兩個群體巴馬小型豬血液生理生化指標比較

楊李廠，丁　雋，周新初，任伯民，謝　東，楊偉敏

（1. 上海睿智化學研究有限公司，上海 201203；2. 上海交通大學農業與生物學院，上海 200240；3. 江蘇省吳江田宇生物科技有限公司，蘇州 215222）

兩個群體巴馬小型豬血液生理生化指標比較

楊李廠1，丁雋1，周新初2，任伯民3，謝東1，楊偉敏1

（1. 上海睿智化學研究有限公司，上海 201203；2. 上海交通大學農業與生物學院，上海 200240；3. 江蘇省吳江田宇生物科技有限公司，蘇州 215222）

目的比較兩個群體巴馬小型豬血液生理和生化學指標。方法分別選取兩個群體4～8月齡的巴馬小型豬40頭（雌雄各半），測定其血液生理生化指標，并進行比較。結果對兩個群體巴馬小型豬血常規指標比較，有9項指標［紅細胞比積（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、血小板數（PLT）、中性粒細胞數（NE）、淋巴細胞數（LY）、單核細胞數（MO）、嗜酸粒細胞數（EO）、嗜堿粒細胞數（BA）］差異有統計學意義（P＜0.05）。兩個群體巴馬小型豬血液生化指標比較，有8項指標［丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、總蛋白（TP）、堿性磷酸酶（ALP）、尿素氮（BUN）、肌酐（CRE）、甘油三酯（TG）、總膽固醇（TC）］差異有統計學意義（P＜0.05）。結論不同群體巴馬小型豬的血液生理、生化指標存在一定差異，在藥物代謝、藥效以及毒理實驗等研究中應引起重視。

小型豬；血液生理；血液生化

上海是較早建立實驗用小型豬地方標準的地區之一，該標準詳細規定了實驗用小型豬的遺傳分類方法，規范了環境與設施的技術要求，為生物醫藥研究，生物制品生產，以及人體器官移植等研究和應用提供了較標準的實驗動物。由于豬在解剖學、生理學、營養代謝等方面與人類相似，已經被高校、科研院所以及外資研發機構廣泛使用。小型豬的血液生理和生化指標等是病理、生理以及毒理學研究工作的重要基礎性指標。本實驗選擇兩個群體普通級巴馬小型豬，分別檢測分析個體間部分血液生理和生化指標以及性別間差異。

1　材料與方法

1.1實驗動物

1.1.1動物來源4～8月齡普通級巴馬小型豬各40頭，雌雄各半，分別由上海華新特種養殖場（A單位） ［SCXK （滬） 2007-0013］ 和江蘇省吳江田宇生物科技有限公司（B單位）［SCXK（蘇）2011-0001］ 提供，種源來自廣西原產地。

1.1.2動物飼養條件兩個群體均為普通級環境，室溫20 ～ 25 ℃，相對濕度30% ～ 80%，飼養管理方法基本相同，每日定時、定量飼喂飼料，自由飲水。

1.2方法

1.2.1血樣采集所有動物采血前過夜禁食 （12～15 h），在清醒狀態下從前肢或是前腔靜脈取血，每只動物采血量為4～5 mL，分別用于血液生理指標和生化指標的測定。

1.2.2血液生理指標檢測取1 mL全血用EDTA抗凝，兩個群體分別以S y s me x X T-2 0 0 i v和HEMAVET950全自動五分類動物血液分析儀檢測紅細胞數（RBC）、白細胞數（W BC）、血紅蛋白（HGB）、紅細胞比積（HCT）、平均紅細胞體積（MCV）、平均紅細胞血紅蛋白（MCH）、平均血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細胞容積分布寬度（RDW）、血小板數（PLT）、中性粒細胞數（NE）、淋巴細胞數（LY）、單核細胞數（MO）、嗜酸粒細胞數（EO）、嗜堿粒細胞數（BA）等14項指標。

