彝藥滿山香的資源調(diào)查和鑒別研究△

郝慶秀，劉超，金艷，張燕，李曉明，康利平，郭蘭萍

(道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心，北京 100700)

·中藥農(nóng)業(yè)·

彝藥滿山香的資源調(diào)查和鑒別研究△

郝慶秀，劉超，金艷，張燕，李曉明，康利平，郭蘭萍*

(道地藥材國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室培育基地，中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院 中藥資源中心，北京 100700)

目的：對(duì)彝藥滿山香藥材的來(lái)源、野生植物資源實(shí)地調(diào)查和樣品采集，性狀和薄層鑒別進(jìn)行研究，以期為滿山香野生藥材資源的合理利用和保護(hù)提供參考。方法：本草考證、實(shí)地采樣調(diào)查、性狀鑒別和薄層鑒別。結(jié)果：滿山香藥材的來(lái)源為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子的根和藤莖。滿山香植物生長(zhǎng)在河谷、山坡常綠闊葉林中或陽(yáng)光充足的山坡石縫中，成簇生長(zhǎng)，種群稀少，蘊(yùn)藏量小；滿山香植物嫩枝葉呈暗紅色，根莖剝?nèi)テげ亢箫@出鮮艷的粉紅色；藥材粉末呈棕黃色或棕綠色。薄層色譜在365 nm波長(zhǎng)下有特征的熒光斑點(diǎn)，在與β-谷甾醇和胡蘿卜苷對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn)，用薄層色譜方法可以方便地鑒別滿山香藥材。

滿山香；資源調(diào)查；性狀特征；薄層鑒別；β-谷甾醇；胡蘿卜苷

民族藥作為我國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)藥的一部分，有確切而獨(dú)特療效，尤其是對(duì)一些頑癥、重癥、危癥有獨(dú)特的效果。“滿山香”為彝族常用藥材，具有舒筋活血、消腫止痛的功能，用于治療骨折、慢性胃腸炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、痛經(jīng)、外傷出血等癥，彝族醫(yī)生常鮮用。目前，云南某制藥廠用滿山香藥材作為原料藥生產(chǎn)的膠囊，用于中風(fēng)中經(jīng)絡(luò)，瘀血阻絡(luò)證的治療[1]。文獻(xiàn)報(bào)道滿山香的果實(shí)、根莖、葉都有藥效作用[2]，從其藤莖中分離得到的木脂素類化合物具有廣泛的生物學(xué)活性，在體外對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖有明顯的抑制作用，對(duì)肺癌、鼻咽癌、胃癌、子宮癌等癌癥有療效[3]，其藤莖的總提取物能抑制體外血清誘導(dǎo)的平滑肌細(xì)胞增殖，有防治高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化作用[4-5]。目前滿山香同名異物或異名同物的情況比較普遍，全國(guó)各地有多種植物作為滿山香藥材的來(lái)源使用，不同專著中記載的滿山香藥材基原不同，例如有木蘭科植物合蕊五味子Schisandra.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith及鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.的干燥根和莖[3][6-9]、杜鵑花科白珠樹(shù)屬植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch.) Rehd根和莖[10-12]、蕓香科九里香屬滿山香MurrayapaniculapaL.Jack根[13]、報(bào)春花科植物細(xì)梗香草LysimachiacapillipiesHemsl的根莖[14]，這些植物藥材有相似的功效，性狀特征不易鑒別。目前，對(duì)滿山香藥材的基礎(chǔ)研究比較薄弱，制藥廠藥材主要來(lái)源于野生采集的滿山香植物的根和藤莖，而根莖的長(zhǎng)期采伐會(huì)對(duì)滿山香植物自然資源造成不可逆的破壞。本文開(kāi)展了滿山香藥材的品種考證、資源調(diào)查、鑒別等研究，為滿山香野生資源的保護(hù)和利用、保證臨床準(zhǔn)確用藥提供參考。

