八珍益母草涂膜劑提取工藝的優化

吳俊業

【摘要】目的：優化八珍益母草涂膜劑的制備工藝。方法采用正交試驗綜合評分法篩選八珍益母草涂膜劑制備的最佳提取工藝進行金葡球菌、大腸肝菌的抑制實驗，并從成品的外觀性狀、成膜時間、穩定性、皮膚刺激性等一系列指標評價涂膜劑的質量。結果：75%的乙醇回流提取兩次，每次1小時為制備該涂膜劑的質控步驟；該涂膜劑在體外抑菌試驗，外觀性狀、成膜時間、穩定性、皮膚刺激性均有良好表現。結論：該制備工藝可靠，質量穩定。

【關鍵詞】八珍益母草涂膜劑 提取工藝 優化

【中圖分類號】R285.5 【文獻標識碼】B【文章編號】1004-4949（2015）02-0656-01

八珍益母草由多種成分的藥物構成，比如當歸、白術等，共有9味中藥。八珍益母草有益身心健康，其主要的功能有益氣養血以及抗菌等。現代醫術研究證明，這種藥物還具有止血、抗炎等功效，所以其市場需求也就越來越高，因此對其提取工藝進行研究，提取更多的藥物，以滿足市場需求。中藥涂膜劑與我國中藥很長一段時間以來使用的外用劑型相比，優勢十分突出，其容納的中藥容量特別大，因為治療效果更加明顯，再加之，我國目前重要的生產現狀的主要是中藥與植物藥復方相結合，而中藥涂膜劑的提取正好適合這種生產現狀。

一材料

益母草、當歸、川育、甘草、熟地、黨參、炒白術、袂等、酒炒白芍，上述這些材料均來自于正軌的企業；除了上述幾種必備的材料之外，還應該準備牛肉，市場上銷售的牛肉即可；聚乙烯醇以及丙三醇，乙醇（其含量應該達到95%），上述試劑均來自于正規的醫藥公司；牛肉膏以及瓊脂等，均來自正規的實驗室；大腸桿菌以及葡萄球菌等均來自于正規某學校的實驗室。

二八珍益母草涂膜劑提取工藝

1.1正交試驗的設計

本實驗選用乙醇為提取溶劑用回流法進行提取。選擇三因素三水平的正交表Lg（34）進行實驗選擇乙醇濃度（A）、提取時間（B）、提取次數（C）作為考察因素海個因素選擇三個水平進行考察。

1.2中藥提取液的制備

將上述9味藥材飲片粉碎后稱取益母草409、黨參59、炒白術59、袂等59、甘草2.59、當歸109、炒白芍59、川育59、熟地黃1攤然后混合均勻；共準備9份上述混合樣品藥物。將上述混合樣品藥物在相同操作條件下，以不同濃度的乙醇為提取溶劑汾別所列的不同工藝組合進行回流提取后將獲得的提取液進行合并、過濾，減壓回收乙醇至無醇味濃縮成浸膏59。

1.3八珍益母草涂膜劑的制備

在查閱資料和預試驗研究結果的基礎上，確定八珍益母草涂膜劑的各成分比例為：浸膏19、聚乙烯醇1.59、無水乙醇1.sml、蒸餾水sml，附加劑為少量的甘油和山梨酸。將獲得的八珍益母草浸膏59均用蒸餾水定容成25ml放入冰箱中備用。稱取聚乙烯醇（AH一26）7.59，純凈后加入45ml的蒸餾水和少量甘油（1一2滴），使其充分膨脹在水浴上（85T）加熱直至完全溶解，隨后加入前面定容的益母草浸膏5ml邊加邊攪拌待其均勻溶解后加入7.5ml的無水乙醇和少量山梨酸，攪拌均勻后迅速分裝密閉，八珍益母草涂膜劑即制得標記備用。另取一份聚乙烯醇（AH一26），不加藥液，改加入50ml的蒸餾水其他操作均相同制成不含藥液的空白涂膜劑作為對照品備用。

