豬鏈球菌病的細菌分離與防治

張立憲 王克領(lǐng) 郎利敏 游一 張青嫻

中圖分類號：S854.4+3 文獻標識碼：C 文章編號：1001-0769（2015）11-0056-02

豬鏈球菌（Streptococcu suis，SS）也是嚴重影響?zhàn)B豬業(yè)經(jīng)濟效益的一種傳染性疾病，可引發(fā)豬的腦膜炎、關(guān)節(jié)炎、敗血癥、淋巴結(jié)膿腫等多種臨床癥狀。哺乳仔豬和剛斷乳仔豬主要以敗血癥型、腦膜炎型為主，發(fā)病率和死亡率均較高；肥育豬發(fā)病多以關(guān)節(jié)炎或淋巴結(jié)膿腫為特征，其死亡率較低，但會影響生長發(fā)育。鏈球菌病易與其他高熱性疾病混合感染，單純的豬鏈球菌病是很少見的，這也是近年來豬群發(fā)生無名高熱后難以控制的原因之一。隨著養(yǎng)豬業(yè)集約化的發(fā)展，鏈球菌病的致病性及危害日益引起人們的重視。

2015年6月，河南新鄉(xiāng)市某中等規(guī)模養(yǎng)豬場突然發(fā)病，各階段豬均有發(fā)病和死亡，主要表現(xiàn)為高熱、拒食、眼球發(fā)紅，體表呈現(xiàn)散在或彌散性出血斑點（圖1），部分病豬精神不振、畏寒聚堆，糞便干結(jié)，個別病豬出現(xiàn)關(guān)節(jié)腫大、跛行，也有的病豬出現(xiàn)頸部強直、偏頭轉(zhuǎn)圈、四肢呈劃水樣等神經(jīng)癥狀。送檢病豬5頭，河南省農(nóng)業(yè)科學院獸醫(yī)診斷室對所送病料進行了實驗室診斷并提出了有效的防控方案，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病料采集

發(fā)病豬場送檢病豬5頭。

1.1.2 主要試劑和培養(yǎng)基

兔鮮血瓊脂平板培養(yǎng)基、20 %血清營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基等均為采用常規(guī)方法制備，微量生化發(fā)酵鑒定管、藥敏紙片均購買于杭州市天和微生物試劑有限公司。其他試劑均為國產(chǎn)分析純。

1.2 方法

1.2.1 病豬剖檢和病料采集

觀察發(fā)病豬臨床情況并解剖，察看其病理變化。眼觀病變基本一致：全身淋巴結(jié)腫大外觀紅紫，有的切面多汁，部分有化膿灶；脾腫脹淤血柔軟易碎裂，暗紅色，邊緣有黑色出血性灶；肝臟腫大色淡呈淺黃色，心臟有明顯的出血點和出血斑（圖2）；肺淤血腫大，出血斑和大面積的肺炎病灶；全身漿膜、黏膜有明顯的出血斑點；部分關(guān)節(jié)腔內(nèi)有化膿性積液（圖3）。無菌取心血、肝臟、關(guān)節(jié)液等，并冷藏備用。

1.2.2 細菌分離培養(yǎng)

取病豬關(guān)節(jié)液、心血、肝臟分別接種于兔鮮血瓊脂平板培養(yǎng)基和 20 %血清營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基，置于37 ℃煙缸培養(yǎng)24 h～48 h觀察結(jié)果，再從中挑取典型的單個菌落做純培養(yǎng)。按常規(guī)方法制備組織抹片，進行革蘭氏染色，自然干燥后用油鏡觀察結(jié)果。

1.2.3 生化特性

挑取純培養(yǎng)的單個菌落于加兔鮮血的普通肉湯中，置于37 ℃條件下，220 r/min震蕩培養(yǎng)24 h后，分別接種于葡萄糖、麥芽糖、乳糖、山梨醇、水楊苷、阿拉伯糖等微量發(fā)酵管中，置于37 ℃恒溫培養(yǎng)箱 24 h～48 h后觀察結(jié)果。

1.2.4 藥敏試驗

將分離鑒定好的菌株均勻涂布于兔鮮血瓊脂平板培養(yǎng)基，并將選取的藥敏片貼在其上，置于37 ℃含 5 % CO2恒溫培養(yǎng)箱，培養(yǎng)24 h后測量抑菌環(huán)直徑并判定結(jié)果。

