枇杷花總黃酮、總三萜的大孔樹脂制備工藝

陳 晶，李 琪，黃春萍，張曉峰，徐 艷，丁 然，張 宏，3，*

（1.四川師范大學化學與材料科學學院，四川 成都 610068；2.四川師范大學生命科學學院，四川 成都 610101；3.四川師范大學植物資源應用與開發研究所，四川 成都 610101）

枇杷花總黃酮、總三萜的大孔樹脂制備工藝

陳 晶1，李 琪2，黃春萍2，張曉峰2，徐 艷2，丁 然2，張 宏2，3，*

（1.四川師范大學化學與材料科學學院，四川 成都 610068；2.四川師范大學生命科學學院，四川 成都 610101；3.四川師范大學植物資源應用與開發研究所，四川 成都 610101）

以枇杷花中總黃酮、總三萜含量作為檢測指標，考察D101、AB-8、聚酰胺3 種大孔樹脂對枇杷花提取物中總黃酮、總三萜的分離性能，考察4 種不同干燥方法對枇杷花總黃酮、總三萜含量的影響。結果表明，大孔樹脂AB-8作為最佳分離樹脂，上樣量2.1 mL、吸附時間4 h、洗脫速率2 BV/h、洗脫體積3 BV時，枇杷花洗脫液中總黃酮含量為74.82%，收率為76.56%，總三萜含量為15.57%，收率為46.48%；減壓干燥作為最佳干燥方法，真空度0.07 MPa、溫度45 ℃、干燥時間10 h時，純化物中總黃酮含量為76.07%，收率為77.87%，總三萜含量為15.89%，收率為47.09%，含水量為4.07%。研究結果表明，此制備工藝可行，為枇杷花總黃酮、總三萜的開發利用提供理論依據。

枇杷花；總黃酮；總三萜；分離純化；干燥

枇杷花作為我國的民間用藥，已有多年歷史。據相關資料記載，枇杷花性溫和而不燥、驅寒化痰，有溫肺、止咳、祛痰之功效，對感冒、咳嗽等疾病有著顯著的療效［1-3］。據文獻［4-7］報道，枇杷花中的主要化學成分有黃酮類、三萜類、多酚類、有機酸以及揮發性成分等。由于其具有多種生物活性成分，可以用于治療多種疾病，包括鎮咳、抗炎、抗腫瘤、糖尿病等［8-12］。經研究［13-16］發現，枇杷花的止咳祛痰效果起顯著作用的是黃酮類和三萜類化合物。

近年來，采用大孔樹脂分離純化總黃酮、總三萜的研究［17-21］越來越多。丁然等［22］考察了D-101、D-160、AB-8、NKA-9和聚酰胺5 種吸附樹脂對枇杷花總黃酮的吸附與解吸附性能，篩選出性能較好的AB-8用于枇杷花提取物中總黃酮的分離純化；楊曉艷等［23］通過研究發現AB-8大孔樹脂適于分離純化莢果蕨總三萜，在最優條件下總三萜回收率為86.27%，純化倍數為2.88，但是少有同時分離純化枇杷花中總黃酮、總三萜的研究。本實驗篩選擇了3 種常見的吸附樹脂，并通過對洗脫溶劑、洗脫速率、吸附時間等因素的考察，確定了枇杷花總黃酮、總三萜的純化工藝；考察了4 種干燥方法對枇杷花總黃酮、總三萜含量的影響，確定了最優干燥條件。本實驗使用大孔樹脂對枇杷花中總黃酮和總三萜兩類化合物同時進行分離純化，并對枇杷花分離純化物進行干燥方法研究，為枇杷花的后期研究提供一定的理論依據。

1　材料與方法

1.1材料與試劑

枇杷花2010年10月采于四川攀枝花，經烘箱80 ℃烘干、粉碎后備用。

熊果酸標準品、蘆丁標準品 中國藥品生物制品檢定所；D-101大孔吸附樹脂（純凈級） 山東魯抗立科藥業有限公司；AB-8、聚酰胺樹脂（純凈級） 滄州寶恩吸附材料科技有限公司；95%乙醇（食品級）、其余試劑（均為分析純） 成都市科龍化工試劑廠。

