GC—MS法對金線蘭揮發(fā)油化學成分的分析

張海等

摘要：利用索氏提取法和超聲輔助提取法，分別通過非極性溶劑（石油醚）、極性溶劑（乙醇）來提取金線蘭[Anoectochilus raxburghii （Wall.） Lindl]揮發(fā)油，并采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定化合物組成。結(jié)果表明，石油醚索氏提取法效果最佳，共檢出34種成分，鑒定出26種化合物，占揮發(fā)油總量的86.3%，主要成分為葉綠醇32.823%，油酸28.759%，植物醇5.271%，油酸酰胺4.797%，反式角鯊烯3.484%，植酮2.787%，2-單棕櫚酸甘油1.789%。該結(jié)果將為金線蘭的進一步開發(fā)提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞：金線蘭[Anoectochilus raxburghii （Wall.） Lindl]；揮發(fā)油；索氏提取；超聲輔助提取；化學成分

中圖分類號：R282.71 文獻標識碼：A 文章編號：0439-8114（2015）-18-4581-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.18.048

金線蘭[Anoectochilus raxburghii（Wall.）Lindl]別名金蠶、石蠶、金線蓮等，是蘭科開唇蘭屬的植物，中文學名是花葉開唇蘭，主要分布于中國福建、廣東、廣西、浙江、江西、云南、四川、貴州、臺灣等地[1]。金線蘭是一種珍貴的稀有藥材，全株都可入藥，藥性溫和、味道甘甜，具有清熱解毒、祛風利濕功效。近年來，金線蘭逐漸用于促進兒童生長發(fā)育[2]，預(yù)防治療高血壓、高尿酸血癥[3]、糖尿病[4]、急慢性肝炎、腎炎、癌癥[5]等，另外，金線蘭用于治療臨床上的一些疾病也取得了良好效果[6，7]。但迄今為止，對該植物的研究主要集中在人工栽培、組培、藥理等方面，其有效成分與揮發(fā)性成分報道較少。該試驗以野生金線蘭為材料，采用索氏提取、超聲輔助提取的方法，分別以乙醇、石油醚為提取劑，通過索氏提取、超聲輔助提取揮發(fā)油，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析揮發(fā)油的化學組成，以期為金線蘭的開發(fā)和利用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

藥材為野生金線蘭，采自福建，由遵義師范學院生命科學學院何林副教授鑒定為蘭科開唇蘭屬植物花葉開唇蘭Anoectochilus roxburghii （Wall.）Lindl。

試驗所用試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 儀器

TRACE ISQ型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀（美國熱電公司）、電子天平（梅特勒—托利多儀器上海有限公司），粉碎機、烘箱、磁力攪拌器（上?？粕齼x器有限公司），旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器（上海亞榮生化儀器廠），循環(huán)式真空泵（鞏義市予華儀器有限責任公司），高頻數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）。

1.3 方法

1.3.1 樣品前處理 金線蘭樣品用去離子水洗凈，于80 ℃烘箱中干燥8 h后，粉碎并過80目篩，待用。

1.3.2 索氏提取法提取 稱取10 g金線蘭粉末用濾紙包好，置于索氏提取器中，加入乙醇100 mL（V/V=1∶10），加熱回流提取5 h，收集全部提取液，繼續(xù)重復(fù)2次，直至提取液無色，合并提取液，濃縮。溶劑改為石油醚，重復(fù)上述試驗。

1.3.3 超聲提取法提取 稱取10 g金線蘭粉末于具塞錐形瓶中，加入乙醇100 mL，超聲波（100 W，80 KHz，30 ℃）提取1 h，分別用濾紙，0.45 μm微孔濾膜過濾，合并濾液，濃縮。溶劑改為石油醚，重復(fù)上述試驗。

1.3.4 金線蘭揮發(fā)油的GC-MS分析 色譜柱TR-5MS（30 m×0.25 mm×0.25 μm；柱溫：70 ℃（1 min），以5 ℃/min升溫至300 ℃（10 min）；氣化室溫度280 ℃；載氣為高純度He（99.99%）；流速1.0 mL/min；進樣量1 μL；分流比為20∶1。質(zhì)譜條件：離子源為EI源；離子源為280 ℃；電子能量70 eV；傳輸線溫度280 ℃；質(zhì)量掃描范圍為50～500 amu。定性分析通過Xcalibur色譜工作站檢索標準MS圖庫，同時結(jié)合有關(guān)MS圖文獻解析，確認金線蘭揮發(fā)性物質(zhì)的化學成分。同時按峰面積歸一化法計算，求出金線蘭各化學成分的峰面積相對百分含量。

2 結(jié)果與分析

石油醚索氏提取金線蘭揮發(fā)油總離子流見圖1。

GC-MS檢出的各化學成分及其峰面積相對百分含量，見表1～表4。

該試驗分析了不同方法、不同溶劑提取的金線蘭揮發(fā)油的結(jié)果。其中乙醇的索氏提取揮發(fā)油中檢出16個成分，鑒定出11個化合物，并用氣相色譜峰面積百分比法測定了各種組分的相對百分含量，占揮發(fā)油總量的75.17%（表1）。石油醚索氏提取的揮發(fā)油中檢出34個成分，鑒定出26個化合物，占揮發(fā)油總量的86.3%（表2）。乙醇超聲輔助提取的揮發(fā)油中檢出16種成分，鑒定出8種化合物，占揮發(fā)油總量的82.66%（表3）；石油醚超聲輔助提取的揮發(fā)油中檢出26種成分，鑒定出10種化合物，占揮發(fā)油總量的47.48%（表4）。

由表1～表4中可知，野生金線蘭的揮發(fā)油中，主要成分為萜類化合物和鏈狀芳香族化合物（脂肪酸、醇類、烷烴類、醛以及酯）等。對比研究表明，4種提取工藝中石油醚索氏提取法效果最佳，共檢出34種成分，鑒定出26種化合物，其中含量最高的為葉綠醇32.823%，油酸28.759%，植物醇5.271%，油酸酰胺4.797%，反式角鯊烯3.484%，植酮2.787%，2-單棕櫚酸甘油1.789%。其中葉綠醇及其代謝產(chǎn)物不僅是機體氧化代謝的重要能量來源，而且在糖脂代謝、脂肪細胞分化聚酯調(diào)控方面具有生物學功能，能有效減少肝臟中的脂肪累積。油酸可降低血液總膽固醇和有害膽固醇，卻不降低有益膽固醇。反式角鯊烯對于治療高、低血壓，貧血，糖尿病，肝硬化，癌癥等有較好的療效。

3 小結(jié)

通過對比研究不同溶劑、不同提取方法的金線蘭揮發(fā)油化學成分，結(jié)果表明，石油醚索氏提取法效果最佳，共檢出了4種成分，鑒定出26種化合物，其結(jié)果有望為進一步優(yōu)化金線蘭活性成分提取工藝提供理論依據(jù)。

參考文獻：

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