1.2.3血液生化指標的檢測取3 mL 非抗凝血離心分離血清，A單位小型豬采用Olympus AU400全自動生化分析儀，B單位小型豬采用魅力2000全自動生化分析儀，檢測丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）、總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、肌酐（CRE）、尿素氮（BUN）、總膽紅素（TBIL）、甘油三酯（TG）、葡萄糖（GLU）、總膽固醇（TC）等11項生化指標。

1.2.4數據處理檢測結果以均數±標準差（x- ± s）表示，實驗數據采用SPSS18.0統計軟件進行統計處理。兩樣本均數比較采用獨立樣本t檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2　結果

2.1血液生理指標

表1結果表明，兩個群體巴馬小型豬的14項血液生理學指標中，HCT、MCV、MCHC、PLT、NE、LY、MO、EO、BA存在顯著性差異（P＜0.05）。A單位巴馬小型豬的14項血液生理學指標，雌雄間RBC、HGB、HCT、MCH、MCHC、RDW、 LY差異顯著（P＜0.05），B單位雌雄間HCT、MCV、PLT、LY差異顯著（P＜0.05）。

兩個群體雄性巴馬小型豬間比較，RBC、HCT、MCV、MCHC、PLT、RDW、NE、LY、MO、BA差異顯著（P＜0.05）；雌性小型豬間比較，RBC、HGB、MCV、MCHC、PLT、NE、LY、MO、EO差異顯著（P＜0.05）。

2.2血清生化指標

兩個群體血清生化指標中前者的A L T、AST、ALP、CRE和TC水平都低于后者，而TP、BUN、TG高于后者（P＜0.05）。A單位小型豬雌雄間ALB、ALP、TC有顯著性差異（P＜0.05），B單位雌雄間AST、ALT、ALB存在顯著差異（P＜0.05）。兩個群體雄性巴馬豬間比較，ALT、AST、ALP、TP、CRE、TG、TC差異顯著（P＜0.05），雌性間ALP、TP、ALB、TBIL、CRE差異顯著（P＜0.05）（表2）。

3　討論

巴馬小型豬產自廣西巴馬瑤族自治縣，是中國優良的地方小型豬品種。上海市華新特種養殖場和江蘇省吳江田宇生物科技有限公司都是從廣西巴馬縣原種場引進純種巴馬香豬，然后形成獨立的封閉群。

表 1　兩個群體普通級巴馬小型豬血液學指標

表 2　普通級巴馬小型豬血清生化指標測定結果

3.1巴馬小型豬血液生理生化指標

與馮媛媛等［1］檢測的中國實驗用小型豬9項血液生理生化指標相比，除B單位巴馬小型豬群體的MCHC均值較大，A、B兩個單位小型豬群體其余8項指標均接近于中國實驗用小型豬；在11項血清生化指標中，兩個群體小型豬分別有6項和8項與之接近，其他指標都較低。與陳克研等［2］報道的遼寧地區飼養的巴馬小型豬的血液生理生化對比，只有WBC數據差異大，其他數據都較接近；血清生化數據中ALT、TP、ALB、BUN較接近，其他參數值或高或低。胡延廷等［3］測定了在山東飼養的巴馬小型豬相應的參數，血液生理指標中RBC、HGB、HCT、PLT和MCHC與A、B兩個群體間的差異較大，其余數據相近；血清生化大多接近，但ALP、TP、TBIL、TG偏低。本文數據與連林生等［4］報道的版納小型豬各參數值差異大，但接近郭雄明等［5］研究的五指山小型豬的各指標數值。綜上所述，不同地區飼養的巴馬小型豬血液學生理生化指標都存在差異，總體數據偏差范圍不大；不同品種小型豬之間有些差異較大，有些數據接近。

影響血液生理生化指標檢測結果的因素很多，除人為因素、試劑因素和儀器等，個體生理因素非常重要［6，7］。例如，老齡動物和年輕動物相比，腎功能衰退，肌酐清除率變低，雄性肌酐水平一般高于雌性；通常TC的水平也是雌性比雄性稍高。Kawaguchi等［8］研究結果顯示，雌性小型豬TC偏高，0月齡的小型豬的ALP、TBIL、TC、TG和GLU高于年齡較大的動物，而ALT較低。本實驗兩群體雌性小型豬TC 與其報告結果一致，也都是雌性水平比雄性水平稍高；兩群體血常規雌雄間差異指標多；血清生化差異指標相對較少，兩群體差異指標比例都是3/11，與Kawaguchi［8］研究結果相同。

