再力花葉枯病病原菌鑒定

歐克芳

摘要：鑒定了在湖北省武漢市解放公園、月湖公園濕地植物種植區的再力花（Thalia dealbata）葉片上發現的1種病原未知的再力花病害的病原菌種類。從葉片上分離得到病菌，經柯赫氏法則驗證為致病病原菌，據病原菌培養性狀和形態特征將該病原菌鑒定為新月彎孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed]。彎孢菌危害再力花，引起葉枯病。

關鍵詞：再力花；葉枯病；病原鑒定；新月彎孢菌

中圖分類號： S432.4+4文獻標志碼： A文章編號：1002-1302（2015）09-0164-02

再力花（Thalia dealbata）別稱水竹芋，原產于北美地區，為竹芋科再力花屬多年生草本植物，1992年再力花作為觀賞植物自日本引入中國[1]。再力花對氮、磷的去除效果好，易成活、繁殖快，具有一定的耐寒性，因此被廣泛應用于人工濕地[2]。2008年7月，筆者在湖北省武漢市解放公園、月湖公園濕地植物種植區的再力花葉片上發現了1種病原未知的再力花病害，發病率達30%。本研究鑒定了該病害的病原菌種類，旨在為做好該病害的防治工作提供依據。

1材料與方法

1.1材料

病原菌采自武漢市解放公園、月湖公園再力花發病典型的病葉。

1.2癥狀描述

按常規方法對病株出現的癥狀進行描述。

1.3病原菌的分離和菌種純化

采用常規組織分離法進行分離。切取發病典型的再力花葉片病健交界處5 mm×5 mm小塊，用70%乙醇消毒5 s，01%HgCl2表面消毒30 s，滅菌水沖洗3～4次，無菌操作接種到馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基（PDA）上，28 ℃培養，培養5 d待產孢后進行單孢分離純化，再轉入試管斜面保存。

1.4病原菌致病性的測定及形態觀察

將純化、產孢的病原菌孢子用無菌水配制成106個/mL的孢子懸浮液，選取健康再力花植株葉片，用無菌水將再力花葉片表面蠟粉洗凈，噴灑孢子懸浮液于葉片上，以無菌水作為對照；保濕，觀察并記錄葉片發病情況。將病原菌接種于PDA培養基上，于28 ℃恒溫培養箱培養3 d，觀察菌落顏色、形狀、大小，產孢后觀察分生孢子顏色、形態及分生孢子梗形態。

2結果與分析

2.1癥狀描述

該病主要危害葉片，葉尖、葉緣發生多（圖1），發病初期葉出現褪綠斑，病斑逐漸擴展成不規則形，中央灰白色，周緣有褪綠暈圈。高溫高濕時病斑擴展快，葉尖葉緣褪綠成青枯狀，葉片卷曲，嚴重時病斑聯合形成大面積組織壞死，導致葉片枯死。潮濕條件下，病斑正面、反面均可產生分生孢子梗及分生孢子，呈灰黑色霉狀物（圖2）。田間發病始于4月中下旬，7—9月發病嚴重。

2.2病原菌培養性狀及形態

PDA培養基上菌絲初期為白色，逐漸轉為墨綠色至黑色，菌落圓形、平展，周緣整齊（圖3）。分生孢子梗褐色，有隔，直或彎曲，頂部呈屈膝狀合軸式延伸。分生孢子褐色，大多3個隔分成4個細胞；從基部數第3個細胞向一側膨大，深褐色，第2個細胞為淡褐色，頂部、基部細胞色淺。分生孢子光滑，彎月形、廣梭形、棍棒形或近橢圓形，少數丫形（三角形）。分生孢子大小為（22.5～32.5）μm×（7.5～15.0）μm（圖4）。根據病原菌分生孢子梗、分生孢子及菌絲形態特征，認定該菌為半知菌亞門絲孢綱絲孢目暗梗孢科彎孢霉屬新月彎孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed][3-6]。

2.3致病性測定

接種7 d，用孢子懸浮液接種的葉片均發病，病斑初期為褪綠小點，隨著病害的發展，病斑中央灰白色有褪綠暈圈，從病斑上重新分離到相同的病原菌，遵循柯赫式法則。對照葉片均不發病。

3結論與討論

再力花是觀賞價值極高的優良的濕地挺水植物。近年來，再力花葉枯病在武漢市發生日益嚴重，葉枯病造成再力花葉片干枯卷曲，影響觀賞價值。本研究結果表明，新月彎孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed]是武漢市再力花葉枯病的致病菌。朱明旗等對新月彎孢菌的生物學特性進行了初步研究，該菌生長、孢子萌發最適溫度為25～35 ℃，相對濕度在98%以上時，孢子萌發率達78%以上[7]。武漢市7—9月為高溫高濕天氣，適合菌絲生長、孢子萌發。新月彎孢菌在PDA培養基、瓊膠燕麥培養基上，采用28 ℃恒溫培養，12 h光照和12 h黑暗交替誘導產孢的方法產孢量均很大，說明光暗交替有利于孢子形成，符合朱明旗等的結論[7]。戴法超等研究結果表明，干燥是彎孢病菌存活、越冬的首要條件，在潮濕環境下，菌絲不復存在[8]。再力花存在于濕地環境中，其病菌越冬、發生規律、病害循環及防治措施有待進一步研究。

參考文獻：

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