國產注射用氨芐西林鈉雜質譜及生產工藝的探究

邵麗麗

【摘要】目的：在研究的過程中對注射用氨芐西林鈉雜質譜和不同的生產工藝進行研究和對比。方法：采用不同的檢測氨芐西林鈉相關的方法進行有效的檢測，同時還要嚴格的進行破壞性試驗，同時還要對各種雜質進行有效的檢測和辨別。按照190批次注射用氨芐西林鈉的各種檢驗結果為主要的依據，對不同的生產工藝所生產出來的藥品進行檢驗，從而能夠更好的了解產品當中雜質的具體成分和含量。結果：溶媒結晶樣品中的雜質含量是最少的，同時在雜質的數量上也要明顯少于其他樣品，在所有的樣品中，雜質含量最多的就是噴霧干燥樣品。結論：樣品當中的雜質含量和原料具體的生產方法存在著一定的聯系，在所有的影響因素當中，產品的生產工藝是影響其雜質數量和種類的最為重要的因素。

【關鍵詞】注射用氨芐西林鈉；雜質譜；生產工藝；相關性研究

【中圖分類號】R927 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2015）02-0653-020

氨芐西林鈉是率先應用于臨床治療的光譜半合成青霉素藥品，這種藥物對很多細菌的抑制作用機理和青霉素是非常類似的，這種藥物可以治療因為細菌導致的各種感染性疾病，當前，生產氨芐西林鈉的工藝主要有三種，一種是溶媒結晶法，一種冷凍干燥法，最后一種方法是噴霧干燥法，相關的研究表明溶媒結晶方法在氨芐西林鈉生產中的優勢更強，本文主要對氨芐西林鈉生產的相關工藝進行研究。

1、儀器與試劑

高效液相色譜儀，包括LC-10ADvp泵，SPD-10A紫外檢測器，SIL-10AXL型自動進樣器，色譜工作站。電子天平。三重四極桿質譜儀，配備電噴霧電離源（ESI）以及數據處理系統。

氨芐西林對照品（批號130410-200706，含量85.7%）、氨芐西林系統適用性對照品（批號130618-201001）和苯甘氨酸對照品（批號130415-200904）由中國食品藥品檢定研究院提供。190批次注射用氨芐西林鈉（其中溶媒結晶樣品46批次，冷凍干燥樣品84批次，噴霧干燥樣品60批次）均為2014年國家藥品評價抽驗樣品，分別由國內15家企業生產。乙腈為色譜純，水為超純水，其余試劑均為分析純。

2、實驗方法

按照中國藥典2010年版二部氨芐西林鈉有關物質的測定方法，對190批次樣品的有關物質進行測定，利用氨芐西林系統適用性對照品、苯甘氨酸對照品定位雜質峰，利用質譜技術推斷未知雜質，并歸納總結得到雜質譜；比對不同工藝樣品中雜質的個數及含量；同時經酸、堿、光、氧化、高溫破壞試驗對各雜質溯源。

液相色譜條件：色譜柱為C18柱（自裝，日本產富士填料）；流動相A為12%醋酸溶液-0.2mol檢出的雜質與氨芐西林系統適用性對照品色譜圖比對，結構已知的雜質有氨芐西林噻唑酸（雜質5）、二酮哌嗪-2（R）氨芐西林（雜質7）、氨芐西林開環二聚體（雜質8）、氨芐西林閉環二聚體（雜質10）和氨芐西林開環三聚體（雜質13）；通過與苯甘氨酸對照品的保留時間和UV光譜特性的比較，證明噴霧干燥產品中獨有的2號雜質為苯甘氨酸；但樣品中的另一較大雜質（雜質12）并非系統適用性對照品中標注的已知雜質。鑒于其極性較小、保留時間大于二聚物等特征，初步推斷為氨芐西林三聚物。收集該色譜峰的流出液、經固相萃取小柱濃縮洗脫后注入質譜儀進行確證，可見[M+H]+為1048的分子離子峰及[M+H]+為350的碎片離子峰。1048為閉環三聚體的分子離子峰，350為氨芐西林的分子離子峰，一分子閉環三聚體由一分子氨芐西林和兩分子氨芐西林噻唑酸組成，根據青霉素類抗生素的質譜裂解規律，可以確證該色譜峰為氨芐西林閉環三聚體峰。