1 來(lái)源考證

滿山香(彝族語(yǔ)，軟藤)作為彝藥收載于《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》[7][15]，來(lái)源為木蘭科植物合蕊五味子S.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith及鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.的干燥根和莖。《植物名實(shí)圖考》[16]卷九山草類記載：“滿山香，生南安。黑莖屈盤(pán)，葉如椿葉有赭紋，根亦糾曲。俚醫(yī)以治跌打損傷、風(fēng)氣，煎水洗之。”并附圖(見(jiàn)圖1)，經(jīng)考證，此種指的是杜鵑花科植物滇白珠Gaultheriayunnanensis(Franch.) Rehd，又名透骨香、搜山虎。《植物名實(shí)圖考》中記載“黃龍?zhí)伲颇仙街校倬奕绫郏y裂成鱗；細(xì)蔓紫色，長(zhǎng)葉綠潤(rùn)；開(kāi)五瓣團(tuán)花，中含圓珠，殷紅一色，株老則青。”根據(jù)該書(shū)中描述和繪圖(見(jiàn)圖1)，考證其原植物與滿山香S.propinqua(Wall.) Baill.相近或一致。歷版的《中華人民共和國(guó)藥典》均未收載滿山香。《中華本草》[17]和《中藥大辭典》[18]分別記載有“黃龍?zhí)佟焙汀靶⊙佟保渲小包S龍?zhí)佟眲e名滿山香，來(lái)源為五味子科植物合蕊五味子(KadsurapropinquaWall；SchisalidrapropinquaWall.var.intermediaA.C.Smith)，“小血藤”來(lái)源為五味子科五味子屬植物鐵箍散S.propinqua(Wall.) Baill.var.sinensisOliv.(見(jiàn)圖2)。《草木便方》[19]中亦記載有小血藤，來(lái)源為木蘭科五味子屬植物鐵箍散S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.；《中國(guó)植物志》[6](經(jīng)濟(jì)植物手冊(cè))記載滿山香，來(lái)源為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua(Wall.)Baill.var.intermediaA.C.Smith及其變種鐵箍散S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.五味子屬植物的分類學(xué)訂正研究的報(bào)道[20]，從分布區(qū)、葉片形態(tài)、葉緣情況、花被片數(shù)目和雄蕊數(shù)目、花梗長(zhǎng)短等方面綜合考察后，把S.propinqua(Wall.) Baill.var.intermediaA.C.Smith、S.propinqua(Wall.)Baill.var.sinensisOliv.等名稱作歸并處理，并定名為S.propinqua。本研究通過(guò)查閱本草文獻(xiàn)及相關(guān)的植物學(xué)著作、以及查閱中國(guó)科學(xué)院昆明植物研究所標(biāo)本館有關(guān)S.propinqua(Wall.)Baill.標(biāo)本，認(rèn)為彝藥滿山香的基源植物應(yīng)是木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua，異名有黃龍?zhí)佟⑿⊙佟㈣F箍散等。整理有關(guān)滿山香藥材的傳統(tǒng)藥物學(xué)信息見(jiàn)表1。

圖1 《植物名實(shí)圖考》中繪滿山香(A)、黃龍?zhí)?B)

圖2 《中華本草》中繪黃龍?zhí)?合蕊五味子)(A)、小血藤(鐵箍散)(B)

表1 滿山香藥材的傳統(tǒng)藥物學(xué)信息

2 實(shí)地調(diào)查和樣品采集

2.1 滿山香的資源與生境特征

滿山香主要分布在云南中部至南部，生于海拔2000～2200 m的河谷、山坡常綠闊葉林中。其變種鐵箍散在陜西、甘肅南部、江西、河南、湖北、湖南、四川、貴州有分布，生于溝谷、巖石山坡林中，海拔500～2000 m[6]。在全國(guó)中藥資源普查隊(duì)的幫助下，在云南等地進(jìn)行滿山香野生植物資源調(diào)查及樣品采集，發(fā)現(xiàn)滿山香野生植物成簇生長(zhǎng)，種群稀少，居群內(nèi)個(gè)體數(shù)量少，資源蘊(yùn)藏量較小。滿山香生長(zhǎng)環(huán)境主要分兩種類型，一是生長(zhǎng)在河谷、山坡常綠闊葉林下，在有機(jī)質(zhì)含量較高的腐殖土、濕潤(rùn)肥沃的生境，植物藤莖發(fā)達(dá)，無(wú)主根，以須根為主；二是生長(zhǎng)在山坡石縫中陽(yáng)光充足的地方，植物枝葉茂盛，主根發(fā)達(dá)。

