高危型HPV—DNA檢測在宮頸癌篩查中的應用

鐘繼興

[摘要] 目的 探討高危型人乳頭瘤病毒（HPV）DNA檢測在宮頸癌及癌前病變診斷中的作用。方法 收集我院2011年～2013年婦科門診宮頸癌篩查的1690例女性進行第2代雜交捕獲法（HC-Ⅱ）檢測HPV，以宮頸活檢為金標準，評價高危型HPV-DNA檢測在宮頸癌及癌前病變篩查中的作用。 結果 篩查并經病理確診的宮頸癌及癌前病變237例，其中宮頸上皮內瘤變（CIN）Ⅰ級83例，Ⅱ級62例，Ⅲ級55例，浸潤癌37例。高危型HPV-DNA檢測宮頸癌及癌前病變的靈敏度、特異度、陽性預測值、陰性預測值分別為98.7%，17.1%，16.3%和98.8%。結論 高危型HPV- DNA篩查宮頸癌具有很高的靈敏度和陰性預測值，是診斷宮頸癌及癌前病變的重要手段。

[關鍵詞] 人乳頭瘤病毒；宮頸癌；篩查

[中圖分類號] R737.33 [文獻標識碼] B [文章編號] 2095-0616（2015）15-144-03

[Abstract] Objective To explore the effect of high risk human papillomavirus（HPV）DNA test on cervical cancer screening. Methods 1690 women who were received cervical cancer screening in gynecological clinic in our hospital from 2011 to 2013 were detected HPV by hybrid-capture 2（HC-Ⅱ）. Results Of cervical biopsy as gold standard， effects of high risk HPV-DNA test on screening cervical cancer and precancerous lesion were evaluated. Results 237 patients were screened and pathologically diagnosed with cervical cancer and precancerous lesion. Among which， there are 83 patients with cervical intraepithelial neoplasia （CIN）Ⅰ，62 patients with CINⅡ，55 patients with CIN Ⅲ and 37 with invasive carcinoma.The sensitivity，specificity，positive-predictive value and negative-predictive value of high risk HPV-DNA test for detecting cervical cancer and precancerous lesion were 98.7%，17.1%，16.3% and 98.8% respectively. Conclusion High risk HPV-DNA test has significantly high sensitivity and negative-predictive value which is an important method to detect cervical cancer and precancerous lesion.

[Key words] Human papillomavirus；Cervical cancer；Screen

宮頸癌是女性中最常見的惡性腫瘤之一，僅次于乳腺癌，占女性惡性腫瘤的第2位[1-2]。近年來，我國宮頸癌的發生有年輕化趨勢，發病率以每年2%～3%的速度增長[3-5]，嚴重影響著廣大女性的健康。多種因素在宮頸癌的發生、發展中起作用，其中宮頸HPV感染導致宮頸癌是目前比較公認的看法。自Zur [6]在1977年第一次提出HPV可能是宮頸癌的危險因素以來，國內外越來越多的研究報道證實HPV感染與宮頸癌的關系，特別是13種高危型（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）HPV感染與宮頸癌密切相關[7]。早期宮頸癌患者治療預后較好，早期篩查后及時治療可有效提高患者的生存率[8]。如何尋找有效的宮頸癌篩查方法一直是宮頸癌防治工作的關注焦點，薄層液基細胞涂片法（TCT）是宮頸癌篩查進程中一個重要的里程碑，細胞學檢查提高了診斷敏感度，降低了假陰性率，但是對不典型的鱗狀上皮細胞患者分辨效果不佳。目前開展的宮頸癌及癌前病變篩查中，HPV-DNA檢測成為研究的熱點。為了更好的選擇有效的宮頸癌篩查方法，本研究旨在分析HC2-HPV-DNA檢測在宮頸癌及癌前病變診斷中的作用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

