Smads蛋白家族在大鼠放射性肝纖維化形成過程中的表達(dá)

高世樂，胡宗濤，秦　峰，朱　杰，黃德武，董六一

（1. 解放軍第105醫(yī)院腫瘤三科，合肥 230031；2. 安徽醫(yī)科大學(xué)，安徽省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合肥 230032；3. 安徽醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室，教育部抗炎免疫藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國家中醫(yī)藥管理局中藥藥理三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，合肥 230032）

Smads蛋白家族在大鼠放射性肝纖維化形成過程中的表達(dá)

高世樂1，胡宗濤1，秦峰1，朱杰1，黃德武2，董六一3

（1. 解放軍第105醫(yī)院腫瘤三科，合肥 230031；2. 安徽醫(yī)科大學(xué)，安徽省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合肥 230032；3. 安徽醫(yī)科大學(xué)藥理學(xué)教研室，教育部抗炎免疫藥理學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，國家中醫(yī)藥管理局中藥藥理三級(jí)實(shí)驗(yàn)室，合肥 230032）

目的探討Smad2/3/7、TGF-β1蛋白在大鼠放射性肝纖維化（RHF）形成過程中的表達(dá)情況。方法建立雄性SD大鼠RHF模型。將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組、照射組（2周、4周、8周、12周、26周），除正常對(duì)照組外，其余各組大鼠均制備成RHF模型。在照射后第2周、4周、8周、12周、26周末，分別剖檢各組大鼠，取肝臟標(biāo)本備用。光學(xué)顯微鏡下觀察大鼠肝臟組織HE染色變化，免疫組織化學(xué)法測(cè)大鼠肝臟組織Smad2/3/7、TGF-β1蛋白含量表達(dá)。結(jié)果與正常對(duì)照組相比，照射組大鼠肝臟損傷及纖維化程度明顯增加，肝臟組織免疫組織化學(xué)Smad2蛋白含量增加（P＜0.05），Smad3、TGF-β1蛋白含量明顯增加（P＜0.01），Smad7蛋白含量明顯減少（P＜0.01）。結(jié)論隨著大鼠RHF的加重，Smad2/3、TGF-β1蛋白表達(dá)增加，Smad7蛋白表達(dá)下調(diào)。

Smads蛋白家族；大鼠；放射性肝纖維化（RHF）

肝臟是中度輻射敏感器官之一，在受到較大劑量照射時(shí)，會(huì)出現(xiàn)急性放射性肝損傷、肝功能損害、進(jìn)行性肝纖維化、乃至個(gè)體死亡［1］。由于放療在腹部腫瘤中的廣泛運(yùn)用，尤其是近年來常規(guī)放療（conventional radiotherapy，CR）、三維適形放療（three-dimensional conformal radiotherapy，3-DCRT）、調(diào)強(qiáng)放療（intensity modulated radiation therapy，IMRT）、伽馬刀治療（gamma knife treatment，γ-T）在肝臟惡性腫瘤治療中的應(yīng)用增加，越來越多的肝臟惡性腫瘤患者因個(gè)體差異不能耐受治療劑量，影響放療療程，部分患者甚至影響遠(yuǎn)期療效和晚期生活質(zhì)量。因此制備放射性肝纖維化（radioactive hepatic fibrosis，RHF）動(dòng)物模型，研究其作用機(jī)制對(duì)臨床防治RHF顯得十分重要［2］。

肝纖維化（HF）是各種原因引起的慢性肝病向肝硬化轉(zhuǎn)變的共同病理過程，其機(jī)制是肝臟細(xì)胞外基質(zhì)異常增生與過度沉積［3］。HF的形成主要經(jīng)TGF-β1/ Smads信號(hào)傳導(dǎo)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，在此過程中，Smad3蛋白是TGF-β1/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路過程中的關(guān)鍵信號(hào)蛋白，TGF-β1起中心環(huán)節(jié)作用［4］。有文獻(xiàn)［5］報(bào)道，可通過抑制Smad3蛋白的表達(dá)，而抑制TGF-β1/ Smads信號(hào)傳導(dǎo)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而阻斷甚至逆轉(zhuǎn)HF的產(chǎn)生。本文作者初步探討了Smads蛋白家族在大鼠RHF中的可能作用機(jī)制，為臨床預(yù)防治療RHF提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