3、性狀考察

首先，外觀，提取完成的八珍益母草涂膜劑一般呈現出來的顏色是淺綠色，還有些呈現出來的是棕綠色，黏性比較強，屬于液體，香氣獨特，有一種清涼的感覺；其次，成膜實驗，將所提取的八珍益母草涂膜劑分別涂抹于兩個不同的地方，一個是皮膚，另一個是玻璃板，并且做好相關記錄，上述幾組不同的提取工藝其成膜的時間大致相同，多則5分鐘，，少則3分鐘，成膜之后其延展性能優良，除此之外，其可塑性以及黏附性都非常好，而且沒有顆粒的感覺；再次，皮膚刺激性實驗研究，利用隨機抽取的方法，選擇9名實驗者，分別其手部以及胳膊等地方進行實驗，涂抹時間為10小時，持續3天，實驗人員的皮膚沒有不良反應，所以使用這種制劑非常安全，對皮膚幾乎沒有任何的刺激性；最后，穩定性，將提取完成的八珍益母草涂膜劑進行分裝，每個包裝都要適量，將其放在是室內進行儲存，3個月之后，進行觀察，發現每個指標都沒有出現異常情況，也沒有出現霉變等情況，除此之外，也無異味，細菌在其中也沒有滋生，從中可知八珍益母草涂膜劑穩定性能非常好。

4、抑菌實驗

采用平皿挖洞灌藥法比較復方益母草涂膜劑、水煎劑、空白涂膜劑的抑菌效果。

4.1牛肉膏蛋白膝培養基的配制

分別稱取蛋白陳1攤、牛肉膏39、氯化鈉59、瓊脂粉159，取少于總量的水于燒杯中將各培養基成分（瓊脂除外）逐一加入水中待溶，用文火加熱溶解并不斷攪拌，溶解后定容至1000ml。初配好的牛肉膏蛋白陳培養液屬微酸性，需用NaOH溶液調pH至7.2一7.4，用pH試紙調節其酸堿值。配制好的培養基分裝在相應的三角瓶內加棉塞，包扎三角瓶。將待滅菌的培養基放入加壓滅菌鍋內2小時。貯存供培養細菌用。

4.2菌懸液的配制

將供試菌種移接入相應的試管斜面培養基上將大腸桿菌、金黃色葡萄球菌置36-37T恒溫培養箱內培養24小時，用接種環挑取少許菌體于裝有無菌生理鹽水的試管內震動均勻，制成菌懸液。

4.3體外抗菌試驗結果

分析本次研究的八珍益母草涂膜劑在穩定性、皮膚刺激性、外觀上的差異不大對其制備工藝的篩選主要是通過在抑菌效果上的差異來確定其醇提工藝。從以上分析可以得出結論：各因素對實驗指標（抑菌效果）的影響按大小次序來說應當為A（乙醇濃度）>（提取次數）>B（提取時間下最好的方案為AZC3BI，即乙醇濃度75%提取3次提取2小時。可以看出這里分析出來的最好方案在已經做過的9次試驗中并沒有出現與它比較接近的第4號實驗和第5號實驗。但是實驗的抑菌效果4號實驗比第5號實驗略好而且從節約資源考慮，宜選擇4號實驗為最佳方案。

所以可以得出結論選取75%的乙醇回流提取兩次，每次回流1小時，作為八珍益母草涂膜劑的最佳提取制備工藝。因此此涂膜劑的主要制備工藝是：選取75%的乙醇回流兩次每次回流1小時其他同2.3項下同法操作后制備3批顯示良好的工藝重現性。

三討論

八珍益母草涂膜劑的提取工藝相對比較簡單，通常情況下，都是使用濃度差異比較明顯的乙醇，將看當作是溶劑，利用這種溶劑進行藥材的提取，精確的制備，最終達到最佳的濃縮狀態，直到呈現出糖漿狀態，之后再將其他類型的附加劑共同放入到乙醇溶液中，緩慢添加一定量的乙醇，進入到攪拌環節，注意攪拌的速度，快慢適宜，同時要注意均勻性，攪拌結束之后，進行質量檢查，分來進行包裝，密封好。完成上述一系列步驟之后，即可說完成八珍益母草涂膜劑提取的工作。這種涂膜劑的提取有別與其他制劑的提取工藝，其他制劑需要將溶劑揮發取得，但是八珍益母草涂膜劑的提取卻不需要此步驟，也正是因為如此，浸膏提取的方法對八珍益母草提取工藝有著非常巨大的影響，所以為了避免這種影響，本文所研究的八珍益母草涂膜劑提取工藝最終選擇不使用濃度不一致的乙醇溶液，這是實驗研究的重要一步。

八珍益母草涂膜劑是由多種不同的藥材構成，其中最重要的有益母草以及熟地黃等，這類藥材都具有非常大的功能，比如抗菌以及抗炎等，因此本文實驗研究的重要指標是體外抑菌指標，經過上述的實驗研究認為乙醇含量達到75%，同時回流2次，每次回流的時間都控制在1小時，這種提取工藝能夠取得最佳的效果。

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