1.2儀器與設備

UV-1700紫外-可見分光光度計 日本島津公司；BP211D十萬分之一天平 德國Sartoo-Rius公司；Ad Vantage冷凍干燥儀 美國Vir Tis公司；B-290噴霧干燥儀 瑞士Büchi公司。

1.3方法

1.3.1枇杷花提取物中總黃酮、總三萜含量的測定

1.3.1.1供試品溶液制備

精密稱取枇杷花300 g，按照固液比1∶10加入50%乙醇溶液，在提取溫度80 ℃、提取時間2 h的條件下，回流提取2次，抽濾，合并濾液，減壓濃縮至一定量后定容于50 mL容量瓶中，加蒸餾水至刻度，搖勻即得。

1.3.1.2枇杷花提取物中總黃酮、總三萜標準曲線的繪制

精密稱取蘆丁對照品10.88 mg、熊果酸對照品11.19 mg，分別用50%乙醇溶液定容于50 mL容量瓶中，配制成質量濃度為217.6 mg/L和223.8 mg/L的對照品溶液。參考文獻［24-25］繪制標準曲線，分別得蘆丁線性方程：Y=0.011 72A-0.004 65，R2=0.999 9，線性范圍為2.176～108.8 mg/L；熊果酸線性方程Y=0.011 37A-0.062 18，R2=0.999 9，線性范圍為22.3～223.8 mg/L。其中Y代表質量濃度，A代表吸光度。

1.3.1.3樣品測定

精密移取枇杷花提取液1.0 mL至50 mL容量瓶中，用50%乙醇溶液稀釋至刻度，取1 mL稀釋液按1.3.1.2節方法測定吸光度，根據線性方程計算總黃酮、總三萜的質量濃度。

1.3.1.4總黃酮和總三萜含量的計算

枇杷花提取液中總黃酮的含量（W1）為：

枇杷花提取液中總三萜的含量（W2）為：

枇杷花純化物中總黃酮的含量（W1′）為：

枇杷花純化物中總三萜的含量（W2′）為：

枇杷花純化物中總黃酮的收率（S1）為：

枇杷花純化物中總三萜的收率（S2）為：

式（1）～（6）中：Y1、Y2為枇杷花提取液的總黃酮、總三萜質量濃度/（mg/L），D1、D2為提取液體積/L；M為原材料質量/g；Y1′、Y2′為枇杷花純化物的總黃酮、總三萜質量濃度/（mg/L），D1′、D2′為純化液體積/L；M′為純化物質量/g；m1、m2為枇杷花純化物中總黃酮、總三萜的質量/g；m1′、m2′為用于分離純化的枇杷花提取物中總黃酮、總三萜的質量/g。

1.3.2吸附樹脂的預處理

表1　3 種大孔樹脂的物理性能Table 1 Physical properties of three macroporous resins

取3 種型號的吸附樹脂D-101、AB-8、聚酰胺（物理性能見表1），用95%乙醇溶液浸泡24 h后裝柱，用蒸餾水沖洗樹脂至流出液澄清且不再含有乙醇。依次以2 BV/h的速率用5%鹽酸溶液、5%氫氧化鈉溶液沖洗樹脂，直至流出液呈中性后用95%乙醇溶液浸泡備用。

1.3.3大孔吸附樹脂的篩選

將預處理好的D-101、AB-8、聚酰胺3 種吸附樹脂分別裝入柱體積為90 mL的玻璃層析柱。先用蒸餾水洗脫樹脂直至流出液澄清，再準確移取1.7 mL枇杷花提取物溶液上樣，依次用蒸餾水、95%乙醇溶液洗脫樣品。按1.3.1節方法測定各洗脫片段中總黃酮、總三萜的含量并計算收率。