2.2 滿山香植物形態(tài)特征

A嫩枝，B剝?nèi)?shù)皮藤莖，C花蕾，D花，E聚合果，F(xiàn)制作的標(biāo)本圖3 植物滿山香的形態(tài)特征

實(shí)地調(diào)查滿山香植物的形態(tài)特征(見(jiàn)圖3)，落葉木質(zhì)藤本，全株無(wú)毛，新生枝褐色或暗紅色，有銀白色角質(zhì)層。葉堅(jiān)紙質(zhì)，卵形、長(zhǎng)圓狀卵形或狹長(zhǎng)圓狀卵形，先端漸尖，基部鈍或漸尖，具疏離的胼胝質(zhì)齒，近全緣。花橙黃色，單生或2～3朵聚生于葉腋；肉質(zhì)花托近球形，聚合果，種子近球形或橢圓體形，種皮淺灰褐色，光滑，種臍狹長(zhǎng)，長(zhǎng)約為寬的1/3，稍凹入。花期6～7月。與《中國(guó)植物志》[6]記載的木蘭科五味子屬植物合蕊五味子滿山香的描述一致。

另?yè)?jù)實(shí)地調(diào)查中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)根據(jù)植物的嫩枝葉呈現(xiàn)的暗紅色(當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)叫“紅尖尖”)特點(diǎn)在山上尋找滿山香，并根據(jù)根和藤莖剝?nèi)テげ亢蟪尸F(xiàn)出鮮艷的粉紅色的特點(diǎn)確定滿山香。另外，滿山香新鮮莖葉嚼后粘液狀。通過(guò)收集了該植物的形態(tài)特點(diǎn)、俗稱、藥用部位、療效等信息與表1中文獻(xiàn)描述一致。經(jīng)實(shí)地調(diào)查、咨詢當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)、藥商和鄉(xiāng)村醫(yī)生，以及通過(guò)鑒別收集的藥材性狀，表明生產(chǎn)中使用的滿山香是木蘭科五味子屬植物合蕊五味子的根和藤莖。

2.3 樣品采集

本次實(shí)地調(diào)查共采集10個(gè)樣地的滿山香樣品，并制作植物標(biāo)本11份，標(biāo)本現(xiàn)保存于中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院中藥資源中心，經(jīng)郭蘭萍研究員考證均為木蘭科五味子屬植物合蕊五味子S.propinqua。同時(shí)，走訪調(diào)查了國(guó)內(nèi)幾大藥材市場(chǎng)，如云南昆明菊花藥材市場(chǎng)、安徽亳州藥材市場(chǎng)、河北安國(guó)藥材市場(chǎng)、廣州清平藥材市場(chǎng)以及江西樟樹(shù)藥材市場(chǎng)，均未見(jiàn)有滿山香藥材出售。采集滿山香樣品的信息見(jiàn)表2。

表2 滿山香樣品信息

3 藥材滿山香的性狀特征

滿山香植物的根及藤莖較難折斷，折斷面呈刺片狀，鮮藥材的藤莖和葉片嚼之粘液質(zhì)較多；根及莖較粗者切斜片，較細(xì)者直接切斷，置陰涼通風(fēng)處晾干。藥材呈長(zhǎng)圓柱形、或橢圓形，直徑0.1～3.7 cm不等，表面棕褐色或棕黑色，有縱皺紋及棕黃色皮孔。質(zhì)地硬脆，略輕，皮部與木部易分離，皮部棕褐色，木部黃白色或棕黃色；髓部紅棕色或呈空洞。藥材氣香，味辛涼、澀。粉末呈棕黃色或棕綠色，嚼之發(fā)粘。