2011年1月～2013年12月來我院婦科門診進行宮頸癌癌前病變篩查的婦女，共計1690例，所有受檢者24h內無性生活并簽署知情同意書。受檢者年齡19～62歲（平均41歲）。每例患者均行陰道鏡活檢、細胞學檢測和HC2-HPV-DNA檢測。

1.2 檢查方法

1.2.1 宮頸細胞學檢測 醫生以窺陰鏡暴露宮頸后擦拭干凈宮頸口的分泌物，然后用特制的宮頸刷收集宮頸口及宮頸管的脫落上皮細胞，收集完成后將毛刷頭部放入盛有細胞保存液的小瓶內。采用美國Tripath公司TCT技術要求制片，染色，光學顯微鏡檢查，按照TBS分類進行細胞學診斷。

1.2.2 陰道鏡檢查與活檢 采用深圳金科威公司SLC2000型電子陰道鏡，由專業陰道鏡醫師進行檢查，對發現的可疑病灶行陰道鏡下定位活檢。若鏡下未發現異常或圖像不滿意，則取宮頸多點活檢或頸管搔刮術。所有活檢標本由副主任以上病理醫師閱片及作出最后診斷。endprint

1.2.3 高危型HPV-DNA檢測 標本采集方法同TCT方法。采用第二代雜交捕獲實驗方法（HC-Ⅱ），利用免疫學技術并通過化學發光放大基因信號對已知的13種高危型HPV-DNA進行檢測，試劑盒由美國Digene公司購買。診斷陽性指標為HPV-DNA≥1.0ng/L。

1.3 統計學方法

采用SPSS11.5軟件完成。以組織病理學結果作為金標準，比較細胞學檢查與高危型HPV-DNA檢測篩查宮頸癌及癌前病變的靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值，指標越高則篩查效果越好。

2 結果

2.1 病理檢查結果

病理診斷宮頸癌及癌前病變237例，其中宮頸上皮內瘤變（CIN）Ⅰ級83例，Ⅱ級62例，Ⅲ級55例，浸潤癌37例。

2.2 宮頸細胞學檢查結果

1690例患者中，無宮頸上皮病變者1308例，未明確診斷意義的不典型鱗狀上皮細胞者201例，低度鱗狀上皮內病變者128例，高度鱗狀上皮內病變者43例，鱗狀細胞癌10例。

2.3 高危型HPV-DNA檢測結果

1690例患者中，高危型HPV-DNA陽性患者共478例，陽性率為28.3%。經病理檢查后確定為宮頸癌及癌前病變的患者高危型HPV-DNA陽性率分別為CINⅠ級41.67%，CIN Ⅱ級78.95%，CIN Ⅲ級89.00%，宮頸癌92.06%。

2.4 兩種篩查方法的比較

以組織病理學檢查結果作為金標準，計算以宮頸細胞學檢查和HPV-DNA檢測篩查Ⅱ級、Ⅲ級CIN和浸潤癌的靈敏度、特異度、陽性預測值和陰性預測值。意義不明確的非典型鱗狀細胞（ASCUS）靈敏度為88.2%，低度鱗狀上皮內病變（LSIL）靈敏度為60.3%，高度鱗狀上皮內病變（HSIL）為40.1%，HPV-DNA方法靈敏度最高，為98.7%。詳見表1。