1.3.4洗脫溶劑對總黃酮、總三萜含量及收率的影響

準確移取1.7 mL枇杷花提取物溶液上樣AB-8大孔樹脂層析柱后，控制洗脫速率為2 BV/h（2 BV為2 倍柱體積），依次用蒸餾水、50%乙醇溶液、95%乙醇溶液洗脫樣品，每個片段洗脫4 BV，分別收集3 個洗脫片段。各洗脫片段經減壓濃縮后放入60 ℃烘箱干燥。按1.3.1節方法測定各洗脫片段中總黃酮、總三萜的含量并計算收率。

1.3.5枇杷花提取物中總黃酮、總三萜純化工藝優化

1.3.5.1單因素試驗

1）上樣量對總黃酮、總三萜含量及收率的影響：準確移取枇杷花提取物溶液0.8、1.2、1.7、2.1、2.9、3.8 mL，分別上樣AB-8大孔樹脂層析柱，吸附4 h后，按1.3.4節方法進行洗脫，收集50%乙醇溶液洗脫片段，經減壓濃縮后放入60 ℃烘箱內干燥。按1.3.1節方法測定50%洗脫片段中總黃酮、總三萜的含量并計算收率。2）洗脫速率對總黃酮、總三萜含量及收率的影響：準確移取枇杷花提取物溶液2.1 mL上樣AB-8大孔樹脂層析柱，吸附4 h后，控制洗脫速率分別為0.5、2、4 BV/h，按1.3.4節方法進行洗脫，后續操作同上。3）吸附時間對總黃酮、總三萜含量及收率的影響：準確移取枇杷花提取物溶液2.1 mL上樣AB-8大孔樹脂層析柱，分別吸附樣品2、4、8、16、24 h后，按1.3.4節方法進行洗脫，后續操作同上。4）洗脫體積對總黃酮、總三萜含量及收率的影響：準確移取枇杷花提取物溶液2.1 mL上樣AB-8大孔樹脂層析柱，吸附4 h后，按1.3.4節方法進行洗脫，各片段分別洗脫2、3、4、5、6 BV，后續操作同上。

1.3.5.2正交試驗

根據單因素試驗結果，選取上樣量、洗脫速率、吸附時間、洗脫體積4 個因素，每個因素考察3 個水平，進行L9（34）正交試驗，以50%乙醇溶液洗脫片段中總黃酮收率作為評價標準。正交試驗因素水平見表2。

表2　正交試驗因素水平表Table 2 Factors and levels used in orthogonal array design

1.3.5.3最佳純化工藝條件的驗證實驗

按1.3.5.2節所確定的最佳工藝條件進行驗證實驗（n=3）。按1.3.1節方法測定50%乙醇溶液洗脫片段中總黃酮、總三萜的含量并計算收率。

1.3.6枇杷花純化物的干燥工藝

按1.3.5節所確定的純化條件對枇杷花提取物進行分離純化，收集50%乙醇溶液洗脫片段，減壓濃縮至浸膏。精確量取浸膏50 mL作為一個待測樣品。分別進行不同方式的干燥：常壓干燥，溫度設定為40、60、80 ℃；減壓干燥，真空度設定為0.07 MPa，溫度為45、55、65 ℃；冷凍干燥，升華溫度設為30、40、50 ℃；噴霧干燥，進風溫度為120、140、160、180 ℃，霧化器轉速28 000 r/min，流量為0.9 mL/min。收集干粉，稱質量。記錄干燥至固體狀態所需時間，按1.3.1節方法測定樣品中總黃酮、總三萜的含量并計算收率。

2　結果與分析

2.1提取溶劑體積分數對枇杷花總黃酮、總三萜含量的影響

總黃酮、總三萜的極性有一定的差異，為了同時提取枇杷花中的總黃酮、總三萜，本實驗考察了兩種不同的提取方法，即50%乙醇溶液提取2 次和50%、95%乙醇溶液分別提取1 次。由表3可知，50%乙醇提取物中枇杷花總黃酮的含量明顯較高，而總三萜的含量則略低于混合95%、50%乙醇溶液提取物。因此本實驗選取50%乙醇溶液作為樣品的提取溶劑。