清潔級(jí)雄性SD大鼠，5～6周齡，體質(zhì)量200± 20 g，由安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供 ［SCXK（皖）2011-007］。飼養(yǎng)于安徽醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心［SYXK（皖）2011-007］，溫度20±2℃，相對(duì)濕度50%～70%。

1.2試劑

Smad2/3/7、TGF-β1 II抗免疫組織化學(xué)試劑盒: 北京博鰲森生物技術(shù)有限公司；I抗試劑盒: 武漢博士德生物工程有限公司；0.01 mmol/L磷酸鹽緩沖液（PBS）: 北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，ZLI-9061；0.01 mmol/L pH6.0檸檬酸鹽緩沖液（CBS）: 北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，ZLI-9066。

1.3儀器

NOVA型切片機(jī): 瑞典LKB；QP切片漂烘溫控儀: 安徽電子科學(xué)研究所；美國VARIN21-EX直線加速器: 美國瓦里安醫(yī)療器械公司；單光子共聚焦成像系統(tǒng): Lecia公司；Nikon ACT-1 中文版（Nikon 80i螢光顯微鏡）: 新飛達(dá)光學(xué)儀器公司；JEDR801D形態(tài)學(xué)圖像分析系統(tǒng)Version6.0: 捷達(dá)科技有限公司。

1.4方法［6］

將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為正常對(duì)照組和5個(gè)照射組（2周、4周、8周、12周、26周），各組大鼠均給予體積分?jǐn)?shù)10%水合氯醛0.3 mL/100 g麻醉，全身麻醉生效后，大鼠取仰臥位，固定四肢，直線加速器下照射大鼠右半部肝臟，每只大鼠右側(cè)胸腔、胃腸、左肝及其它周邊重要器官均用10 cm厚鉛塊遮擋，源皮距100 cm，劑量率600 cGy/min，3 000 cGy/1F，照射野2 cm×2 cm；正常對(duì)照組只麻醉，不照射。照射組大鼠于照射后第2周、4周、8周、12周、26周周末，分批全身麻醉后剖檢，取肝右葉體積分?jǐn)?shù)10%甲醛液固定，常規(guī)石蠟包埋。正常組大鼠于第4周末處死做對(duì)照，標(biāo)本收集同上。

1.4.1肝臟組織HE病理組織學(xué)觀察肝臟組織脫蠟至水、透明、包埋、切片，厚4 μm；依次給予二甲苯脫蠟、酒精復(fù)水、蘇木精染色、酒精脫水、伊紅染色、烤干、二甲苯透明、封片。光學(xué)顯微鏡下觀察，肝損傷評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)［7］見表1。

1.4.2肝臟組織免疫組織化學(xué)法測(cè)定Smad2/3/7、TGF-β1含量采用鏈霉親和素生物素過氧化物酶復(fù)合物（SABC）法，石蠟切片常規(guī)二甲苯脫蠟、酒精水化、檸檬酸鹽緩沖液抗原修復(fù)，再自然冷卻；體積分?jǐn)?shù)3%H2O237 ℃溫育，5%正常山羊血清37 ℃封閉，加I抗（50 μL），4 ℃過夜；次日復(fù)溫，加II抗，滴加SABC液，DAB顯色5 min，蘇木精復(fù)染，二甲苯透明，中性樹膠封片，再烤干。

表 1　肝纖維化病理分級(jí)判定標(biāo)準(zhǔn)

在各肝組織內(nèi)隨機(jī)選取10個(gè)視野（×400），染色，以胞膜、胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色或黃褐色沉淀物為陽性表達(dá)。

1.4.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法用SPSS15.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行處理，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示，多組數(shù)據(jù)間采用單因素方差分析或卡方檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)果