4 薄層鑒別

文獻(xiàn)報(bào)道[25-27]從滿山香藥材中分離到了五味子丙素、β-谷甾醇、胡蘿卜苷、香草酸、原兒茶酸和紅景天苷等成分，參考研究報(bào)道，購(gòu)買(mǎi)對(duì)照品五味子丙素(批號(hào)20130510，純度≥98.0% HPLC)、β-谷甾醇(批號(hào)20130506，純度≥98.0% HPLC)、胡蘿卜苷(批號(hào)20130409，純度≥98.0% HPLC)、香草酸(批號(hào)20130506，純度≥98.0% HPLC)、紅景天苷批號(hào)20130412，純度≥98.0% HPLC)、原兒茶酸(批號(hào)20130511，純度≥98.0% HPLC)，均由北京北研馨綠生物技術(shù)有限公司提供。取各對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的對(duì)照品溶液，取滿山香對(duì)照藥材粉末1 g，加氯仿30 mL，超聲提取30 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)勇确? mL使溶解，作為供試品溶液，參照《中華人民共和國(guó)藥典》2010版一部附錄ⅪB薄層色譜法)，通過(guò)比較不同展開(kāi)劑展開(kāi)效果，最終選擇以環(huán)己烷-乙酸乙酯-甲酸(9∶3∶1)為展開(kāi)劑，于同一硅膠GF254薄層板上點(diǎn)樣，展開(kāi)，取出，晾干，置于紫外燈(365，254 nm)下檢視，結(jié)果見(jiàn)(圖4)。在365 nm波長(zhǎng)下，只顯示滿山香對(duì)照藥材樣品的熒光斑點(diǎn)，而無(wú)對(duì)照品熒光斑點(diǎn)(圖4A)；在254 nm波長(zhǎng)下，對(duì)照品五味子丙素、香草酸和原兒茶酸有斑點(diǎn)，而對(duì)照藥材樣品在相應(yīng)位置似有微弱的斑點(diǎn)，不能肯定是否有此類成分，鑒別專屬性不強(qiáng)；β-谷甾醇，胡蘿卜苷，紅景天苷對(duì)照品無(wú)斑點(diǎn)(圖4B)。將薄層板噴10%硫酸乙醇液，在105 ℃加熱，致斑點(diǎn)顯現(xiàn)，則對(duì)照品β-谷甾醇和胡蘿卜苷可見(jiàn)清晰的斑點(diǎn)，滿山香對(duì)照藥材的氯仿提取物和甲醇提取物的色譜中，在β-谷甾醇和胡蘿卜苷相應(yīng)的位置上顯示相同顏色的斑點(diǎn)(圖4C)。

按以上方法，取不同產(chǎn)地的滿山香藥材粉末1 g，制成供試品溶液。吸取供試品溶液和β-谷甾醇、胡蘿卜苷對(duì)照品溶液各10 μL，點(diǎn)于同一硅膠GF254薄層板上展開(kāi)，在365 nm波長(zhǎng)下所有供試品都有明顯的熒光斑點(diǎn)，此斑點(diǎn)為滿山香藥材的特征斑點(diǎn)(見(jiàn)圖5A)，在展開(kāi)后的薄層板上噴以10%硫酸乙醇液，在105 ℃加熱，致斑點(diǎn)顯現(xiàn)，在日光下檢視，在與β-谷甾醇和胡蘿卜苷對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，不同產(chǎn)地滿山香藥材樣品的色譜圖上顯現(xiàn)相同顏色的斑點(diǎn)(見(jiàn)圖5B)；用滿山香對(duì)照藥材，可以方便地使用上述薄層方法予以鑒別。

5 討論

野生植物資源是中藥和民族藥制藥產(chǎn)業(yè)重要的材料來(lái)源。目前，滿山香藥材來(lái)源于野生植物資源，制藥廠以收購(gòu)藥農(nóng)采集的野生滿山香藥材為主，少數(shù)民族醫(yī)生則四季采集，自采自用。本次調(diào)查的滿山香野生植物成簇生長(zhǎng)，一般在坡度70度以上的陡坡或陽(yáng)光充沛的山坡石峰中，居群稀少，居群內(nèi)個(gè)體數(shù)量也很少，野生滿山香植物蘊(yùn)藏量較小，與文獻(xiàn)[6]報(bào)道的滿山香分布較廣但蘊(yùn)藏量相對(duì)較小的描述一致。另外，野生滿山香的生長(zhǎng)年限不易斷定。當(dāng)?shù)厮庌r(nóng)只能根據(jù)其根莖的直徑大小，粗略地估計(jì)其生長(zhǎng)年限大約在3、5年、或10年、20年不等。《云南省藥品標(biāo)準(zhǔn)》中滿山香的藥用部位為根及莖，根莖的長(zhǎng)期采挖可能導(dǎo)致其資源的破壞，甚至引起地區(qū)性滅絕。因此，建議開(kāi)展?jié)M山香野生植物的人工馴化，進(jìn)行引種栽培，以保證滿山香藥材資源的持續(xù)利用。