表3　提取溶劑體積分數對枇杷花提取物中總黃酮、總三萜含量的影響Table 3 Effect of extraction solvents on the contents of flfl avonoids and triterpene

表3　提取溶劑體積分數對枇杷花提取物中總黃酮、總三萜含量的影響Table 3 Effect of extraction solvents on the contents of flfl avonoids and triterpene

提取溶劑50%乙醇溶液95%乙醇溶液和50%乙醇溶液總黃酮含量20.36±0.33516.76±0.344總三萜含量6.867±0.3017.403±0.340

2.23 種吸附樹脂對枇杷花總黃酮、總三萜的純化效果

表4　3 種樹脂對總黃酮、總三萜的分離純化效果Table 4 Effect of three resins on separation and purififi cation of flfl avonoids and triterpenoi

表4　3 種樹脂對總黃酮、總三萜的分離純化效果Table 4 Effect of three resins on separation and purififi cation of flfl avonoids and triterpenoi

D-101AB-8聚酰胺總黃酮含量水洗脫片段3.682±1.3114.113±1.1231.020±1.421 95%乙醇洗脫片段50.67±0.21555.01±0.21128.97±0.652總黃酮收率各洗脫片段收率之和56.70±0.41758.21±0.52332.89±0.313總三萜含量水洗脫片段1.265±2.2371.312±1.3340.724±2.533 95%乙醇洗脫片段18.16±0.14518.37±0.1128.712±0.421總三萜收率各洗脫片段收率之和44.69±0.20446.43±0.19313.58±0.501

由表4可知，3 種樹脂分離純化枇杷花總黃酮、總三萜的能力大小順序為AB-8＞D-101＞聚酰胺。聚酰胺樹脂由于極性較大，吸附性能強而解吸性能較弱，樣品很難從樹脂上洗脫下來。D-101大孔樹脂在吸附及解吸性能上略低于AB-8大孔樹脂，所以選擇AB-8大孔樹脂作為吸附材料。

2.3洗脫方法對枇杷花總黃酮、總三萜含量及收率的影響

5 各洗脫片段的總黃酮、總三萜含量及收率（x =3）Table 5 Contents and yields of flfl avonoids and triterpenes in the eluted fractions （x ± ， = 3）

5 各洗脫片段的總黃酮、總三萜含量及收率（x =3）Table 5 Contents and yields of flfl avonoids and triterpenes in the eluted fractions （x ± ， = 3）

%方法1方法2水洗脫片段95%乙醇溶液95%乙醇溶液洗脫片段總黃酮含量4.295±1.11053.51±1.0113.872±1.01369.11±0.431 7.072±1.231總黃酮收率57.43±0.23175.21±0.211總三萜含量1.197±1.002 18.84±1.6711.059±1.241 15.14±0.321 4.213±1.523總三萜收率46.22±1.02145.27±1.101洗脫片段水洗脫片段50%乙醇溶液洗脫片段

由表5可知，50%乙醇溶液洗脫片段的總黃酮含量及收率遠高于方法1中95%乙醇洗脫片段，總三萜含量及收率則略低。考慮到總黃酮在枇杷花中的含量高于總三萜，50%乙醇溶液洗脫片段既能得到較高的總黃酮含量及收率，也能滿足總三萜含量及收率的要求。因此選用洗脫方法2對枇杷花提取物進行純化，洗脫片段分為水洗脫片段、50%乙醇溶液洗脫片段、95%乙醇洗脫片段。從表5可以看出，方法2中水洗脫片段、95%乙醇洗脫片段得到的總黃酮總三萜含量均較低，對收率的影響很小，因此用50%乙醇溶液洗脫片段中總黃酮、總三萜的含量及收率作為后續實驗的評價標準。