3 討論

HPV病毒是一種嗜上皮性病毒，通過皮膚的接觸傳播。目前發現的HPV病毒有100多種亞型，大部分亞型對人類健康是無害的，機體感染這些無害的HPV亞型病毒可以通過自身免疫系統清除掉。但有13種可導致癌癥的HPV亞型病毒（16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68）被稱為高危險HPV。因此開展高危型HPV檢測可以作為宮頸癌及癌前病變的篩查方法。既往研究證實高危型HPV感染與宮頸癌密切相關，高危型HPV感染者發生宮頸癌及癌前病變的比例顯著高于不感染者[9]。有75%的女性一生之中會至少感染一次HPV，性活躍期女性感染HPV幾率最高[10-12]。一般情況下機體可識別并自行清除感染的HPV病毒，但是隨著HPV感染次數的增加，發生宮頸癌的風險也逐漸增加。Bosch等[8]收集22個國家的宮頸癌活檢標本檢測后發現99.7%的宮頸癌患者病變組織中可以檢測到HPV-DNA。本研究顯示CINⅡ級HPV感染率為78.95%，CIN Ⅲ級為89%，宮頸癌為92.06%。在全部篩查的婦女中，高危型HPV陽性率為28.3%，這與國內沈艷紅等[13-14]的研究報道結果接近?？梢娫趯m頸癌及癌前病變的篩查中，高危型HPV檢測可以作為一個有效的方法。

傳統的細胞學檢查為宮頸癌篩查做出了很大的貢獻，TCT制片技術更是提高了宮頸上皮異常的檢出率，但是其檢出率受診斷分界點的影響。新型的HPV-DNA檢測技術對篩查宮頸癌及癌前病變具有靈敏度高、陰性預測值高的優點。很多報道發現該方法的陰性預測值高達99%[1，14]，在篩檢陰性的人群中，宮頸癌及癌前病變的比例極低，從而達到更好的排除的目的。對高危型HPV檢測陰性的人群可以延長延長篩查時間間隔，節省醫療資源。本研究以高危型HPV-DNA檢測進行篩查CINⅡ級、CINⅢ級和宮頸癌的靈敏度為98.7%，陰性預測值為98.8%，均高于細胞學檢查方法，可見高危型HPV-DNA檢測比細胞學檢查篩查CINⅡ、CINⅢ效果更好。但是本研究也發現單純使用HPV-DNA檢測方法仍有一定的漏診率，有3例宮頸癌患者HPV-DNA檢測成陰性，這可能與目前HPV-DNA檢測技術有關，除了高危型HPV-DNA可以引起宮頸癌之外，其他類型HPV也可能與宮頸癌發生相關。單純使用高危型HPV-DNA檢測不能囊括所有的HPV病毒，目前HC-Ⅱ方法檢測13種高危型的HPV亞型，但是目前的研究發現至少有20種HPV與宮頸癌發生有關。Bigras 等[15]研究發現有一些HPV病毒不能被HC-Ⅱ探針所識別，因此無法檢測該類型的HPV病毒。隨著HPV感染的研究深入，更多類型HPV的檢測方法和HPV-DNA檢測方法的改進將使HPV檢測效果更佳顯著。所以仍需高危型HPV-DNA檢測、細胞學檢查[16]、陰道鏡及宮頸活檢聯合檢查，達到全面篩查出患者的目的。

對于HPV感染的防治，目前除在低年齡段采取免疫接種疫苗外，尚無其他有效的治療方法。有研究建議30歲以上的女性間隔1年進行高危型HPV檢測[17]，對高危型HPV陽性的受檢者行陰道鏡檢查和細胞學檢查，從而達到早期發現患者的目的[18]。目前關于HPV-DNA檢測與細胞學檢查、陰道鏡檢查如何有效的組合應用，提高成本-效益是目前仍需要探索的問題[19]。本研究證實應用高危型HPV-DNA檢測篩查宮頸癌及癌前病變效果較好，可以應用于大規模人群的普查。鑒于目前乳腺癌預后較好，早期發現并及時治療后顯著延長患者生存期，達到防止宮頸癌、降低死亡率的目的。

[參考文獻]

[1] 陳觀娣，錢德英，李志剛，等.高危型人乳頭瘤病毒-DNA 檢測在宮頸鱗狀上皮內高度病變篩查中的價值[J].實用醫學雜志，2009，25（9）：1427-1429.

[2] Petignat P，Achtari C，Gynecology[J].Rev Med Suisse，2010，6（232）：105-108.endprint