2.1各組大鼠肝臟病理組織學(xué)變化

正常對(duì)照組大鼠肝小葉結(jié)構(gòu)形態(tài)正常，肝細(xì)胞索由中央靜脈向四周排列整齊，無明顯變性、壞死，匯管區(qū)、膽管結(jié)構(gòu)正常（圖1A）。照射組大鼠第2周末膠原纖維從匯管區(qū)或中央靜脈向外延伸（圖1B）；第4周末膠原纖維延伸明顯，但尚未相互連接包繞整個(gè)肝小葉（圖1C）；第8周末膠原纖維延伸連接，包繞整個(gè)肝小葉（圖1D）；第12周末膠原纖維包繞分割肝小葉，正常肝小葉結(jié)構(gòu)破壞，假小葉形成以六方形為主（圖1E）；第26周末肝小葉完全破壞，假小葉形成以小圓形為主，假小葉間可見增粗的膠原纖維（圖1F）。

照射組各組大鼠肝臟組織膠原纖維半定量評(píng)分同正常對(duì)照組相比，自第2周開始升高，至第26周達(dá)峰值，除第2周差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外，其余各組差異均P＜0.01，反映照射組大鼠自第2周開始至第26周，隨著照射后時(shí)間的延長，肝臟內(nèi)膠原纖維逐漸增多，范圍由匯管區(qū)、中央靜脈逐漸包繞至整個(gè)肝小葉，肝臟損傷逐步加重（表2）。

圖 1　大鼠肝臟病理組織學(xué)變化（HE×400）

表 2　大鼠肝臟組織膠原纖維半定量評(píng)分（HE×400）

2.2大鼠肝臟組織Smad2/3/7、TGF-β1含量的變化

2.2.1Smad2蛋白含量的變化正常對(duì)照組大鼠肝臟組織Smad2蛋白表達(dá)較少，為棕黃色或棕褐色顆粒沉積于肝細(xì)胞胞質(zhì)、胞膜以及中央靜脈或匯管區(qū)（圖2A）。照射組第2周末Smad2蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組稍增多（圖2B）；第4周末Smad2蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組增多，且多于第2周末（圖2C）；第8周末Smad2蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組進(jìn)一步增多，且多于第2周和第4周末，達(dá)到峰值（圖2D）；第12周末Smad2蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組、第2周和第4周末進(jìn)一步增多，但略低于第8周末（圖2E）；隨著照射時(shí)間的延長，第26周末Smad2蛋白表達(dá)較第12周末增加，但仍低于第8周末（圖2F）。

圖 2　大鼠肝臟組織免疫組織化學(xué)Smad2蛋白表達(dá)（×400）

2.2.2Smad3蛋白含量的變化正常對(duì)照組大鼠肝臟組織Smad3蛋白表達(dá)較少，為棕黃色或棕褐色顆粒沉積于肝細(xì)胞胞質(zhì)、胞膜以及中央靜脈（圖3A）。照射組第2周末Smad3蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組增多（圖3B）；第4周末Smad3蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組及第2周末組進(jìn)一步增多（圖3C）；第8周末Smad3蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組、第2周和第4周末持續(xù)增多（圖3D）；第12周末Smad3蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組、第2周和第4周末、第8周末明顯增多，達(dá)到峰值（圖3E）；但第26周末Smad3蛋白表達(dá)較第12周末稍減少，仍高于其余各組表達(dá)（圖3F）。

2.2.3Smad7蛋白含量的變化正常對(duì)照組大鼠肝臟組織Smad7蛋白表達(dá)較多，為棕黃色或棕褐色顆粒沉積于肝細(xì)胞胞質(zhì)、胞膜以及中央靜脈（圖4A）。照射組第2周末Smad7蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組稍減少（圖4B）；第4周末Smad7蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組及第2周末組進(jìn)一步減少（圖4C）；第8周末Smad7蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組、第2周和第4周末繼續(xù)減少（圖4D）；第12周末Smad7蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組、第2周和第4周末、第8周持續(xù)減少，達(dá)到谷值（圖4E）；但第26周末Smad7蛋白表達(dá)較第12周末稍增加，仍低于其余各組表達(dá)（圖4F）。