2.4AB-8大孔樹脂分離純化枇杷花總黃酮、總三萜試驗優化

2.4.1單因素試驗結果

2.4.1.1上樣量的選擇

圖1　上樣量對總黃酮、總三萜含量和收率的影響Fig.1 Effect of sample volume on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

由圖1可以看出，上樣量對枇杷花提取物中總黃酮、總三萜含量及收率有顯著影響。隨著上樣量的增加，樣品中總黃酮、總三萜的含量和收率也逐漸增加。當上樣量為2.1 mL時，樣品中總黃酮、總三萜的含量及收率都達到最大值。當上樣量繼續增加時，樣品的純度及收率都大大降低，開始出現泄漏趨勢。2.1 mL是樹脂的最大承載量，因此初步選擇2.1 mL為最佳上樣量。

2.4.1.2洗脫速率的選擇

圖2　洗脫速率對總黃酮、總三萜含量及收率的影響Fig.2 Effect of elution fl ow rate on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

如圖2所示，當洗脫速率為0.5 BV/h時，總黃酮、總三萜含量及收率均略高于洗脫速率2 BV/h，但是2 BV/h的洗脫速率可以減少洗脫時間，提高洗脫效率。因此選擇洗脫速率為2 BV/h。

2.4.1.3吸附時間的選擇

圖3　吸附時間對總黃酮、總三萜含量及收率的影響Fig.3 Effect of adsorption time on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

由圖3可以看出，總黃酮、總三萜含量及收率先隨著吸附時間的延長而增加，當吸附時間達到4 h時，樹脂達到飽和狀態，含量及收率達到最大值。隨著吸附時間的延長，總黃酮、總三萜含量及收率幾乎不再變化。因此選擇吸附時間為4 h。

2.4.1.4洗脫體積的選擇

圖4　洗脫體積對總黃酮、總三萜含量及收率的影響Fig.4 Effect of elution volume on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

由圖4可以看出，總黃酮及總三萜的含量及收率隨著洗脫體積的增加而增加。當洗脫體積達到3、4 BV時，總黃酮、總三萜含量及收率均較高。隨著洗脫體積的增加，總黃酮、總三萜含量及收率呈下降趨勢，這是因為洗脫下來的雜質的含量增加導致的。當洗脫體積為3 BV和4 BV時，總黃酮、總三萜含量及收率幾乎相同，考慮到減少洗脫劑用量，減少成本，故選擇洗脫體積為3 BV。根據單因素試驗結果可知：影響AB-8大孔樹脂分離純化性能的因素有上樣量、洗脫速率、吸附時間和洗脫體積；且根據純化后總黃酮和總三萜含量及收率的變化，初步認為各因素對總黃酮、總三萜含量及收率的影響為：上樣量＞洗脫速率＞洗脫體積＞吸附時間。

2.4.2正交試驗結果

表6　正交試驗設計與結果Table 6 Results of orthogonal array design

由表6可知，各因素對枇杷花提取物總黃酮收率影響的大小為：上樣量＞洗脫速率＞洗脫體積＞吸附時間，其中上樣量對總黃酮收率的影響最大，吸附時間對總黃酮收率的影響最小。在試驗范圍內，最佳優選工藝組合是A2B1C2D2，即上樣量2.1 mL、洗脫速率0.5 BV/h、吸附時間4 h、洗脫體積3 BV。根據正交試驗數據分析，洗脫速率為0.5 BV/h和2 BV/h時，總黃酮收率相近，而0.5 BV/h的洗脫速率較慢，影響工作效率，不適宜工業化生產。故最終選擇工藝組合是A2B2C2D2。正交試驗方差分析結果見表7。

表7　正交試驗方差分析結果Table 7 Analysis of variance for the orthogonal array design

2.4.3樹脂最佳工藝條件驗證實驗

按1.3.5.2節所確定的最佳工藝條件進行驗證實驗（n=3），測得枇杷花提取物的50%乙醇溶液洗脫片段中總黃酮的含量為74.82%，收率為76.56%，總三萜的含量為15.57%，收率為46.48%，其總黃酮和總三萜的含量和收率均較高。結果表明，正交試驗所得工藝條件最優。

