4745例人乳頭瘤病毒基因分型的臨床實驗結果分析

羅浩明

【摘 要】目的 探討邵陽地區女性中高危型和低危型人乳頭狀瘤病毒的感染狀況及其主要型別的分布特點。方法 利用PCR-反向點雜交法對2013年3月至2015年3月來本院就診的4745例女性患者樣本進行19種HPV基因亞型檢測，分別為16種中、高危型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304）和3種低危型HPV（6、11、43型），并對其檢測結果進行分析。結果 4745例中陽性1074例，HPV 檢出率為22.6%，單型感染者935例，占87.1%；多重感染者139例，占12.9%，共檢出1222株HPV亞型。其中中高危型以HPV16最多見，占所有HPV感染者的16.61%，其次為52、58型，分別占16.53%和14.57%。低危型以6、11、43型多見，分別占感染者的3.85%、2.86%和3.85%。結論 邵陽地區女性HPV感染以中高危型、單型感染為主，其分布依次是HPV16、52、58型，21-50歲各年齡段HPV感染率基本相同，≤20歲年齡段的HPV陽性感染率和低危亞型的陽性率明顯高于其它各年齡段。

【關鍵詞】人乳頭狀瘤病毒；宮頸癌；基因分型；單型感染；年齡

近年來，宮頸癌的發生率呈上升趨勢，是女性第二大惡性腫瘤，有數據顯示，宮頸癌占所有女性惡性腫瘤的25%[1]，世界范圍內發病率和死亡率僅次于乳腺癌，分別為15.2/10萬和7.8/10萬 [2]。研究已證實，人乳頭瘤病毒（HPV）是宮頸癌和宮頸上皮內瘤變的致病因素之一，尤其是感染高危型HPV更容易導致宮頸癌前病變，而宮頸癌的癌前病變期可逆[3]，因此，HPV感染并對其準確分型，進行早期干預治療對挽救患者性命具有重要的意義。在不同國家和地區，HPV感染率及亞型分布存在一定差異。本文對邵陽地區女性HPV的感染狀況及其型別分布特點進行分析，為臨床提高宮頸病變的準確診斷并制定相關干預措施提供科學依據。

1.資料與方法

1.1 樣本來源

選擇2013年3月至2015年3月在本院婦科就診的4745例女性患者，年齡范圍17-82歲。HPV雜交分型的樣本均為宮頸脫落細胞。標本采集步驟和要求按宮頸脫落細胞學取材常規進行，標本放置專用采集管內，立即用于檢測或保存于-20℃，3天內完成檢測。

1.2 儀器與試劑

基因擴增儀為ABI-7300實時熒光定量PCR系統，凱普醫用核酸分子快速雜交儀，試劑為中山大學達安基因股份有限公司提供的HPV基因分型檢測試劑盒（PCR-反向點雜交法），規格為單管單人份，10人份/盒。

1.3 實驗方法

標本的處理，HPV DNA 提取、HPV PCR擴增、核酸分子快速雜交，顯色分型等操作步驟及結果判讀均按試劑盒要求進行，能同時檢測19種亞型，其中16種中、高危亞型HPV（16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、CP8304）和3種低危亞型HPV（6、11、43型）。

1.4 統計學處理

采用SPSS13.0軟件包進行統計分析。率的比較采用χ2 檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 HPV亞型分布情況

對4745例女性患者樣本進行HPV分型檢測，結果顯示：1074例陽性，陽性率為22.6%，其中單型感染者935例，占87.1%；多重感染者139例，占12.9%。共檢出1222株HPV亞型，高危型1093株，占89.4%；低危型129株，占10.6%。其中HPV16型檢出率最高，占所有HPV感染亞型的16.61%，其次為52、58型，分別占16.53%和14.57%。低危型6、11、43型分別占感染亞型的3.85%、2.86%和3.85%。各型分布特點，見表1.

表1 HPV感染各亞型的分布情況

類別 基因型 單型感染例數 百分率（%） 多重感染例數 百分率（%） 合計 百分率（%）

中高

危型 16型 184 19.68 19 6.62 203 16.61

18型 36 3.85 7 2.44 43 3.52

31型 27 2.89 10 3.48 37 3.03

33型 49 5.24 6 2.09 55 4.50

35型 7 0.75 1 0.35 8 0.65

39型 5 0.53 16 5.57 21 1.72

45型 7 0.75 1 0.35 8 0.65

51型 31 3.32 9 3.14 40 3.27

52型 162 17.33 40 13.94 202 16.53

53型 81 8.66 25 8.71 106 8.67

56型 9 0.96 6 2.09 15 1.23

58型 149 15.94 29 10.10 178 14.57

59型 20 2.14 2 0.70 22 1.80

66型 26 2.78 14 4.88 40 3.27

68型 38 4.06 23 8.01 61 4.99

CP8304型 34 3.64 20 6.97 54 4.42

低危型 6型 11 1.18 36 12.54 47 3.85

11型 26 2.78 9 3.14 35 2.86

43型 33 3.53 14 4.88 47 3.85

合計 935 100.00 287 100.00 1222 100.00

2.2 不同年齡段感染HPV的分布情況

21-50歲各年齡段HPV感染率基本相同，≤20歲年齡組HPV感染陽性率達35.4%，低危型感染率為40.9%，明顯高于其它各年齡組，見表2.