圖 3　大鼠肝臟組織免疫組織化學(xué)Smad3蛋白表達(dá)（×400）

圖 4　大鼠肝臟組織免疫組織化學(xué)Smad7蛋白表達(dá)（×400）

2.2.4TGF-β1蛋白含量的變化正常對(duì)照組大鼠肝臟組織TGF-β1蛋白表達(dá)較少，為棕黃色顆粒沉積于肝細(xì)胞胞質(zhì)、胞膜（圖5A）。照射組第2周末TGF-β1蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組增多（圖5B）；第4周末TGF-β1蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組及第2周末組進(jìn)一步增多（圖5C）；第8周末TGF-β1蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組、第2周和第4周末持續(xù)增多（圖5D）；第12周末TGF-β1蛋白表達(dá)較正常對(duì)照組、第2周和第4周末、第8周末明顯增多，達(dá)到峰值（圖5E）；但照射組第26周末TGF-β1蛋白表達(dá)較第12周末稍減少，仍高于其余各組表達(dá)（圖5F）。

2.2.5Smad2/3/7及TGF-β1蛋白平均吸光度值表達(dá)免疫組織化學(xué)法測(cè)定結(jié)果詳見表3。

圖 5　大鼠肝臟組織免疫組織化學(xué)TGF-B1蛋白表達(dá)（×400）

表 4　Smad2、Smad3、Smad7、TGF-β1蛋白平均吸光度值表達(dá)

3　討論

RHF是肝臟惡性腫瘤放療過程中的主要并發(fā)癥，局部常規(guī)分割劑量Dt 50～60 Gy［8］，單次大劑量照射（＞30 Gy）可引起明顯肝損傷［9］。在治療劑量的同時(shí)，不可避免地引起放療區(qū)正常肝臟細(xì)胞的損傷，引起急性放射性肝損傷和肝纖維化。因此，探討RHF的發(fā)生機(jī)制，為臨床預(yù)防治療提供理論依據(jù)，確保有效臨床靶區(qū)劑量治療的同時(shí)，減少肝臟損傷，提高治療效果。

RHF在國內(nèi)、外已成研究熱點(diǎn)，彭瑞云等［7］通過建立大鼠RHF模型，指出肝臟受損傷時(shí)，HSC激活，細(xì)胞外基質(zhì)增生過多與降解減少，是導(dǎo)致肝纖維化形成的重要機(jī)制。HSC激活后經(jīng)TGF-β1/ Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路轉(zhuǎn)導(dǎo)，Smads蛋白家族是把TGF-β1與其受體結(jié)合后產(chǎn)生的信號(hào)從胞質(zhì)轉(zhuǎn)導(dǎo)到細(xì)胞核內(nèi)的信號(hào)中介分子。

Smads蛋白家族［10］主要有: ①受體激活型Smad （R-Smad），包括Smad1、2、3、5、8；②通用型Smad（Co-Smad），僅有Smad4；③抑制型Smad （I-Smad），包括Smad6、7。其中R-Smad對(duì)TGF-β1/ Smads 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)起促進(jìn)作用，I-Smad起抑制作用，其轉(zhuǎn)導(dǎo)過程均需Co-Smad參與完成［11］。通過以下途徑完成: TGF-β1先與TβRⅡ二聚體結(jié)合，隨后與TGF1-βⅠ二聚體形成異四聚體進(jìn)而作用于胞質(zhì)內(nèi)下游分子，開啟信號(hào)傳導(dǎo)，激活Smad2和Smad3，使Smad2 和Smad3分子磷酸化，磷酸化后的Smad 2 和Smad 3 與Smad 4 形成異源寡聚物，將TGF-β1信號(hào)從胞質(zhì)向胞核部位聚集，調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄［12］。