2.5枇杷花純化物干燥工藝

2.5.1常壓干燥溫度的選擇

表8　常壓干燥溫度對總黃酮、總三萜含量及收率的影響Table 8 Effect of atmospheric drying temperature on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

由表8可知，當烘箱溫度為40 ℃和60 ℃時，總黃酮、總三萜含量和收率相近，當溫度為80℃時，總黃酮、總三萜的含量明顯降低，這是因為溫度過高，樣品的有效成分遭到部分破壞。40 ℃時的含量和收率略低于60 ℃，干燥耗時較長。從干燥后樣品的含水量來看，當干燥溫度為60、80 ℃時，含水量相近且比溫度為40 ℃時較低。綜合有效物質的含量及收率、干燥耗時及含水量，選擇60 ℃作為常壓干燥的最佳溫度。

2.5.2減壓干燥條件的選擇

表9　減壓干燥溫度總黃酮、總三萜含量及收率的影響Table 9 Effect of vacuum drying temperature on the contents and yields of fl avonoids and triterpenes

由表9可以看出，在不同干燥溫度條件下，樣品干燥后含水量相當。當干燥溫度為45 ℃時，枇杷花總黃酮、總三萜含量、收率均較高。因此選擇干燥溫度為45 ℃。

2.5.3冷凍干燥條件的選擇

表10　真空冷凍干燥升華溫度總黃酮、總三萜含量及收率的影響Table 10 Effect of sublimation temperature of freeze-drying on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

由表10可以看出，當升華溫度為30、40 ℃時，枇杷花總黃酮和總三萜含量、收率及干燥后樣品的含水量均相當，但用40 ℃進行干燥時，可以縮短干燥時間；當溫度升高至50 ℃時，對縮短凍干時間沒有實質性影響，反而降低了總黃酮和總三萜的含量和收率。因此實驗確定升華溫度為40 ℃。

2.5.4噴霧干燥條件的選擇噴霧干燥耗時均約為1 h，由表11可以看出，干燥后樣品的含水量隨進風溫度的增加而降低，但下降趨勢隨進風溫度升高而減弱。當進風溫度低于140 ℃時，有部分樣品在噴霧塔內壁附著，所得樣品含水量比較大。當進風溫度超過180 ℃時，樣品含水量雖然較小，但卻造成枇杷花止咳有效成分的損失，因此進風溫度不宜太高。確定進風溫度為160 ℃，出風溫度為80 ℃時，產品質量較高。

表11　噴霧干燥進風溫度對總黃酮、總三萜含量及收率的影響Table 11 Effect of inlet temperature of spray drying on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

2.5.54 種干燥方法的綜合比較

表12　干燥方法對總黃酮、總三萜含量及收率的影響Table 12 Effect of different drying methods on the contents of fl avonoids and triterpenes and their yields

為比較4 種干燥方法的優劣，各取其最佳條件來進行比較，結果見表12。根據樣品中總黃酮、總三萜含量、收率以及樣品含水量來比較4 種干燥方法的干燥效果，冷凍干燥的效果最好，減壓干燥次之。噴霧干燥的效果較常壓干燥要好。冷凍干燥時由于低溫條件下各種化學反應的速率低，樣品有效成分也不易遭到破壞。就干燥耗時而言，噴霧干燥耗時最短。減壓干燥使水的沸點降低，傳熱溫差增大，傳熱效率提高，達到相同干燥程度時，減壓干燥比常壓干燥所需時間少。冷凍干燥過程較其他幾種干燥方法復雜，所需干燥時間最長。經冷凍干燥后樣品中有效成分的品質最好，但該法需要的干燥條件較為苛刻，且設備昂貴，周期長，成本高。考慮到后續實驗，選擇減壓干燥作為干燥枇杷花總黃酮、總三萜的方法。

