鳳仙花中槲皮素和山奈酚的薄層色譜鑒別

侯文欣 魏紅立 方新平 徐利亞 孟憲磊

摘要 [目的]建立鳳仙花藥材中槲皮素、山奈酚的提取方法，對鳳仙花藥材中槲皮素、山奈酚進行薄層鑒別。[方法]采用羧甲基纖維素鈉硅膠G 板分離鳳仙花藥材中槲皮素、山奈酚成分。[結果]供試品色譜在與對照品色譜相應位置上顯相同顏色的斑點，可用于鑒別鳳仙花中的槲皮素和山奈酚。[結論]薄層色譜方法簡便、專屬性強、重現性好，可用于鳳仙花藥材的鑒別。

關鍵詞 鳳仙花；槲皮素；山奈酚；薄層色譜；鑒別

中圖分類號 S567 文獻標識碼

A 文章編號 0517-6611（2015）34-146-02

鳳仙花為鳳仙花科植物鳳仙（Impatiens balsamina L.）的干燥花[1]，尚未被《中國藥典》收載，鳳仙花具有祛風除濕、活血定痛功效，含有香豆素類、黃酮類等多種化學成分，其中槲皮素和山奈酚是其主要的黃酮化合物[2]。槲皮素有抗炎、抗氧化、抗癌和抗突變等多種功能[3]，山奈酚具有止咳祛痰和消炎等作用[4-5]，具有很高藥用價值。該試驗考察了不同溶劑、不同提取方法提取槲皮素及山奈酚，并嘗試不同展開劑和薄層板比較，最終確定了用于鳳仙花中槲皮素及山奈酚的簡捷、快速、分離效果好的薄層色譜鑒別方案，為鳳仙花的質量控制提供了可靠依據。

1 材料與方法

1.1 材料 鳳仙花（采于河北邢臺將軍墓）；槲皮素對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號100081-200907）；山奈酚對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號110861-200808）；電子天平（sartorius BS210S）；超聲波清洗機（昆山市超聲儀器有限公司）；硅膠G薄層色譜板（青島海洋化工廠），羧甲基纖維素鈉硅膠G（天津思利達科技有限公司），高效硅膠G（青島市基億達硅膠試劑廠）；試劑均為國藥集團化學試劑有限公司生產，均為分析純。

1.2 樣品制備 取鳳仙花藥材，粉碎，取粉末0.5 g，加甲醇-稀鹽酸（4∶1）20 ml，超聲處理30 min，濾過，濾液加水20 ml，用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇3 ml溶解，作為供試品溶液。

1.3 對照品溶液制備 取槲皮素和山奈酚對照品，加甲醇分別制成濃度為0.2和1 mg/ml的溶液，作為對照品溶液。

1.4 色譜方法 照薄層色譜法（中國藥典 2010年版一部附錄VI B）試驗，分別吸取上述樣品及對照品溶液各2 μl，分別點于同一羧甲基纖維素鈉硅膠G薄層板上， 以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸（10∶3∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以2%三氯化鋁乙醇溶液，置紫外光燈（365 nm）下檢視。

2 結果與分析

由圖1可見，供試品色譜在與對照品色譜相應位置上顯相同顏色的斑點。表明該方法方便、快捷，斑點圓整、清晰，分離效果佳，可作為鳳仙花中槲皮素及山奈酚的鑒別方法。

注：2為槲皮素對照品；4為山奈酚對照品；1、3、5、6、7為鳳仙花樣品。

圖1 鳳仙花TLC鑒別圖譜

3 討論

3.1 提取方法的比較 該試驗嘗試了多種提取方法：①以甲醇-稀鹽酸（4∶1）為溶劑，超聲處理30 min，濾過，濾液加水20 ml，用乙酸乙酯振搖提取3次，每次20 ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇3 ml溶解；②以甲醇為溶劑超聲處理30 min，濾過，濾液濃縮；③以乙醇為溶劑超聲處理30 min，濾過，濾液濃縮；④以硼酸飽和的水溶液為溶劑，回流1 h，濾過，濾液加稀鹽酸調pH至2～3，用石油醚（60～90 ℃）振搖提取3次，每次25 ml，棄去石油液，用乙醚振搖提取3次，每次25 ml，合并乙醚液，揮干，殘渣加甲醇1ml使溶解。比較上述4種提取方法（圖2）發現，以方法①所得色譜圖斑點清晰、圓整，指紋斑點豐富，分離效果佳。

3.3 不同薄層板的比較 試驗考察了青島海洋化工廠硅膠G板（圖4a）、青島市基億達硅膠試劑廠硅膠G板（圖4b）、天津思利達科技有限公司羧甲基纖維素鈉硅膠G板（圖1），結果發現，利用羧甲基纖維素鈉硅膠G板的分離效果最好。

參考文獻

[1]

河北省食品藥品監督管理局.河北省中藥飲片炮制規范[M].北京：學苑出版社，2003：30.

[2] 胡喜蘭，韓照祥，劉玉芬，等.鳳仙花不同提取物中山奈酚的測定[J].分析實驗室，2007，26（5）：33.

[3] 俞一心， 戈升榮， 王桂珍.槲皮素及其衍生物的藥理作用研究進展[J].中藥材， 2003， 26（12）：902.

[4] 王曉飛，于玲，杜華霜，等.三白草中槲皮素的薄層色譜鑒別[J].中國民族民間醫藥，2010（23）：61.

[5] 胡喜蘭，程青芳，尹福軍，等.鳳仙花中山萘酚的提取、分離與純化[J].時珍國醫國藥，2010，21（4）：932-933.