Smad2 和Smad3具有較高的同源性，都是由高度保守的N-末端結(jié)構(gòu)域又稱mad同源體1（MH1）和C-末端結(jié)構(gòu)域（MH2）構(gòu)成，其結(jié)構(gòu)主要區(qū)別在于MH1，Smad2的MH1比Smad3多了2個(gè)氨基酸片段，使得Smad3可直接與DNA結(jié)合，產(chǎn)生信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)［13］。有文獻(xiàn)［14］報(bào)道，Smad2主要表達(dá)在靜止的肝星狀細(xì)胞（HSC），Smad3主要表達(dá)在活化的HSC，而HSC只有被激活后才轉(zhuǎn)化為肌成纖維細(xì)胞，因此Smad3是介導(dǎo)TGF-β1引起肝纖維化的關(guān)鍵分子，Smad 3與肝纖維化形成的關(guān)系更為密切，呈正相關(guān)作用。研究表明，TGFβ1的大多數(shù)促纖維化作用是由Smad3介導(dǎo)的，證實(shí)在大鼠實(shí)驗(yàn)性肝纖維化過程中伴有Smad3表達(dá)水平的明顯增加［15，16］。此外，Smad7與TβRⅠ競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合后，干擾Smad 2、3 與Smad 4結(jié)合，使與R- Smads結(jié)合的TGFβ1- TβR子I- TβR II三重復(fù)合物減少，即Smad7抑制TGF-β1/ Smads傳導(dǎo)，產(chǎn)生抗纖維化作用［17］。而Smad4是轉(zhuǎn)導(dǎo)TGF-β1信號(hào)的重要胞質(zhì)內(nèi)信號(hào)級(jí)聯(lián)分子，受體激活型Smad需與Smad4結(jié)合后形成寡聚體，才能發(fā)揮TGF-β1/Smads通路的生物學(xué)效應(yīng)；同樣，抑制型Smad也需與Smad4相互結(jié)合后，才能抑制TGF-β1信號(hào)的傳導(dǎo)。因此抑制Smad3蛋白表達(dá)，可抑制TGF-β1/Smads信號(hào)傳導(dǎo)通路，阻止甚至逆轉(zhuǎn)肝纖維化。

本實(shí)驗(yàn)采用美國直線加速器單次大劑量照射大鼠右半肝，成功復(fù)制了急性放射性肝損傷和肝纖維化模型，模仿人體在放療過程中產(chǎn)生的肝臟損傷。放射性肝損傷和肝纖維化的診斷要點(diǎn)為：肝臟病理學(xué)檢查及受損肝細(xì)胞區(qū)域有放療史。因此本文作者通過動(dòng)態(tài)觀察受照射大鼠肝臟不同時(shí)間點(diǎn)肝臟病理組織學(xué)以及相關(guān)細(xì)胞因子免疫組織化學(xué)的改變，探討其可能發(fā)生的作用機(jī)制。

光學(xué)顯微鏡下觀察，自第2周部分受照射大鼠出現(xiàn)肝細(xì)胞明顯水腫、氣球樣變；4～8周可見肝細(xì)胞點(diǎn)狀壞死，匯管區(qū)炎性細(xì)胞浸潤；12周出現(xiàn)碎片狀和橋接狀壞死，部分形成肝纖維化；26周壞死區(qū)纖維間隔形成，可見假小葉，肝纖維化進(jìn)一步加重，少數(shù)發(fā)展成肝硬化、甚至肝腹水，與文獻(xiàn)報(bào)道基本一致。

免疫組織化學(xué)觀察，可見與肝纖維化發(fā)生機(jī)制相關(guān)的Smad2/3/7、TGF-β1蛋白于肝臟細(xì)胞質(zhì)和胞膜上呈棕黃色或棕褐色顆粒沉積，而正常組無或少量改變。隨著照射后時(shí)間延長，Smad2/3改變與肝纖維化進(jìn)展過程呈正比，其中Smad3至第4周上升，第12周時(shí)表達(dá)呈最高峰，第26周部分損傷下降。而Smad7的表達(dá)呈相反，與文獻(xiàn)報(bào)道基本相符。上述結(jié)果初步得出，單次大劑量照射大鼠右半肝臟，可誘發(fā)RHF發(fā)生，隨著肝纖維化的進(jìn)展，Smad2/3蛋白均表達(dá)于細(xì)胞質(zhì)并逐漸增加，提示其發(fā)生機(jī)制與TGF-β1/Smad信號(hào)傳導(dǎo)通路有關(guān)，有明顯的促纖維化作用，并可作為檢測(cè)RHF的指標(biāo)。所測(cè)指標(biāo)平均光密度值與正常對(duì)照組的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05或P＜0.01）。