對3種不同工藝樣品中的各雜質的含量進行比較，發現批號相近的溶媒結晶樣品中的雜質量遠小于其他2種工藝樣品；不同工藝樣品中最大雜質均為10號氨芐西林閉環二聚體，冷凍干燥樣品的閉環二聚體最大；國產氨芐西林鈉中的其他較大雜質還有氨芐西林噻唑酸、二酮哌嗪氨芐西林、閉環三聚體等。通過對酸、堿、光、氧化和熱加速試驗樣品及放置24h的溶液的檢測表明，氨芐西林鈉中14個雜質中的10個可在不同的條件下降解產生：1、3、6和11號雜質在各種加速實驗條件下均無明顯變化，推測為工藝雜質；2、4、5、7、8、9、10、12、13和14號雜質為降解雜質。

3、實驗結果

將190批次樣品中的氨芐西林二聚物（閉環二聚體）、其他單個最大雜質（除閉環二聚體外）、其他總雜質（除閉環二聚體外）的檢驗結果和生產企業提供的原料藥生產工藝等通過SPSS18.0統計軟件進行多因素相關分析，結果表明：原料藥生產工藝與樣品中的氨芐西林二聚物、其他單個最大雜質、其他總雜質等均顯著相關（P<0.01），說明原料藥生產工藝是影響產品雜質的重要因素。

4、討論

相關研究人員對雜質譜進行了詳細的分析之后發現，在三個樣品當中，噴霧干燥樣品中的雜質含量是最高的，同時雜質的種類也是最多的，產生這種現象的主要原因是在氨芐西林生產的過程中，氨芐西林在堿性較強的環境下發生了化學變化，而在冷凍干燥樣品當中，閉環二聚體的數量是最多的，產生這種現象的主要原因可能是氨芐西林在實驗中冷凍的時間過長，這樣也就會使得氨芐西林在堿性水溶液中會出現聚合反應，溶媒結晶的樣品當中，雜質的含量和其他樣品相比是最少的，雜質的種類相對也比較少，而且在結晶的過程中也可以將已經出現的雜質順利的清除，所以綜合各項因素來看，溶媒結晶樣品的質量要明顯好于其他的樣品質量。

在經過了加速試驗和雜質結構分析之后，研究人員發現氨芐西林在堿性條件下聚合的效果更佳，所以樣品中最大含量也最多的雜質就是閉環二聚體，想要完成開環水解就必須要加入氨芐西林噻唑酸，這種物質在水分條件下能夠更好的發揮作用，同時也能加速其生成，所以它也是雜質中數量最多的一種，除此之外，樣品中二聚物含量要比三聚物的含量高很多，這種現象也充分的證明聚合物的形成也是分級別的。

當前，生產氨芐西林藥物的方法和工藝越來越多，而不同的生產工藝也會使得藥品本身的質量存在非常大的差異，綜合各項因素考慮，在企業生產藥物的過程中應該采取溶媒結晶方法，這樣不僅能降低生產的成本，同時也能提高藥品自身的質量和有效性。

注射用氨芐西林鈉的內部分布是比較有規律的，細菌性腦膜炎的患者如果按照用藥的規定注射此藥，前三天腦脊液的濃度就會有明顯的降低，而正常情況下，人的腦脊液當中只含有少量的氨芐西林鈉，注射用氨芐西林鈉可以在胎盤的保護作用下到達羊水。如果肺部感染的病人肺部分泌液的濃度應該達到同期血糖水平的2%，所以在很多病癥中都可以使用氨芐西林鈉，同時還能夠體現出非常好的效果，對腎功能或者是肝功能不全的患者而言效果更加的明顯。

氨芐西林鈉溶液濃度愈高，穩定性愈差。在5℃時1%氨芐西林鈉溶液能保持其生物效價7天，但5%的溶液則為24小時。濃度為30mg/ml的氨芐西林鈉靜脈滴注液在室溫放置2～8小時仍能至少保持其90%的效價，放置冰箱內則可保持其90%的效價至72小時。穩定性可因葡萄糖、果糖和乳酸的存在而降低，亦隨溫度升高而降低。

供肌內注射可分別溶解125mg、500mg和1g氨芐西林鈉地0.9～1.2ml、1.2～1.8ml和2.4～7.4ml滅菌注射用水中。氨芐西林鈉靜脈滴注液的濃度不宜超過30mg/ml。

注射用氨芐西林在生產的過程中會產生一定數量的雜質，這也會使得藥品的質量受到不利的影響，而當前我國藥品生產的工藝也有了很大的發展，種類也越來越多，在這樣的情況下，需要選擇最好的工藝來組織生產，這樣才能保證生產質量。

參考文獻

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