3　結 論

本實驗對枇杷花中有效成分的制備工藝進行了研究，實驗結果表明，AB-8大孔樹脂比較適合于枇杷花中有效成分的分離純化，純化工藝參數為上樣量2.1 mL、洗脫速率2 BV/h、吸附時間4 h、洗脫體積3 BV，在此條件下得到的總黃酮含量為74.82%，收率為76.56%，總三萜含量為15.57%，收率為46.48%；減壓干燥適用于干燥枇杷花中總黃酮、總三萜，干燥條件為真空度0.07 MPa、溫度45 ℃、干燥耗時10 h，所得樣品總黃酮含量為76.07%，收率為77.87%，總三萜含量為15.89%，收率為47.09%，含水量為4.07%。

［1］ 國家中醫藥管理局《中華本草》編委會. 中華本草［M］. 4版. 上海：上海科學技術出版社， 1999： 145.

［2］ 江紀武， 靳朝東. 藥用植物辭典［M］. 天津： 天津科學技術出版社，2005： 31.

［3］ 李時珍. 本草綱目［M］. 北京： 宗教文化出版社， 2003： 332.

［4］ 孫蘇邈， 孟憲麗， 李春雨， 等. 枇杷花的研究進展及其藥效評價思路的探討［J］. 現代藥物與臨床， 2011， 26（3）： 199-201.

［5］ 李琪. 枇杷花化學成分及生物活性的研究［D］. 成都： 四川師范大學， 2009.

［6］ 閆永芳， 孫鈞， 孟天真， 等. 枇杷花研究及開發進展［J］. 食品工業科技， 2011， 12（32）： 545-546.

［7］ 蔣際謀， 胡文舜， 姜帆， 等. 貴妃枇杷花提取液揮發性成分GC-MS分析［J］. 福建農業學報， 2013， 28（6）： 545-551.

［8］ 張娜， 吳紹康， 沈先榮， 等. 枇杷葉水提物祛痰止咳及抗炎作用研究［J］.中華中醫藥學刊， 2014， 32（9）： 2175-2177.

［9］ 陳曉芳， 張倩， 吳文倩， 等. 枇杷花醇提物止咳化痰作用實驗研究［J］.中成藥， 2013， 35（1）： 167-169.

［10］ AQUILA S， GINER R M， RECIO M C， et al. Anti-in-flammatory activity of flavonoids from Cayaponia tayuya roots［J］. Journal of Ethnopharmacology， 2009， 121： 333-337.

［11］ MOTABAR O， SHI Z D， GOLDIN E， et al. A new resorufin-based α-glucosidase assay for high-throughput screening［J］. Analytical Biochemistry， 2009， 390： 79-84.

［12］ MUSLIN E H， KANIKULA A M， CLARK S E， et al. Overexpression，purification and characterization of a barley α-glucosidase secreted by Pichia pastoris［J］. Protein Expression and Purifi cation， 2000， 18： 20-26.

［13］ 王靜波， 楊必坤， 張宏， 等. 枇杷花提取物止咳藥效研究［J］. 中草藥，2009， 40（7）： 1106-1109.

［14］ 鞠建華， 周亮， 林耕， 等. 枇杷葉中三萜酸類成分及其抗炎、鎮咳活性研究［J］. 中國藥學雜志， 2003， 38（10）： 752-757.

［15］ 王靜波. 枇杷花止咳抗炎藥效學研究［D］. 成都： 四川師范大學， 2009.

［16］ 麥合蘇木·艾克木， 努爾江·肉孜， 阿不都熱依木·玉蘇甫. 維藥神香草總黃酮抗炎、止咳、祛痰及平喘作用研究［J］. 新疆醫科大學學報， 2014， 37（4）： 403-406.

［17］ 吳紹康， 沈先榮， 梅威威， 等. 大孔吸附樹脂分離純化枇杷花總黃酮工藝研究［J］. 中華中醫藥學刊， 2014， 32（9）： 2185-2188.

