韓貞珍
1 臨床癥狀
牛群中有胎兒三毛滴蟲介入后生育力嚴重下降,后發展為返情、產犢間隔時間延長,因不能妊娠被淘汰牛的比例上升,出現子宮積膿和妊娠早期流產時提示低育。未孕牛常在返情時出現陰道膿性分泌物,直腸檢查觸摸子宮時常引起陰門流出分泌物,分泌物中能檢測到活動的胎兒三毛滴蟲。同樣,因胎兒三毛滴蟲感染所致子宮大量積膿,膿汁稀薄、無氣味、灰白色并且含有大量的胎兒三毛滴蟲。
患牛的臨床癥狀為妊娠并能妊娠至足月,沒有感染發生。病牛屢配不孕,但是沒有明顯的感染癥狀;發情規律或不規律。不能妊娠并發展成子宮內膜水腫,帶有絮狀的粘液性分泌物。患牛妊娠,但是在妊娠的第2~4個月流產,發展成子宮積膿并且無發情周期。
有的流產發生在妊娠的第2~4個月,妊娠第4個月后很少發生流產。妊娠晚期流產時,能在絨毛膜、胎肺和胎兒的胃腸道內檢測到胎兒三毛滴蟲。由于生長延遲,所以流產胎兒比相應的妊娠時期正常胎兒小。流產的病例,胎兒呈灰白色,并且連同胎膜一起被排出,沒有化膿癥狀,并且在羊水中很容易找到毛滴蟲。病牛流產后,寄生蟲很快(通常在7天內)從陰道分泌物中消失。
2 診斷方法
2.1 診斷樣品
奶牛胎兒三毛滴蟲的診斷最好能從子宮膿汁、陰道分泌物、子宮頸粘液或者流產材料中找到胎兒三毛滴蟲。最好的樣品是胎膜或流產胎兒的器官。交配感染后,感染的消除速率各不相同,因此未能找到微生物并不一定意味著早期沒有該病原。不要用被糞便污染的物質作為樣品檢測,因為這種樣品中可能含有非致病性的類似毛滴蟲樣的微生物。
公牛毛滴蟲病需檢查包皮的刮下物和包皮洗液。傳統的采樣方法是,用力刮包皮黏膜,盡可能多地獲得包皮垢。也有人建議,診斷毛滴蟲病時須用力刮包皮采樣。將公牛深度麻醉,用大約50毫升磷酸鹽緩沖液沖洗其包皮,檢測沖洗液,對診斷毛滴蟲病很可靠。最好在公牛性行為后5~10天進行檢測,以便檢測到更多的毛滴蟲。
2.2 檢測蟲體
任何可能包含毛滴蟲的材料都應該小心處置,因為毛滴蟲很脆弱,且死亡后迅速降解。如果對采集到的樣本處理不當,在檢測時蟲體將會消失。多種培養基可以用來培養毛滴蟲,其中有克勞森培養基、黛蒙德氏培養基、InPouch TF系統。培養后能觀測到蟲體。
現場培養用的InPouch TF系統由1個透明柔韌的塑料小袋組成,小袋分2層。上層含有特殊培養基,樣品接種于此。現場采集的用于直接接種到培養袋中的樣品,應是經包皮刮擦技術采集的。樣品與培養基充分混合后,擠入小袋下層,然后將小袋密封并在37℃條件下培養。可以直接將塑料小袋放顯微鏡下檢查毛滴蟲。在放大200~400倍的視野中觀察到活動的毛滴蟲可初步診斷。經常會在角落以及下半部近底部或小袋的接種層觀測到毛滴蟲。通過蟲體的大小、鞭毛和波狀膜來確定毛滴蟲。對于從公牛收集到的樣品,InPouch TF系統的靈敏度估計為84%~96%,而黛蒙德氏培養基的靈敏度為78%~99%,特異性達到100%。
近年來PCR檢測法也用于毛滴蟲的檢測。使用PCR檢測法可以區別牛陰莖包皮陷窩中是胎兒三毛滴蟲感染還是糞便毛滴蟲污染,可用于鑒別初步培養的胎兒三毛滴蟲,還可以用來直接診斷現場采集樣品中的毛滴蟲,并且比只采用培養法的靈敏度高。但是,采集到的樣品必須盡快進行檢測,保存會迅速降低靈敏度。
3 防控措施
淘汰公牛,并用人工授精代替自然交配;對母牛采取靈活的分組管理,合理使用公牛;對公牛和母牛進行治療或疫苗接種。
通過人工授精控制毛滴蟲感染的基礎是假設母牛在自行康復,并且如果用健康公牛的精液輸精代替自然交配,健康母牛不會發生感染。在所有的防控方法中,淘汰牛群中感染的公牛和采集未感染公牛的精液進行人工授精是最有效的方法。采用人工授精時,至少需要在同一個配種季節內對母牛完成配種,最好是在2個配種季節。在采用人工授精方法的起初階段,妊娠率較低。