3.2飼養環境與飼料標準化對巴馬小型豬血液生理

生化指標的影響

眾所周知，動物繁育和實驗的飼養環境、飲食對其血液生理、生化指標有很大的影響，不同的飼養環境，特別是微生物學狀況的控制不盡相同，也可能是導致不同地區巴馬實驗小型豬血液生理生化指標的差異。陳克研等［2］從廣西巴馬瑤族自治縣引進巴馬小型豬，然后在遼寧地區飼養并檢測其血液生理生化指標，發現與原產地提供的部分指標存在顯著性差異，可能也是與生活環境和管理上的差異有關。本試驗中兩個養殖場所采用的飼料都屬于加工飼料，主要營養成份與比例相近（粗蛋白≥12%，粗脂肪≥2%，粗纖維≤8%），但在各自配方上存在差異，可能是造成有些指標差異的因素之一。

3.3建立SPF級實驗小型豬的意義

隨著多地實驗用小型豬地方標準的建立，為規范化、標準化生產合格實驗小型豬提供了指導依據，在動物種源、遺傳控制良好的前提下，本文作者認為，繁育生產SPF級巴馬實驗小型豬是減少群體差異的方法之一。目前，國際上常用的哥廷根小型豬為SPF級實驗用豬，已在世界發達地區被廣泛應用于生命科學和新藥研發領域，成為國際公認的標準實驗動物。由此可見，盡快培育SPF級巴馬實驗小型豬，將是提升我國實驗用豬標準化并使相應的研究成果得到國際學術界公認的一個有效途徑。

［1］馮媛媛，白雪源，賀津，等. 中國實驗用小型豬血液指標正常參考值分析［J］. 2013，40（6）:139-141.

［2］陳克研，師文，孫倩，等. 巴馬小型豬在遼寧地區的適應性觀察及血液生理生化指標檢測［J］. 2014，41（12）:182-185.

［3］胡建廷，屈卉錦，王韶艷，等. 普通級巴馬小型豬部分血液學指標的測定 ［J］. 動物學進展，2011，32（9）:66-68.

［4］連林生，王鶴云，徐家珍，等. 版納微型豬的生物學特性 ［J］.上海實驗動物科學，1993，13（4）:185-191.

［5］郭雄明，姚春濤，趙玉瓊，等. 兩個品系普通級和SPF級小型豬部分血液學指標的比較 ［J］. 中國比較醫學雜志， 2009，19（2）:40-42.

［6］劉麗娜. 淺析血常規檢查的影響因素［J］. 醫學信息，2014，27（4）:232.

［7］ 詹純列，肖育華，李建軍，等. 性別、年齡、微生物因素對Wistar大鼠血常規值的影響［J］. 中國比較醫學雜志，2004，14（3）:148-150.

［8］Kawaguchi H，Yamada T，Miura N，et al. Sex differences of serum lipid profile in novel microminipigs ［J］. In Vivo，2013，27（5）:617-621.

［9］Ellegaard L，Jorgensen K D，Klastrup S，et al. Hematologic and clinical chemical values in 3 and 6 months old Gottingen minipigs ［J］. Scand J Lab Anim Sci，1995，22:239-248.

［10］ 北京市地方標準.DB11/T 828.4-2011. 實驗用小型豬，第4部分: 病理學診斷規范［S］.

Q95-33

B

1674-5817（2015）03-0230-04

10.3969/j.issn.1674-5817.2015.03.011

2014-10-25

上海市實驗動物創新行動計劃項目 （13140900200）

楊李廠（1981-），男，碩士在讀，研究方向: 動物生理/生化。E-mail: lchyang@chempartner.cn

楊偉敏，高級實驗師，研究方向: 實驗動物科學與管理。E-mail: wmyang1@chempartner.cn