［18］ 董媛媛， 鄧翀， 柴思佳. 大孔樹脂吸附南五味子總三萜的動力學和熱力學分析［J］. 中國實驗方劑學雜志， 2014， 20（17）： 5-9.

［19］ 駱黨委， 葉靜， 黃雅燕， 等. AB-8大孔樹脂精制蘆柑皮總黃酮及黃酮類化合物的分離［J］. 食品科學， 2014， 35（6）： 30-35. doi： 10.7506/ spkx1002-6630-201406006.

［20］ 孫京沙， 張朝輝. 大葉藻總黃酮的大孔樹脂純化工藝［J］. 食品科學，2014， 35（14）： 5-10. doi： 10.7506/spkx1002-6630-201414002.

［21］ 尹忠平， 上官新晨， 張月紅， 等. 大孔樹脂吸附純化青錢柳葉三萜化合物［J］. 食品科學， 2011， 32（6）： 61-65.

［22］ 丁然， 黎霞， 李琪， 等. 吸附樹脂分離純化枇杷花總黃酮的研究［J］.離子交換與吸附， 2014， 30（6）： 560-568.

［23］ 楊曉艷， 馬驥， 彭飛， 等. 大孔樹脂法分離純化莢果蕨總三萜［J］. 食品工業科技， 2015， 36（2）： 238-142.

［24］ 李琪， 楊必坤， 張曉喻， 等. 枇杷花主要有效成分的含量［J］. 廣西植物， 2009， 29（5）： 698-702.

［25］ 郭輝， 王玉珍， 崔福順. 響應面法優化元蘑總三萜提取及大孔樹脂純化工藝研究［J］. 食品工業， 2014， 35（5）： 137-140.

Preparation of Flavonoids and Triterpenoids from Flowers of Eriobotrya japonica （Thunb.） Lindl by Macroporous Resins

CHEN Jing1， LI Qi2， HUANG Chunping2， ZHANG Xiaofeng2， XU Yan2， DING Ran2， ZHANG Hong2，3，*
（1. College of Chemistry and Materials Science， Sichuan Normal University， Chengdu 610068， China；2. College of Life Sciences， Sichuan Normal University， Chengdu 610101， China；
3. Institute of Application and Development of Plant Resources， Sichuan Normal University， Chengdu 610101， China）

The total fl avonoids and triterpenoids of loquat fl ower extracts were purifi ed with D101， AB-8 and polyamide resins and dried by atmospheric drying， vacuum drying， freeze drying and spray drying， respectively. The effectiveness of these methods was tested based on the content and yield of total fl avonoids and triterpenoids. The results showed that AB-8 was the best macroporous resin for the separation and purifi cation of fl avonoids and triterpenoids， and vacuum drying was the best drying method. The optimal conditions for purifi cation were determined as follows： sample volume， 2.1 mL；elution fl ow rate， 2 BV/h； adsorption time， 4 h； and eluent volume， 3 BV. Under these conditions， the content and yield of fl avonoids were 74.82% and 76.56% and the content and yield of triterpenoids were 15.57% and 46.48%， respectively. The optimal conditions for vacuum drying were obtained by 10 h drying at 45 ℃ with a vacuum degree of 0.07 MPa. Under the optimized drying conditions， fl avonoids content was 76.07% with a yield of 77.87%， triterpenoids content was 15.89% with a yield of 47.09% and moisture content was 4.07%.

loquat fl owers； fl avonoids； triterpenoids； separation and purifi cation； drying

R284.2

A

1002-6630（2015）18-0058-06

10.7506/spkx1002-6630-201518010

2015-01-29

四川省科技廳第三批應用技術研究與開發項目（2009SZ005）

陳晶（1990—），女，碩士研究生，研究方向為食品分析檢測。E-mail：jingchen2015@sina.cn

張宏（1965—），女，教授，博士，研究方向為天然產物開發與應用。E-mail：zhanghong651@aliyun.com