表2 不同年齡段HPV感染各亞型的分布情況

年齡段（歲） 檢測例數 感染例數 單型感染例數 多重感染例數 HPV亞型例數 中高危HPV感染例數 低危HPV感染例數

≤20 48 17（35.4%） 13（76.5%） 4（23.5%） 22 13（59.1%） 9（40.9%）

21～30 913 212（23.2%） 187（88.2%） 25（11.8%） 235 179（76.2%） 56（23.8%）

31～40 1649 355（21.5%） 301（84.8%） 54（15.2%） 402 373（92.8%） 29（7.2%）

41～50 1574 368（23.4%） 322（87.5%） 46（12.5%） 421 400（95.0%） 21（5.0%）

51～60 446 95（21.3%） 87（91.6%） 8（8.4%） 108 98（90.7%） 10（9.3%）

≥61 115 27（22.6%） 25（92.6%） 2（7.4%） 34 30（88.2%） 4（11.8%）

合計 4745 1074（22.6%） 935（87.1%） 139（12.9%） 1222 1093（89.4%） 129（10.6%）

3.討論

人乳頭狀瘤病毒（HPV）是一種可引起女性黏膜組織良性及惡性腫瘤的病毒，其中某些HPV的亞型是宮頸癌的病原體[3]。依據不同型HPV與癌癥發生的危險高低分為低危型和高危型，而高危型HPV感染與宮頸高度鱗狀上皮內瘤變和宮頸浸潤之間有著密切的相關性[4]。有研究報道，HPV亞型感染率具有較大的地域差異，亞州國家感染率最常見的是HPV52型和HPV58型。中國女性最常見的HPV亞型感染頻率前五位的分別是HPV16、18、52、58、31型[5]。HPV感染率及亞型分布差異可能與種族、遺傳等因素有關。本研究共篩查了4745例女性，1074例陽性，陽性率為22.6%，其中單型感染者935例，占87.1%；多重感染者139例，占12.9%。一共檢出1222株HPV亞型。高危型感染為1093株，占89.3%。其中HPV16型檢出率最高，占所有HPV感染者的16.61%，并以單型感染為主。其次為52、58型，分別占16.53%和14.57%。低危亞型以6、11、43型多見，分別占感染者的3.85%、2.86%和3.85%，單一型感染占約88.7%，大于或等于兩重感染占約11.3%比例。研究顯示：本地區女性患者HPV感染以HPV16、52、58型為主，與無錫地區、湘潭地區等的報道一致，與重慶地區HPV16、58、52有所區別[6-7]。

有文章報道，年齡是宮頸癌和HPV感染的相關因素，HPV感染率的高低取決于人群的年齡和性行為[2]。本次調查發現，各年齡段HPV感染陽性率不同，≤20歲年齡組HPV感染陽性率達35.4%，其它各年齡組：21～30歲組、31～40歲組、41～50歲組、51～60歲組及≥61歲組HPV感染陽性率分別為23.2%、21.5%、23.4%、21.3%、22.6%。≤20歲年齡組HPV感染陽性率和低危亞型的陽性率與其它各年段比較，顯著高于其它各年齡組的HPV感染陽性率，差異有統計學意義（P<0.05），≥21歲的各年齡段HPV感染陽性率相互比較，差異無統計學意義（（P>0.05）。因此，女性HPV感染有年輕化和低齡化的趨勢。從表2中還可以發現，51～60歲組及≥61歲組HPV多重感染陽性率僅為8.4%，7.4%，低于其它各年齡段，說明隨著年齡的增長HPV亞型多重感染率逐步降低，具體原因是否與樣本來源有關，還是其它因素尚待進一步研究。

綜上所述，本研究結果有助于了解邵陽地區女性中高危型和低危型人乳頭狀瘤病毒的感染狀況及其主要型別的分布特點，對臨床提高宮頸病變的準確診斷具有重要的指導意義。因此加強對女性HPV亞型的檢測，能夠有效篩查出HPV高危感染人群，可以達到女性宮頸疾病早發現、早治療的目的，同時對篩查宮頸癌和宮頸癌手術后隨訪亦具有重要的臨床價值。

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