2 結(jié)果

2.1 病豬剖檢

跟據(jù)臨床癥狀和病理變化初步診斷為鏈球菌感染。

2.2 細菌的分離

兔鮮血瓊脂培養(yǎng)基上生長出濕潤突起、表面光滑、稍混濁呈露珠狀、溶血帶環(huán)繞邊緣整齊小而圓的菌落；20 %血清營養(yǎng)瓊脂平板培養(yǎng)基也生長出類似菌落。挑取兩種培養(yǎng)基菌落，分別涂片革蘭氏染色后鏡檢，均見單個或成對、短鏈狀排列的革蘭氏陽性球菌。

2.3 生化試驗

分離菌株純培養(yǎng)液的生化試驗結(jié)果表明，該菌能發(fā)酵乳糖、葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、水楊苷、山梨醇，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不發(fā)酵菊糖、棉子糖、阿拉伯糖和脲酸鈉，明膠液化試驗陰性，符合鏈球菌生化特征。

2.4 藥敏試驗

測量培養(yǎng)基上藥敏片抑菌環(huán)直徑，結(jié)果表明：洛美沙星、丁胺卡那、頭孢唑啉為最敏感；對慶大霉素、環(huán)丙沙星、新霉素中度敏感；對青霉素G、氯霉素、克林霉素、鏈霉素和磺胺6-甲氧嘧啶不敏感。

根據(jù)臨床癥狀、病理解剖、實驗室檢查實驗，綜合診斷該病為鏈球菌病感染。

3 防制措施

（1） 將可疑豬和病豬全部換舍隔離飼養(yǎng)，并及時清除病死尸與被污染物，將其徹底焚燒或深埋。對污染的圈舍和四周環(huán)境進行嚴格消毒，患病豬群則帶豬消毒，一天一次，連消 5 d～7 d。

（2） 大群拌料加藥：20 %阿莫西林500 g +20 %恩諾沙星500 g +扶正康1 000 g +有機酸3 000 g +全價飼料1 t，連喂7 d～10 d，同時飲水中添加優(yōu)質(zhì)多維、葡萄糖等，連飲10 d～15 d。發(fā)病豬群則用上述藥物全部飲水加藥，連飲2 d～ 3 d，水中加些如麩皮、谷糠等粗料，并逐漸增加稠度，同時提供青綠多汁飼料，待病情緩解后再改為拌料加藥再用5 d～7 d。部分可疑豬和發(fā)病豬肌注鏈毒四型（主要成分為洛美沙星）一天一次，一邊一針，按說明書用量連用3 d～5 d。

經(jīng)過上述措施處理15 d后，除部分病重豬死亡外，其余病豬逐漸痊愈，觀察30 d后未見復發(fā)病例。

4 小結(jié)與討論

豬鏈球菌病近幾年來發(fā)病率較高，對養(yǎng)豬業(yè)影響較為嚴重，一般多發(fā)生在4～9月干燥、炎熱的季節(jié)，而飼養(yǎng)環(huán)境差，飼料營養(yǎng)失衡，應激等因素都可誘發(fā)本病。對發(fā)病豬盡早確診治療，是減少再發(fā)病、傳染和避免經(jīng)濟損失的首要措施。由于鏈球菌耐藥率較高，對于本病治療，最好先進行藥敏試驗，有目的、針對性地用藥。

豬鏈球菌病可以說仍是目前對豬場有較大威脅的疫病之一，對于該病預防仍是控制其發(fā)病的關(guān)鍵：首先是根據(jù)各個豬場不同的情況選取不同但質(zhì)量可靠的疫苗，有專人嚴格按照免疫程序進行操作；其次要加強對該病的檢疫和防控，實施嚴格的生物安全措施：對購入種豬嚴格檢疫，隔離觀察；定期消毒，不同消毒藥物要交替使用等；另外給豬只提供一個生長舒適的環(huán)境，供給營養(yǎng)全面、均衡的優(yōu)質(zhì)飼料，減少不良的應激因素等，只有這樣采取綜合的管理措施，才能達到對該病的理想防治效果。發(fā)病豬場治療時一定要注意以下事項：（1）少用精料，多飼喂青綠多汁料如西瓜皮、青菜葉等；（2）飲水中可添加優(yōu)質(zhì)電解多維和葡萄糖；（3）注射時配合維生素C、維生素B1效果會更好一些。