本研究薄層鑒別圖譜中，可能含有文獻(xiàn)報(bào)道[7-9]的五味子丙素、香草酸和原兒茶酸成分，但是含量低，薄層鑒別不明顯；另外，在本研究條件下，圖譜中未發(fā)現(xiàn)紅景天苷對(duì)照品的蹤跡，滿山香藥材中是否含有紅景天苷成分，需要改變實(shí)驗(yàn)手段，或利用其它研究途徑予以證實(shí)。雖然本研究通過(guò)優(yōu)化提取條件和薄層分離條件，建立了滿山香藥材的薄層鑒別方法。但是，β-谷甾醇和胡蘿卜苷在植物中普遍存在，本文建立的鑒別方法難以反映藥材的質(zhì)量。并且，不同產(chǎn)地來(lái)源的滿山香藥材，薄層色譜上的差異不明顯。對(duì)于不同產(chǎn)地來(lái)源的滿山香藥材的鑒別，需要通過(guò)改進(jìn)檢測(cè)手段(如：遺傳特征鑒別、特征化學(xué)成分鑒別等方法)進(jìn)一步研究。因此，建議開(kāi)展?jié)M山香藥材的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究，考察產(chǎn)地、生長(zhǎng)年限、采樣季節(jié)等條件對(duì)藥材質(zhì)量的影響，建立質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對(duì)藥材的質(zhì)量進(jìn)行控制。

致謝：感謝第四次全國(guó)中藥資源普查隊(duì)和昆明制藥集團(tuán)股份有限公司在實(shí)地調(diào)查和樣品采集過(guò)程中提供的幫助，感謝昆明制藥集團(tuán)股份有限公司提供滿山香對(duì)照藥材樣品。

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StudyonResourcesInvestigationandIdentificationofSchisandrapropinqua(Wall.)Baill.

HAOQingxiu，LIUChao，JINYan，ZhangYan，LIXiaoming，KANGLiping，GUOLanping*

(StateKeyLaboratoryBreedingBaseofDao-diHerbs，NationalResourceCenterforChineseMateriaMedica，ChinaAcademyofChineseMedicalSciences，Beijing100700，China)

Objective：To investigate the wild plant resources and establish identification methods for the herb Manshanxiang，an herb of Yi nationality.Methods：Herbal textual research，field investigation，sample collection and morphological characteristics identification，and TLC identification were applied to the study.Results：The source of herb Manshanxiang is the plant roots and cane ofSchisandrapropinqua(Wall.) Baill.(S.propinqua).The reserve of wild plantS.propinquawas low.S.propinquagenerally grows in clusters under the evergreen broad-leaved valley，or in sunny slopes，or in rock crevices.The shoots were in dark red and the rhizome showing bright pink after stripped epidermis.All samples extracts showed characteristics fluorescence spots at wavelength 365 nm，and showed the same color spot compared with the reference substance ofβ-sitosterol and daucosterol on the corresponding position by TLC.Conclusion：The reserve ofS.propinquawas low.The wild plant ofS.propinquahad its characteristic.Herbal medicine ofS.propinquacan be identified by TLC.

Schisandrapropinqua；resources investigation；characteristics；TLC；β-sitosterol；daucosterol

2015-01-05)

國(guó)家科技支撐計(jì)劃(2012BAI29B02)；國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目(81130070)；國(guó)家中醫(yī)藥管理局行業(yè)科研專項(xiàng)(201107009，201207002)；北京中醫(yī)藥薪火傳承3+3工程項(xiàng)目；中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院“名醫(yī)名家傳承”項(xiàng)目(CM20143001)

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郭蘭萍，研究員，研究方向：中藥資源生態(tài)研究；Tel：(010)64014411-2830，E-mail：glp01@126.com

10.13313/j.issn.1673-4890.2015.7.013