophotometry. The results shows that the saponin content of the product in alcohol extract method is higher than that in concentrated water extraction and alcohol precipitation method, more conducive to industrial production, alcohol extraction method is more suitable for industrial production.

Tribulus Terrestris; Alcohol Extraction Method; Water Extraction and Alcohol Precipitation Method

TQ461

A

2096-0387（2015）01-0026-03

曹珍艷（1982-），女，湖北武漢人，碩士，研發工程師，研究方向：保健食品研發。