在RHF的過程中，對(duì)與其發(fā)生機(jī)制密切相關(guān)的TGF-β1/Smads通路的研究，有助于為其防治提供新的可能途徑。Smads蛋白為TGF-β1受體下游的主要信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)因子，對(duì)Smads蛋白的干預(yù)可明顯逆轉(zhuǎn)肝纖維化，可為進(jìn)一步研究提供方向。Smad2/3的表達(dá)對(duì)肝纖維化起促進(jìn)作用，抑制Smad2/3的表達(dá)可以減輕肝纖維化；Smad7是TGF-β1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的負(fù)性調(diào)控蛋白，提高Smad7肝內(nèi)表達(dá)，可阻斷肝纖維化的發(fā)展。

由此可見，RHF的形成是在Smads蛋白家族的共同作用下完成的，阻止和逆轉(zhuǎn)肝纖維化，是防止肝纖維化發(fā)生的關(guān)鍵，深入了解TGF-β1/Smads信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路對(duì)于防治肝纖維化具有重要意義。

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Expression of Smads Protein Family in Radiationinduced Rats Liver Fibrogenesis

GAO Shi-le1，HU Zong-tao1，QIN Feng1，ZHU Jie1，HUANG De-wu2，DONG Liu-yi3
（1. The 3rd Tumor Section，105th Hospital of Chinese PLA，Hefei 230031，China；2. Anhui Laboratory Animal Center，Anhui Medical University，Hefei 230032，China；3. Department of Pharmacology，Key Laboratory of Anti-inflammatory and Immunopharmacology，Ministry of Education，Key Laboratory of Chinese Medicine Research and Development，State Administration of Traditional Chinese Medicine，Anhui Medical University，Hefei 230032，China）

ObjectiveTo investigate the expression of Smad2/3/7、TGF-β1proteins in radioactive liver fibrosis process of rats. MethodsThe experimental animal model of radioactive liver fibrosis was established in male SD rats. The rats were randomly divided into normal control group and irradiated groups （2，4，8，12 and 26 weeks），except normal control group，other groups all were made into model of radioactive liver fibrosis. The rats were sacrificed and isolated liver tissue as backup on 2nd、4th、8th、12th、26th weekend after radiation. The changes of rats liver tissue was detected by HE staining under light microscope. The expression of rats liver tissue Smad2/3/7、TGF-β1 proteins was detected by immunohistochemitry staining. ResultsCompared with the normal control group，the liver injury and liver fibrosis of irradia ted groups were increased obviously，Smad2 proteins content of liver tissue increased（P＜0.05），Smad3、TGF-β1 proteins content increased obviously （P＜0.01），and Smad7proteins content reduced obviously （P＜0.01）. ConclusionWith the aggravation of radioactive liver fibrosis in rats，the expression of Smad2/3、TGF-β1 proteins increased，the expression of Smad7 proteins reduced.

Smads proteins family；Rats；Radioactive liver fibrosis（RHF）

Q95-33

A

1674-5817（2015）03-0188-07

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.03.003

2014-08-25

解放軍第105醫(yī)院重點(diǎn)課題（No.2010YG12）

高世樂（1982-），男，碩士，研究方向: 放射性肝纖維化。E-mail: gslhf0551@163.com胡宗濤（1972-），共同第一作者，男，博士，副主任醫(yī)師，研究方向: 腫瘤放療。E-mail: huxuyan@163.com

董六一（1973-），男，博士，教授，研究方向: 腫瘤藥理學(xué)。E-mail: dongly@ahmu.edu.cn